CALM/arwiki huggingface dataset:
يرجى ملاحظة أن هذا الفصل يصف تطوير واستخدام طرق التنظيف القائمة على المذيبات، ولا يقدم قائمة كاملة بالتطبيقات والتعديلات.
تم اعتماد طريقة 3DISCO وتعديلها بعد وقت قصير من نشرها من قبل باحثين آخرين من أجل تحقيق أهداف محددة، مثل استخدام الترجيع. أو وسم الجسم المضاد (iDISCO)، اغسل الفئران بأكملها (uDISCO) أو عينات البارافين المستقرة من الفورمالين (DEPCO).
يشمل مؤلفو iDISCO (بمعنى "القدرة على إجراء التصوير المناعي للأعضاء التي يتم تنظيفها بالمذيبات") المعالجة المسبقة للعينات باستخدام الميثانول، وبيروكسيد الهيدروجين، والمنظفات، وثنائي ميثيل سلفوكسيد (DMSO)، ويتم مسح الجسم المضاد مسبقًا ووضع علامات عليه. تتغلب هذه المعالجة المسبقة على عيبين من أوجه القصور في تصنيف عينات كبيرة من الأجسام المضادة. أولاً، يقلل من التألق الذاتي للعينة ويحسن نسبة الإشارة إلى الضوضاء ؛ ثانيًا، يجعل الأنسجة أكثر نفاذية للأجسام المضادة. نتيجة لذلك، يمكن تلطيخ العينات الكبيرة (مثل أجنة الفئران أو أعضاء الفأر بأكملها) بنجاح باستخدام الأجسام المضادة ذات العلامات الفلورية، ثم مسحها ضوئيًا وتصويرها.
يعزز مؤلفو uDISCO (من "التصوير النهائي للأعضاء الخالية من المذيبات") انكماش الأنسجة، وهو تأثير متفرج شائع لإزالة الجفاف من العينة في الخطوة الأولى. استخدموا ثلاثي بوتانول بدلاً من THF للجفاف، واستخدموا أيضًا مستحلبًا آخر للتصوير، مما يجعله لامعًا أفضل من DBE. بسبب انكماش الأنسجة، يمكنهم مراقبة عينات بحجم جسم الفأر بأكمله. تجدر الإشارة إلى أن uDISCO ظهرت في وسائل الإعلام في جميع أنحاء العالم، بما في ذلك نيويورك تايمز ووول ستريت جورنال وBusiness Insider والطبيعة والعلوم. تم اختيارها أيضًا من قبل مجلة Nature كواحدة من أفضل عشر صور علمية لعام 2016.
DIPCO (من "تشخيص الأعضاء المطهرة الملصقة بالبارافين") عبارة عن خط أنابيب يجمع بين إزالة الكافيين لعينات الورم المضمن بـ FFPE، وإزالة iDISCO والنمذجة الظاهرية لأنسجة الورم. يتم تخزين عينات الورم FFPE على نطاق واسع في البنوك الحيوية واستخدامها للتشخيص، ويمكن أن يساعد تحليلها ثلاثي الأبعاد في تحسين التقسيم الطبقي لمرضى السرطان.
طُورت طرق الإزالة بما في ذلك 3DISCO في الأصل لأبحاث علم الأعصاب. يرجع السبب إلى التعقيد الكبير في مورفولوجيا ووظيفة الجهاز العصبي، وهي دراسة تستغرق وقتًا طويلاً وشاقة باستخدام طرق الأنسجة الكلاسيكية. لذلك، ركزت معظم الدراسات على الجهاز العصبي المركزي للفئران (القوارض هي واحدة من الكائنات الحية النموذجية الرئيسية في علم الأعصاب). استخدمها مؤلفو طريقة 3DISCO أولاً لدراسة تجديد الجهاز العصبي المركزي للفأر (CNS)، بما في ذلك عد الخلايا الدبقية الصغيرة والخلايا النجمية ورسم خرائط مسارات المحور العصبي بعد الإصابة. تم استخدام 3DISCO أيضًا لرسم خريطة لتطور الجهاز العصبي المركزي للفأر. تم استخدام iDISCO المحسّن لدراسة نشاط ووظيفة الدماغ في مرضى الزهايمر ونماذج الفئران أو لرسم خرائط لويحات الأميلويد والتهاب الخلايا الدبقية والتهاب الأوعية الدموية وخصائص الدماغ الأخرى. تم استخدام تعديل uDISCO بعد ذلك لرسم خرائط للخلايا العصبية أحادية الخلية بالكامل في الجهاز العصبي المركزي غير المقسم للفئران.
في السنوات الأخيرة، امتد تطبيق طريقة DISCO إلى العديد من الأنسجة الأخرى، بما في ذلك توطين الخلايا الجذعية أحادية الخلية المزروعة في أعضاء كاملة من الفئران، وتصوير أجنة بشرية كاملة في مراحل نمو مختلفة أو فحص وتشخيص أورام الأنسجة البشرية.
علم الجينوم الورمي هو مجال فرعي لعلم الجينوم يميز الجينات المرتبطة بالسرطان. يركز على التعديلات الجينومية والفوق جينومية والانتساخية في السرطان.
السرطان مرض وراثي ناتج عن تراكم الطفرات في الحمض النووي والتغيرات الفوق جينية التي تؤدي إلى تكاثر الخلايا بشكل غير مضبوط وتشكل الأورام. الهدف من علم الجينوم الورمي هو تحديد أنواع جديدة من الجينات الورمية أو الجينات الكابتة للورم التي قد توفر أساليب جديدة في تشخيص السرطان، والتنبؤ بالنتائج السريرية للسرطانات وتحديد أهداف جديدة للعلاجات السرطانية. أدى نجاح علاجات السرطان الموجهة مثل غليفيك وهيرسيبتين و أفاستين إلى زيادة الأمل في تحديد أهداف جديدة للعلاجات السرطانية بواسطة علم الجينوم الورمي.
إلى جانب فهم الآليات الجينية الأساسية التي تسبب أو تدفع تقدم السرطان، يستهدف علم الجينوم الورمي علاج السرطان المخصص. يحدث السرطان بسبب الطفرات في الحمض النووي الريبي منقوص الأكسجين (دنا) والتغيرات الفوق جينية التي تتراكم بشكل عشوائي. قد يؤدي تحديد واستهداف الطفرات لدى المريض الواحد إلى زيادة فعالية العلاج.
سهّل الانتهاء من مشروع الجينوم البشري تطور مجال علم الجينوم الورمي وزاد من قدرات الباحثين على العثور على الجينات المسرطنة. طُبقت تقنيات التسلسل وتقنيات التنميط الميثيلي العالمية لدراسة علم الجينوم الورمي.
بدأ عصر علم الجينوم في التسعينيات من القرن العشرين، مع تحديد تسلسلات الأحماض النووية للعديد من الكائنات الحية. في القرن الحادي والعشرين، أتاح الانتهاء من مشروع الجينوم البشري دراسة الجينوميات الوظيفية وفحص الجينومات الورمية. كان السرطان محط التركيز الرئيسي.
بدأ عصر علم الوراثة الوراثي بالتطور مؤخرًا، نحو عام 2000. أحد المصادر الرئيسية للتغيير فوق الجيني هو تغير مثيلة جزر CpG في منطقة المحفز في الجينات. يمكن لعدد من الأساليب المبتكرة مؤخرًا تقييم مستوى مثيلة الدنا في السرطانات مقارنةً مع الأنسجة السليمة. تعمل بعض الطرق على تقييم مثيلة CpGs الموجودة في أنماط مختلفة من المواقع الكروموسومية، بما في ذلك جزر وشواطئ ورفوف CpG، بالإضافة إلى المحفزات وأجسام الجينات والمناطق بين الجينات. يعتبر السرطان أيضًا محورًا رئيسيًا لدراسات علم التخلق (علم ما فوق الجينات).
يعد الوصول إلى تسلسل الجينوم السرطاني بأكمله أمرًا مهمًا لأبحاث السرطان (أو جينوم السرطان) للأسباب التالية:
يعد تحديد مستوى المثيلة مهمًا لأبحاث السرطان للأسباب التالية:
تم تحديد تسلسل الجينوم السرطاني أول مرة في عام 2008. حددت هذه الدراسة تسلسل جينوم اللوكيميا النخاعية الحادة والجينوم النظير الطبيعي الذي حُصل عليه من نفس المريض. كشفت المقارنة عن عشرة جينات طافرة. كان يُعتقد بالفعل أن اثنتين منها تساهمان في تطور الورم: التكرار الداخلي الترادفي لجين المستقبل FLT3، كيناز التيروسين، الذي ينشط إشارات كيناز ويرتبط بإنذار سيء، وغرز أربعة أسس في الإكسون 12 من جين NPM1. توجد هذه الطفرات في 25-30% من أورام اللوكيميا النخاعية الحادة ويعتقد أنها تساهم في تطور المرض وليست سببًا مباشرًا في حدوثه.
كانت الطفرات الثماني المتبقية عبارة عن طفرات جديدة وشملت تغيرات في أساس واحد فقط: كانت أربعة منها ضمن عائلات مرتبطة ارتباطًا وثيقًا بإمراضية السرطان (PTPRT وCDH24 و PCLKC وSLC15A1). لم يكن للأربعة الأخرى أي ارتباط سابق بإمراضية السرطان. تملك هذه الطفرات وظائف محتملة في المسارات الأيضية التي تقترح آليات تعمل من خلالها على تعزيز السرطان (KNDC1 وGPR124 وEB12 وGRINC1B).
تشارك هذه الجينات في مسارات يُعرف بأنها تساهم في إمراضية السرطان، لكن قبل هذه الدراسة، لم يكن معظمها معتبرًا في العلاج الجيني المستهدف. أثبت هذا التحليل أهمية نهج تسلسل الجينوم السرطاني الكامل في تحديد الطفرات الجسدية وأهمية التسلسل الموازي لجينوم الخلايا الطبيعية والورمية.
في عام 2011، تم تحديد تسلسل جينوم مريض استثنائي بسرطان المثانة كان قد أُزيل ورمه بواسطة عقار إيفيروليموس، وكشف التسلسل عن طفرات في جينين هما TSC1 وNF2. أخلّت الطفرات بتنظيم mTOR (هدف الثدييات من الراباميسين)، وهو البروتين الذي ثبطه عقار إيفيروليموس، ما سمح له بالتكاثر بشكل غير محدود. نتيجةً لذلك، في عام 2015، تشكلت مبادرة المستجيبين الاستثنائيين في المعهد الوطني للسرطان. تسمح المبادرة لمثل هؤلاء المرضى الاستثنائيين (الذين استجابوا بشكل إيجابي لمدة ستة أشهر على الأقل لعقار السرطان الذي يفشل عادةً) بتحديد تسلسل جينوماتهم لتحديد الطفرات ذات الصلة. عند تحديد هذا التسلسل، يمكن فحص المرضى الآخرين بحثًا عن هذه الطفرات ومن ثم إعطائهم الدواء. لتحقيق هذه الغاية، بدأت في عام 2015 تجربة لأدوية السرطان على الصعيد الوطني، شملت نحو 2400 مركز. يخضع المرضى الذين يعانون من الطفرات المناسبة لواحد من أصل أكثر من أربعين دواءً.
في عام 2014، أطلق مركز علم الأورام الجزيئي اختبار MSK-IMPACT، وهو أداة فحص تبحث عن طفرات في 341 جين مرتبط بالسرطان. بحلول عام 2015، خضع أكثر من خمسة آلاف مريض للفحص. كان وجود طفرات معينة لدى المرضى يؤهلهم للتسجيل في التجارب السريرية التي توفر العلاج الموجه.
ديسمبر ٢٠١٢)كانت سياسيّة ديموقراطيّة وعضوة ضمن مجلس نواب ميتشيغان. تم انتخاب نيرات لتمثل منطقة مجلس النواب ١٠٨ في ٤ نوفمبر ٢٠٠٨. تقع المنطقة ١٠٨ في شبه الجزيرة العليا وتشمل جميع مقاطعات دلتا وديكينسون ومينوميني. سبق لنيرات أن تترشح لنفس المقعد في عام ٢٠٠٦، وخسرت أمام النائب الحالي آنذاك توم كاسبرسون
وُلدت نيرات لأبوين ليو وإيرين كازمارشيك في داغيت، ميتشجان ، الواقعة في مقاطعة مينومين في ١٢ أغسطس ١٩٤٨. كان ليو كاتشماركزيك عاملاً في حوض بناء السفن البحرية في مارينيت ، ويسكونسن وعضوًا في اتحاد الأخوة الدولية لصانعي الغلايات تخرجت نيرات من مدرسة ستيفنسون الثانوية وكذلك من كلية ثقافة الجمال في ميلواكي، ويسكونسن. كانت تمتلك و تدير صالون لتصفيف الشعر في مينوميني بولاية ميشيغان لأكثر من ٣٤ عامًا. في عام ٢٠٠٤ ، تم اعتماد نيرات كمساعدة تمريض وعملت في مرفق معيشة محلي.
كانت نيرات متزوجة ولديها طفلان وخمسة أحفاد. عاشت في والاس بولاية ميشيغان ، وكانت تنتمي إلى الكنيسة الكاثوليكية المقدسة المخلصة.
في أغسطس ٢٠٠٩ ، تم تشخيص إصابة نيرات بالورم النخاعي المتعدد، وهو نوع من السرطان يصيب خلايا البلازما. أخذت وقتًا بعيدًا عن المجلس التشريعي لمحاربة المرض، وفقدت أكثر من ١٠٠ صوت. عادت بدوام كامل في نوفمبر ٢٠٠٩.
تم انتخاب نيرات لعضوية لجنة طريق مقاطعة مينومين في عام ١٩٩٨. وفي عام ٢٠٠٠ ، تم تعيينها في لجنة المفوضين لجمعية الطرق في مقاطعة ميشيغان. في عام ٢٠٠٢، تم تعيينها رئيسة للجنة المفوضين. تم انتخاب جودي في صندوق التأمين الذاتي لجمعية طريق المقاطعة في عام ٢٠٠٣ ، كواحد من تسعة مدراء. أعيد انتخابها في لجنة الطرق عام ٢٠٠٤.
في عام ٢٠٠٦ أعلنت عن نيتها الترشح كديمقراطية ضد ممثل الدولة الجمهوري الحالي توم كاسبور في المنطقة ١٠٨ في شبه جزيرة ميشيغان العليا. فازت نيرات بسهولة في الانتخابات التمهيدية الديمقراطية ، لكنها خسرت أمام كاسبر في الانتخابات العامة.
مع ذلك ، في عام ٢٠٠٨ ، لم يكن توم كاسبور قادرًا على الترشح لإعادة انتخابه بسبب حدود الولاية ، واختار بدلاً من ذلك الترشح لعضو الكونجرس بارت ستوباك. أعلنت نيرات مرة أخرى نيتها الترشح ، هذه المرة لمقعد مفتوح. هزمت نيرات جانيس بورغيس بفارق ضئيل في الانتخابات التمهيدية الديمقراطية ، وفازت بـ ٧٦صوتًا فقط. في الانتخابات العامة في نوفمبر ، واجهت نيرات الجمهوري مايك فالكون من جلادستون. وفاز نيرات بالمقعد بنسبة ٥٦٪ من الأصوات. قامت بحملة في الأسابيع الثلاثة الأخيرة التي سبقت الانتخابات مع إصابتها بكسر في الفخذ قبل أن تخضع لعملية جراحية لاستبدال مفصل الورك في أواخر أكتوبر.
نُقل عن نيرات في ٣ فبراير ٢٠٠٩ ديلي برس فيما يتعلق بإعلان حاكمة ميشيغان جينيفر جرانهولم أن الولاية ستتوقف عن دعم معرض ولاية شبه الجزيرة العليا بقولها : «لا أعرف من أين بدأت هذه الشائعات. ومع ذلك ، حتى هذه النقطة، لم تقدم الدولة أي تمويل حكومي لدعم المعرض».
توفيت نيرات بتاريخ ٢٣ ديسمبر ٢٠١٢.
النوكليوتيدات الأمينية 1I هي نيوكليوتيدات قاعدية معدلة تحتوي على أليلامين. يتم استخدامها لوضع العلامات اللاحقة للأحماض النووية عن طريق الكشف عن التألق في المصفوفات الدقيقة. يتفاعل مع مجموعة إستر N-hydroxysuccinimide ، مما يساعد على ربط الصبغة الفلورية بالمجموعة الأمينية الأساسية للنيوكليوتيدات. تسمى هذه النيوكليوتيدات 5- (3-amino allele) -nucleotides لأن مجموعة aminoallyl عادة ما تكون مرتبطة بحلقة بيريميدين 5-carbon من اليوراسيل أو السيتوزين مجموعات الأمين الأولية في جزء aminoallyl هي أليفاتية وبالتالي أكثر تفاعلاً من مجموعات الأمين المرتبطة مباشرة بالحلقة (العطرية). الاسم العام للنيوكليوسيدات aminoallyl ، واختصاره في البداية باسم AA- أو AA- للإشارة إلى aminoallyl. يشار إلى السكريات المكونة من 5 الكربون مع أو بدون حرف صغير "d" (إذا تم تضمينه) للإشارة إلى deoxyribose ، وإذا لم يتم تضمينه ، فإنه يشير إلى ribose. أخيرًا ، يُشار إلى عدد القواعد النيتروجينية والفوسفات (أي ، aa-UTP = aminoallyl uridine ثلاثي الفوسفات).
والغرض من ذلك هو الجمع بين الفلورة والحمض النووي لتوفير ملصق غير نظيري يمكن استخدامه لدراسة الحمض النووي أو الحمض النووي الريبي. تسمح هذه العلامة للعلماء باستخدام الأحماض النووية الأخرى لدراسة بنية أو وظيفة أو تكوين الحمض النووي أو الحمض النووي الريبي. في عام 1971 ، حدث أول تعديل أساسي لوضع العلامات الفلورية على 4-ثيوريدين و 4-ثيوراسيل. هذه وغيرها من الدراسات ، بما في ذلك التوسيم المباشر وغير المباشر بالنظائر أو إضافة الإنزيم أو طرق أخرى ، تجعل وسم النوكليوتيدات أكثر أمانًا للعلماء لدراسة الحمض النووي.
مع التطوير المستمر للمعدات والتكنولوجيا في مجال المصفوفة الدقيقة للحمض النووي ، ستكون هناك حاجة إلى كواشف وتكنولوجيا أفضل لمزيد من البحث العلمي. يثبت وضع العلامات الفلورية باستخدام Cy3 أن النتائج غير كافية ومنحرفة. بدلاً من ذلك ، تم اختيار طريقة اندماج النوكليوتيدات الأمينية. يبدو أن استخدام النيوكليوتيدات aminoallyl كعلامات الفلورسنت غير المباشرة للقضاء على مشاكل الحساسية التي تنشأ في ملصقات السيانين.
نتيجة الجمع بين الطريحة والنقيضة.
يمكن تصنيع نيوكليوسيدات Aminoallyl عن طريق اقتران Heck ، كما هو موضح في الشكل أدناه.
في الصورة أعلاه ، على اليسار يوجد نيوكليوسيد معدل مع اليود (يضاف اليود عن طريق الهالوجين الكهربائي ) في الكربون الخامس في حلقة البيريميدين. يمكن أن يرتبط تكوينه بتفاعل مع أليلامين والعديد من الكواشف عن طريق اقتران هيك قادرة على إزالة مجموعة الهالوجين من القاعدة وإضافة الأليلامين ليصبح نيوكليوزيد أمينيل الموضح على اليمين. ثم استخدم المنتج الموجود على اليمين للبيولوجيا الجزيئية لتخليق الحمض النووي الريبي.
تتضمن التفاعلات الأخرى تخليق وعاء واحد مع الهالوجينات الأخرى.
تتفاعل الأمينات الأولية في النيوكليوتيدات الأمينية مع الأصباغ الأمينية التفاعلية (مثل أصباغ السيانين الحاصلة على براءة اختراع والتي تحتوي على مجموعات ترك تفاعلية ، مثل إستر سكسينيميد (NHS)). لا تتأثر مجموعة الأمين المتصلة مباشرة بالحلقة الأساسية. تستخدم هذه النيوكليوتيدات لوصف الحمض النووي.
يستخدم Aminoallyl NTP في PCR ، وترجمة نيك ، وتمديد التمهيدي ، ووسم الحمض النووي غير المباشر في تخليق (كدنا). لا يمكن استخدام NTPs المصنفة بسبب تطبيقها في مختبرات البيولوجيا الجزيئية ، فهذه الأماكن لا تملك القدرة على التعامل مع المواد المشعة ، لذا فهي مفيدة. على سبيل المثال ، يعتبر 5- (3-aminoallyl) -uridine (AA-UTPs) أكثر فاعلية في وضع العلامات عالية الكثافة للحمض النووي مقارنةً بالتوسيم المسبق للحمض النووي. بعد إضافة NTP إنزيميًا ، يمكن إضافة الأصباغ الفلورية المتفاعلة للأمين للكشف عن جزيئات الحمض النووي. عند دمج جزيئات DNA أو RNA بواسطة بوليميريز DNA / RNA ، يوفر 5- (3-aminoallyl) -UTP مجموعة تفاعل لإضافة مجموعات كيميائية أخرى. لذلك ، يمكن تمييز DNA أو RNA المعدل aminoallyl عن أي مركب يحتوي على مجموعة amine-Reactive group. يمكن استخدام aa-NTPs المضمنة في DNA / RNA بالاشتراك مع كاشف اقتران الصبغة الثاني لتحقيق تحليل الصفيف.
لأغراض الكشف ، يعتمد cDNA على ملصق aminoallyl. على الرغم من أن الوسم المباشر باستخدام dNTP هو أسرع وأرخص طريقة لوضع العلامات الفلورية ، إلا أنه غير مريح لأن التسلسل يسمح فقط باستخدام نوكليوتيد واحد معدل. هناك عيب آخر في وضع العلامات المباشرة وهو النيوكليوتيدات الكبيرة ، ولكن يمكن التغلب على ذلك عن طريق وضع العلامات غير المباشرة باستخدام نيوكليوتيدات معدلة أمينيًا. طريقة سهلة للتحقق من أن الملصق يعمل بشكل صحيح هو استخدام اللون. تُنتج الملصقات المؤهلة اللون الأزرق المرئي (Cy5) أو الأحمر (Cy3) في المادة النهائية.
عملية أخرى تستخدم ملصقات aminoallyl هي NASBA (التضخيم المستند إلى تسلسل الحمض النووي) ، وهي تقنية تضخيم RNA حساسة للغاية. في هذه الحالة بالذات ، في سوق المصابيح الفلورية ، يتم تمييز الحمض النووي الريبي المعدل aaUTP بـ Cy3. يعتبر الجمع بين NASBA و aminoallyl-UTP مفيدًا جدًا للعديد من المجالات المختلفة للتشخيص الميكروبي ، بما في ذلك المراقبة البيئية واكتشاف التهديدات البيولوجية ومراقبة العمليات الصناعية وعلم الأحياء الدقيقة السريرية. ميكروأري DNA هي طريقة أخرى تستخدم AA-NTP حصريًا ، مما يجعل اختبار المصفوفة الدقيقة للحمض النووي أسرع وأرخص.
يتجنب الملصق المركب المشاكل التي ينطوي عليها الإدخال الأنزيمي المباشر لـ dNTPs المسمى Cy عن طريق إنشاء مجسات بنفس وظيفة وضع العلامات. عن طريق وضع العلامات غير المباشرة ، يمكن دمج NTP المعدل في الأمين أثناء النسخ العكسي أو تضخيم الحمض النووي الريبي أو تفاعل البوليميراز المتسلسل. أثناء عملية البلمرة ، تم دمج aminoallyl NTP بكفاءة مماثلة لتلك الخاصة بـ NTP غير المعدل.
مشكلة الوسم: تتفاعل مجموعة الأمين في النيوكليوتيد المعدل أمينيًا مع الأصباغ مثل سلاسل السيانين أو الأصباغ الأخرى الحاصلة على براءة اختراع. تنشأ المشاكل عندما تتفاعل الصبغة مع العامل العازل الضروري للتخزين الكافي للنيوكليوتيدات. ومع ذلك ، يمكن استخدام مخازن الكربونات لحل هذه المشكلة.
يشير التاريخ المبكر لسنغافورة إلى حقبة ما قبل الاستعمار قبل عام 1819، عندما أقامت شركة الهند الشرقية البريطانية بقيادة السير توماس ستامفورد رافلز مستوطنة تجارية في الجزيرة وبدأ تاريخ سنغافورة.
قبل عام 1819، كانت الجزيرة معروفة بعدة أسماء، ولعل المرجع الأول الذي ذكرها كان في عمل بطليموس في القرن الثاني والذي حدد ميناءً ساحليًا في أقصى الطرف الجنوبي لشبه جزيرة ملايو، يُدعى "سابانا". ومع ذلك، ذكر المؤرخون عمومًا سجل مسافر صيني من القرن الثالث يصف جزيرة في نفس الموقع تسمى بو لو تشانغ، نُسخ هذا الاسم المبكر لسنغافورة باللغة الملايية إلى "جزيرة أوجونج"، كأول تسجيل لوجودها.
عُرفت سنغافورة من القرن الثالث عشر إلى القرن الرابع عشر باسم تيماسيك، وهو اسم مسجل أيضًا في المصادر الصينية باسم دان ما شي، وهي دولة سُجلت على أنها تضم مستوطنتين مختلفتين – لونغ يا مين وبان زو. ربما تغير الاسم إلى سنغافورة في نهاية القرن الرابع عشر. سكن في الجزيرة بالتناوب السياميون والجاويون في القرن الرابع عشر. هرب بارامسوارا (إسكندر شاه)، آخر حاكم لسنغافورا، إلى ملقا بعد هجوم شنه الجاويون أو السياميون، وأسسوا ولاية ملقا. حُكمت سنغافورة من قبل سلطنة ملقا في القرن الخامس عشر وسلطنة جوهور من القرن السادس عشر.
يعود أول ذكر محتمل لسنغافورة المبكرة إلى المراجع الخرائطية في القرن الثاني الميلادي لعمل عالم الفلك اليوناني الروماني بطليموس "الجغرافية". حيث وُضعت علامة على مكان يُدعى سابانا أو سابارا على الخريطة الحادية عشرة لآسيا عند الطرف الجنوبي لغولدن خيرسونيس (أي شبه جزيرة ملايو) حيث قد تقع سنغافورة. حُددت على أنها "نومينون امبوريون" أو ميناء تجاري أجنبي، كجزء من سلسلة من المراكز التجارية المماثلة التي ربطت جنوب شرق آسيا بالهند والبحر الأبيض المتوسط. ومع ذلك، يختلف تشخيص سابانا أو سابارا، حيث يقترح عدد من المؤلفين أن تكون في سلاغور أو بالقرب من كلاغ، أو جنوب ملقا أو جنوب جوهور، وكذلك جزيرة سنغافورة نفسها. لم يُعثر على أي دليل أثري من هذه الفترة في سنغافورة.
وصف سجل صيني مكتوب من القرن الثالث جزيرة بو لو تشونغ والذي هو على الأرجح نسخة من جزيرة أوجونج المالايوية، الذي «أصبح في النهاية» (شبه جزيرة ملايو). يذكر السجل باختصار سرد إشاعات عن وجود آكلي لحوم البشر مع ذيول يبلغ طولها 5 أو 6 بوصات يعيشون هناك.
صخرة سنغافورة.
صخرة كبيرة يبلغ ارتفاعها وعرضها 3 أمتار، منقوشة بالكتابات، كانت موجودة عند مصب نهر سنغافورة، لكنها فُجرت فيما بعد عندما وُسع حصن فوليرتون واتسع مصب النهر. بقيت شظايا قليلة فقط، وأصبحت تُعرف باسم حجر سنغافورة. اقتُرحت تواريخ مختلفة بين القرنين العاشر والثالث عشر للنقوش التي لم تفك شيفرتها حتى الآن، ويُقترح أن يكون النص مرتبطًا بتلك المستخدمة في سومطرة في تلك الفترة.
تيماسيك.
كانت سنغافورة المبكرة تسمى «تيماسيك»، وربما كانت الكلمة مشتقة من «"تاسيك"» (التي تعني باللغة الملايية البحيرة أو البحر) وفُهمت أنها تعني مدينة البحر في ملايو. سُجلت، ناجاراكريتاجاما، وهي قصيدة ملحمية جاوية كتبت في عام 1365، في جزيرة تسمى "توماسيك". ورد الاسم أيضًا في السجلات التاريخية لملايو الذي يُعتقد أنه كُتب في عام 1535. قد يكون لتماسيك علاقة دبلوماسية مع فيتنام، والتي سجلتها على أنها "ساش ما تيش"، في وقت مبكر من القرن الثالث عشر. كما سجلها المسافر الصيني وانغ دا يوان الذي زار الجزيرة بنحو عام 1330 ووصف مكانًا يُدعى دان ما شي (نسخ من لغة ملايو تيماسيك). كُتب اسم دان ما شي أو تيماسيك بالغة بالصينية في خريطة ماو كون.
سنغافورة كجزء من سلطنة ملقا.
تشير الأدلة الأثرية إلى أن المستوطنة الرئيسية في حصن كانينغ تُخلي عنها في غضون ذلك الوقت تقريبًا، رغم استمرار وجود مستوطنة تجارية صغيرة في سنغافورة لبعض الوقت في الفترة التي تلت ذلك. أصبحت سنغافورة جزءًا من إمبراطورية ملقا، وقيل إنها إقطاعة لقسامان الأسطورية (أو الأدميرال) هانغ تواه. ومع ذلك، بحلول الوقت الذي وصل فيه البرتغاليون في أوائل القرن السادس عشر، كانت سنغافورة، التي كانت موجودة قبل تأسيس ملقا، قد أصبحت بالفعل «أطلالًا عظيمة» وفقًا لمحتل ملقا القائد ألفونسو دي ألبوكيرك.
بداية الحكم الاستعماري.
خلال القرن السادس عشر وأوائل القرن السابع عشر، استعادت لفترة وجيزة بعض الأهمية كمركز تجاري لسلطنة جوهور. في عام 1613، أحرق الجنود البرتغاليون المستوطنة عند مصب نهر سنغافورة وغرقت الجزيرة بشكل غامض. لم تؤسس سنغافورة الحديثة حتى عام 1819، عندما أسس سير إنكليزي يدعى توماس ستامفورد رافلز مركزًا تجاريًا بريطانيًا في الجزيرة.
سبيس إكس CRS-2 المعروفة أيضا باسم SPX-2 هي رحلة غير مأهولة وهي الرحلة الرابعة لمركبة سبيس اكس دراجون الفضائية، وتُعتبر الرحلة الخامسة والأخيرة لمركبة الإطلاق ، وثاني مهمة تشغيلية لشركة سبيس إكس مع وكالة ناسا بموجب عقد .
أطلقت سبيس إكس الرحلة في 1 مارس 2013، وعند وصولها إلى المدار حدثت مشكلة فنية بسيطة في مركبة دراجون الفضائية التي تتضمن كبسولات نظام تحكم رد فعلي، ولكنها كانت قابلة للاسترداد، في 26 مارس 2013 عادت المركبة وسقطت في المحيط الهادئ في الساعة 16:34 بالتوقيت العالمي.
تم تأجيل عملية شحن "المرحلة الأولى من فالكون 9" من تكساس إلى موقع الإطلاق في فلوريدا خلال التحقيقات المُتعلقة بتعطل المحرك في الرحلة السابقة، وفي أواخر نوفمبر 2012 تم نقل "CRS-2 فالكون 9" إلى قاعدة كيب كانافيرال للقوات الجوية في فلوريدا، وأُجري "" لمركبة الإطلاق في 25 فبراير 2013.
عند إطلاق صاروخ "دراغون 9" كان يحمل نحو من البضائع، منها بدون تغليف، تشمل البضائع من إمدادات الطاقم، و من أجهزة التجارب، و من أجهزة المحطة، وغيرها من العناصر المتنوعة منها نسخة من أغنية "Up in the Air" لفرقة 30 سكوندز تو مارس في قرص مضغوط، والتي عُرضت لأول مرة خلال بث تلفزيوني لوكالة ناسا من محطة الفضاء الدولية في 18 مارس 2013 من المحطة.
أعادت المركبة حمولة بضائع يبلغ وزنها ، من بينها بدون تغليف، وشملت الحمولة المُعادة من إمدادات الطاقم، و من أجهزة التجارب، و من معدات المحطة الفضائية، و من معدات بدلات الفضاء وأشياء أخرى متنوعة.
باقي المهمة (من 3 إلى 26 مارس).
في 6 مارس 2013 إزال نظام الخدمة المتنقلة كندارم 2 قضبان التثبيت من صندوق دراجون، وهي أول مرة تُسلم مركبة فضائية تجارية شحنة غير مضغوطة إلى محطة الفضاء الدولية.
وبسبب سوء الأحوال الجوية في موقع الهبوط المُحدد في المحيط الهادئ تأجلت عودة المركبة الفضائية إلى الأرض إلى 26 مارس بدلًا من 25 مارس.
وقفت المقاومة المولدوفية خلال الحرب العالمية الثانية ضد ألمانيا النازية ورومانيا المتحالفة مع دول المحور، فكانت جزءًا من حركات المقاومة السوفياتية (البارتيزان السوفيات). تأسست جمهورية مولدوفا الاشتراكية السوفياتية، والتي تشكل اليوم دولة مولدوفا، في شهر أغسطس عام 1940 عقب إلحاقها بالاتحاد السوفياتي، ثم أُخضعت من جديد على يد رومانيا إثر عملية بارباروسا. توسعت المقاومة المولدوفية لتشمل حدودًا إدارية جديدة، فبين عامي 1941 و1944، أُعيد دمج بيسارابيا برومانيا وأصبحت الأولى مقاطعة ذات حكم شبه مستقل، بينما أدارت مقاطعة ترانسنيستريا الرومانية المناطق الممتدة على طول نهر دنيستر. بعد مرور فترة قصيرة على الغزو الروماني–الألماني بين شهري يونيو ويوليو عام 1941، طالب الحزب الشيوعي المولدوفي بإنشاء شبكة من المقاومة. لم يسهم الطلب في إنشاء حركة منظمة جراء التفكك السريع للبنى الإقليمية السوفياتية في بيسارابيا. فضل بعض المنظمون الأوائل التخلي عن مناصبهم، بينما قُضي على معظم محاولات السوفيات لاختراق البارتيزان المخضرمين على طول خطوط الجبهة، وذلك بفضل خدمات الاستخبارات الخاصة الرومانية. على أي حال، استطاعت تشكيلات البارتيزان تنظيم هجمات واسعة النطاق على البنى التحتية الرومانية، في مدينة بيندر وأماكن أخرى. ميّزت الوثائق الرومانية فئات السكان المحليين المتأثرين بالأفكار الشيوعية وصنفتهم كعناصر خاملة من المقاومة، بينما يشير العديد من المعلقين المعاصرين إلى الكره العام للشيوعية في بيسارابيا باعتباره شهادة عن هامشية حركة المقاومة تلك.
أُوكل نيكيتا سالوغور، السكرتير الأول للحزب الشيوعي المولدوفي، بمهمة تأسيس فرعٍ للمقاومة في بيسارابيا وترانسنيستريا من مقرّه الرئيس في لنينسك. ارتبطت قوات العصابات الناشئة بالحزب الشيوعي المولدوفي والمقر الرئيس المركزي لحركة البارتيزان، لذا كانت قوات متعددة الجنسيات. وبينما كانت نسبة الرومانيين والمولدوفيين فيها ضئيلة عمومًا، كانت بعض مجموعات المقاومة الأخرى نشطة دائمًا ضد الجيش الروماني في بيسارابيا، وحتى عام 1944، قاتلت وحدات المقر الرئيس المركزي المخصصة لمولدوفا ضد قوات الفيرماخت النازية وجيش التمرد الأوكراني ضمن مفوضية الرايخ في أوكرانيا. كان فاسيلي أندرييف وإيفان أليشين ونيكولاي ميخايلوفيتش فرولوف وغيراسيم رودي من أبرز قادة قادة المفاومة المولدوفية.
منذ عام 1943، وتزامنًا مع تغيّر الوضع على الجبهة الشرقية بشكل دراماتيكي، تزايد نشاط البارتيزان، وتزايد أيضًا القمع الممارس ضدها من طرف القوات الرومانية والألمانية. نُقلت وحدتان من الاستخبارات المضادة الرومانية إلى بيسارابيا، وهما الوحدتان بي وإتش، للمساهمة في المجهود. سقطت بيسارابيا الشمالية بيد السوفيات خلال عمليات هجوم دنيبر–كاربات في أوائل العام 1944، ما جعل الجبهة الجنوبية مكشوفة ومعرضة لمزيد من الاختراق على يد منظمة المخابرات السوفياتية سميرش، ما أدى إلى تحريك قوات البارتيزان المولدوفية لمساعدة الجيش الأحمر. عقب الزحف السوفياتي نحو رومانيا، تأسست جمهورية مولدوفا الاشتراكية السوفياتية بشكل كامل، وبدأت سميرش مطاردة المولدوفيين الذين شاركوا في مساعي مقاومة حركات البارتيزان. شهد هذا الصدام مذابحًا بحقّ البارتيزان المأسورين على يد قوات المحور المنسحبة، في معسكرات أُقيمت ضمن تيراسبول وريبنيتا.
أطرى التأريخ وكتابات البروباغندا (الدعاية) السوفياتيين على المقاومة المولدوفية ضد النازيين، وظهر ذلك في رواية "الحارس اليافع" لألكسندر فادييف. أعاد الكثير من المؤلفين، المعادين للسوفياتية وفي فترة ما بعد السوفياتية، النظر في تلك الصورة، ووصفوا البارتيزان في بعض الحالات بالإرهابيين. لا تزال بعض الخلافات قائمة حول دور الأقليات، تحديدًا يهود بيسارابيا الذين استُهدفوا أثناء الهولوكوست، والذين حجبت إسهاماتهم عمومًا في المصادر السوفياتية. في المقابل، طرح الكاتب الروماني قسطنطين فيرجيل جورجيو ادعاءات جدلية تفيد بأن كافة مجموعات البارتيزان تألفت من اليهود بشكل رئيس.
الحضور المبكر.