[en] Alzheimer's disease (AD) is rapidly becoming one of the most lethal, expensive and burdening diseases of this century representing up to 60 - 70 % of dementia cases. During many years, multiple drugs developed to treat this pathology have been designed assuming that amyloid β-peptide (Aβ) drives the disease. However, this approach has not yielded therapeutics that cure or produce significant improvements. In this regard, a broader outlook considering alternative mechanisms driving AD may be required. Different kinds of dementia, including AD, are related with several risk factors such as pathological vascular alterations (i.e. diabetes, atherosclerosis and malignant hypertension) and disturbances in brain microcirculation (i.e. defective blood-brain barrier functions and breakdown). This relationship evidences an intercellular communication between the cerebrovasculature and neurons, which is mainly mediated by multiple messenger molecules known as angioneurins. To study this interrelation and the role of these signaling factors, we decided to focus on the neurovascular unit (NVU) and we established a new in vitro system constituted by microvascular endothelial cells, neurons and astrocytes. We took advantage of the human cerebral microvascular endothelial cell line (hCMEC/D3) expressing the human semicarbazide-sensitive amine oxidase, also known as vascular adhesion protein-1 (hSSAO/VAP-1) as a model of vascular alteration in AD. hSSAO/VAP-1 was described to be increased in plasma and cerebrovascular tissue from AD patients. Analyzing endothelial-secreted angioneurins in these cells we observed that hSSAO/VAP-1 expression induced an activity-independent significant decrease in its brain-derived neurotrophic factor (BDNF) releasing levels. Assessing the impact of such BDNF reduction on neurons we found that, co-culturing with hSSAO/VAP-1 endothelial cells in a context mimicking Aβ pathological presence induced a decrease of PSD95 and GluA1 synaptic protein levels. Moreover, we determined the relevance of having the appropriate endothelial-secreted BDNF levels for neuronal network maintenance. In summary, our results revealed for the first time that hSSAO/VAP-1 enzyme alters endothelial BDNF secretion and that this neurotrophin is a critical mediator between endothelial cells and neurons within our NVU in vitro system. In fact our results suggest that hSSAO/VAP-1 induces a sensitization, due to endothelial-secreted BDNF reduction, of co-cultured neurons to face an aversive stimulus such as Aβ. On one hand, BDNF is a key factor involved in AD pathology as its depletion has been associated with the main pathological hallmarks of the disease. On the other hand, the hSSAO/VAP-1 is increased in several systemic vascular pathologies, also considered risk factors for AD. Therefore, although more experiments are required, we suggest that designing a potential therapeutic strategy based on BDNF and/or decreasing the hSSAO/VAP-1 expression may result extremely powerful.

[es] La enfermedad de Alzheimer (EA) se está convirtiendo rápidamente en una de las enfermedades más letales, costosas y estresantes de este siglo representando hasta el 60 - 70 % de los casos de demencia. Durante muchos años, múltiples fármacos desarrollados para tratar esta patología han sido diseñados asumiendo que el péptido β-amiloide (Aβ) desencadena la enfermedad. Sin embargo, esta aproximación no ha originado terapias que curen o produzcan mejoras significativas. En este aspecto, una perspectiva más amplia, que considere mecanismos alternativos en el desarrollo de la EA, es necesaria. Diferentes tipos de demencia, incluyendo la EA, están relacionados con diversos factores de riesgo como son las alteraciones de patologías vasculares (por ejemplo diabetes, aterosclerosis y la hipertensión maligna) y perturbaciones en la microcirculación cerebral (por ejemplo en las funciones de la barrera hematoencefálica y su disrupción). Esta relación evidencia una comunicación intercelular entre la vasculatura cerebral y las neuronas, la cual está principalmente mediada por múltiples moléculas mensajeras conocidas como angioneurinas. Para estudiar esta interrelación y el papel de estos factores de señalización, decidimos centrarnos en la unidad neurovascular (NVU) y establecimos un nuevo sistema in vitro constituido por células endoteliales microvasculares, neuronas y astrocitos. Aprovechamos la línea de células endoteliales microvasculares humana (hCMEC/D3) que expresan la amino oxidasa humana sensible a semicarbazida, también conocida como proteína de adhesión vascular-1 (hSSAO/VAP-1) como modelo de alteración vascular en la EA. Se describió que la hSSAO/VAP-1 aparecía incrementada en el plasma y el tejido cerebrovascular de los pacientes de EA. Analizando la secreción de angioneurinas endoteliales en estas células observamos que la expresión de la hSSAO/VAP-1 indujo, independientemente de su actividad, una disminución significativa de sus niveles de liberación del factor neurotrófico derivado del cerebro (BDNF). Determinando el impacto de dicha reducción de BDNF en las neuronas encontramos que, co-cultivando con las células endoteliales hSSAO/VAP-1, en un contexto que reproduzca la presencia patológica de Aβ, indujo un descenso en los niveles de las proteínas sinápticas PSD95 y GluA1. Además, determinamos la relevancia de tener los niveles apropiados de la secreción endotelial de BDNF para el mantenimiento de la red neuronal. En resumen, nuestros resultados revelaron por primera vez que el enzima hSSAO/VAP-1 altera la secreción endotelial de BDNF y que esta neurotrofina es un mediador crítico entre las células endoteliales y las neuronas dentro de nuestro sistema in vitro de la NVU. De hecho nuestros resultados sugieren que la hSSAO/VAP-1 induce una sensibilización, debido a la reducción en la secreción endotelial de BDNF, en las neuronas co-cultivadas frente a un estímulo aversivo como es el Aβ. Por una parte, el BDNF es un factor clave implicado en la patología de la EA ya que su disminución ha sido asociada con los principales indicativos de la enfermedad. Por otro lado, la hSSAO/VAP-1 está incrementada en diversas patologías vasculares, también consideradas factores de riesgo para la EA. Por lo tanto, aunque se necesitan más experimentos, sugerimos que el diseño de una potencial estrategia terapéutica basada en el BDNF y/o en disminuir la expresión de la hSSAO/VAP-1 puede resultar de extrema utilidad.