[ca] El tractament actual pel càncer de bufeta (CB) no múscul invasiu consisteix en la resecció del tumor seguida d'instil·lacions intravesicals de la forma viva del Mycobacterium bovis Calmette-Guérin (BCG). Des del 1990, el M. bovis BCG és el tractament d'elecció i el més eficaç per evitar la recurrència i progressió de la malaltia, conduint a una millora de la taxa de supervivència dels pacients amb CB. No obstant, aquest tractament té algunes limitacions. El 30 % dels pacients no responen a la teràpia amb M. bovis BCG i al voltant del 70 % dels malalts pateixen efectes secundaris, fent que el 8 % d'ells hagin d'interrompre la teràpia. D'altra banda, diferents subsoques de M. bovis BCG que varien en el seu contingut lipídic, s'utilitzen sense distinció arreu del món. En la recerca d'una alternativa eficaç i segura, s'ha descrit l'efecte antitumoral de Mycolicibacterium brumae. El M. brumae és un micobacteri ambiental, no patògen i de creixement ràpid amb una activitat antitumoral in vitro i in vivo semblant a la del M. bovis BCG. El M. brumae es capaç d'aturar la proliferació tumoral in vitro, i a més, indueix una resposta immune tant local, a la bufeta, com sistèmica, favorable per l'eliminació del tumor in vivo. Un tema crític són els medis de cultiu utilitzats per al creixement dels micobacteris. A diferència de la majoria de laboratoris de recerca on el M. bovis BCG és crescut en medis Middlebrook, per la producció a escala industrial s'utilitza medi Sauton ja que no conté components d'origen animal. Actualment, es desconeix el mecanisme d'acció del M. bovis BCG i quin són els antígens implicats en l'efecte antitumoral. Per tant, la modificació del medi de cultiu utilitzat pel creixement dels micobacteris podria alterar el seu perfil antigènic i, en conseqüència, la seva resposta antitumoral, com ja s'ha vist amb M. bovis BCG quan s'utilitza com a vacuna contra la tuberculosi. Per tant, l'objectiu d'aquesta tesi va ser avaluar la influència dels medis de cultiu en l'activitat antitumoral del M. bovis BCG o del M. brumae. Primerament, es va optimitzar el creixement del M. brumae crescut en diferents formulacions del medi Sauton que variaven en la font d'aminoàcids i el contingut de glicerol. Després, es va analitzar el perfil antigènic del M. bovis BCG i del M. brumae crescuts en diferents medis de cultiu, i finalment, es va avaluar la seva activitat antitumoral in vitro i in vivo. D'altra banda, es va analitzar la resposta immunitaria sistèmica desencadenada per una vacunació subcutània amb el M. bovis BCG o el M. brumae prèvia al tractament intravesical en ratolins amb tumor. Es va observar que el M. bovis BCG i el M. brumae requereixen una composició específica de medi de cultiu per maximitzar la biomassa obtinguda, tot i que aquesta condició no sempre va implicar una millor activitat antitumoral in vitro i in vivo. D'altra banda, ambdós micobacteris van mostrar un perfil lipídic diferent en funció del medi de cultiu utilitzat pel seu creixement, sent aquestes modificacions en el perfil lipídic de M. bovis BCG corroborades en cinc subsoques més. El M. brumae crescut en el Sauton A60 i el M. bovis BCG crescut en el medi Sauton G15 van desencadenar una resposta antitumoral més eficient. Finalment, la vacunació subcutània prèvia al tractament intravesical va desencadenar una resposta sistèmica més robusta que la produïda pel tractament intravesical únicament. En conclusió, els medis de cultiu utilitzats pel creixement de micobacteris mostren un impacte sobre l'activitat antitumoral de M. bovis BCG i M. brumae. A més, la vacunació pot ser considerada una estratègia de reforç per millorar pel tractament intravesical

[en] The current treatment for non-muscle-invasive BC (NMIBC) patients consists of a tumour resection followed by intravesical instillation of the live form of Mycobacterium bovis BCG. Since 1990, M. bovis BCG is the preferred and most efficacious treatment regarding avoiding BC recurrence and progression that lead to an improvement of the survival rate of BC patients. Nonetheless, M. bovis BCG treatment has some limitations. Around 30 % of patients do not respond to M. bovis BG therapy, and about 70 % suffer side effects. Besides, 8 % of BC patients need to stop the treatment due to the severe impacts. Otherwise, different M. bovis BCG substrains, which vary in their lipidic content, are used indistinctively worldwide. Looking for an efficacious and safe alternative, the antitumoral effect of the Mycolicibacterium brumae has been described. M. brumae is an environmental, non-pathogenic and fast-growing mycobacterium that showed similar antitumour activity than M. bovis BCG in vitro and in vivo. M. brumae inhibit tumour proliferation in vitro and induce a local immune response into the bladder and systemic immune response, favourable for tumour elimination in vivo. One crucial issue is the culture media used for mycobacteria growth. Contrary to most research laboratories that use Middlebrook media to grow M. bovis BCG, M. bovis BCG is massively produced using Sauton medium due to not containing animal-derived components. Nowadays, the mechanism of action of M. bovis BCG and the antigens involved in its antitumoral effect are still unknown. Therefore, the culture media composition used to grow mycobacteria can modify its antigenic profile and, in turn, its antitumour effect, as shown when M. bovis BCG is used as a vaccine against tuberculosis. Thus, this thesis aims to evaluate the influence of culture media compositions and the antitumoral response triggered by M. bovis BCG or M. brumae. Initially, culture media composition was optimised for M. brumae growth using different culture media that differ on the amino acid source and glycerol concentrations. Then, the antigenic profile of M. bovis BCG and M. brumae grown in different culture media and their antitumoral effect in vitro and in vivo were analysed. Otherwise, a systemic immune response triggered by subcutaneous vaccination with M. bovis BCG or M. brumae before intravesical treatments was also evaluated in tumour-bearing mice. M. bovis BCG and M. brumae require a specific composition to maximise their biomass production, although those compositions did not imply an increased antitumoral response in vitro and in vivo. Both mycobacteria species showed a different lipidic pattern depending on the culture media used for their growth, being the lipidic profile of M. bovis BCG corroborated in five M. bovis BCG substrains. M. brumae grown in Sauton A60 and M. bovis BCG grown in Sauton G15 triggered a better antitumoral response than the rest of the conditions. Finally, subcutaneous vaccination followed by intravesical treatment triggered a more robust systemic immune response than the immune response triggered by the intravesical treatments alone. In conclusion, culture medium composition impacts the antitumoral effect of M. bovis BCG and M. brumae. Moreover, vaccination with M. brumae or M. bovis BCG followed by intravesical treatment can be considered a boosting strategy to improve the outcomes of the intravesical treatment.