[ca] Els tumors mamaris canins (CMT) són càncers naturals que són freqüents en gosses intactes i rars en gossos mascles. La incidència anual reportada és d'aproximadament 198 casos de cada 100.000 gosses, amb aquesta incidència a ser més alta a les regions del món on rarament es practica la esterilització precoç. La causa exacta dels CMT encara es desconeix, tot i que s'han atribuït multitud de factors de risc. La fita del pronòstic en les CMT és un diagnòstic precoç, amb un diagnòstic tardà generalment associat amb baixes taxes de supervivència després del tractament quirúrgic. Malauradament, els CMT poden estar associats a signes clínics inespecífics, cosa que dificulta la detecció precoç per part del propietari o durant els exàmens físics rutinaris. Igual que en l'oncologia humana, els avenços recents realitzats en el diagnòstic de CMT inclouen el descobriment de biomarcadors tant en teixits de la glàndula mamària mitjançant tècniques d'immunohistoquímica com en sang/plasma/sèrum mitjançant altres mètodes moleculars. Fins ara, en oncologia veterinària, només s'han descobert uns quants biomarcadors i s'han normalitzat per al seu ús. Per tant, vam plantejar la hipòtesi que els biomarcadors en el sèrum i el teixit mamari es poden utilitzar en el diagnòstic de CMT. Els objectius del present estudi eren dobles. En primer lloc, es va avaluar el sèrum de gossos femelles en la determinació de biomarcadors adequats per a CMT. Amb aquesta finalitat, es va prendre mostres de sang de 30 gossos femelles i posteriorment es va centrifugar. El sèrum recollit es va analitzar mitjançant microarrays d'anticossos CD dirigits a 90 marcadors de superfície CD i 56 citocines/quimiocines. Es van seleccionar un total de cinc proteïnes CD, a saber, CD20, CD45RA, CD53, CD59 i CD99, a causa de la seva abundància diferencial de proteïnes en relació amb els valors de log FC o els valors p. Aquests es van analitzar més mitjançant tècniques d'immunoblot per validar els resultats de microarrays.CD45RA va mostrar una abundància significativament menor (P <0, 05) en el sèrum obtingut dels individus que presentaven neoplàsia mamària en comparació amb el grup control. En canvi, el CD99 va resultar significativament més abundant en gossos neoplàsics que en pacients sans. Finalment, el CD20 va mostrar una abundància significativament més alta en individus portadors d'un tumor mamari maligne en comparació amb pacients sans, tot i que no es va observar cap expressió diferencial entre tumors malignes i benignes. Es va concloure que tant el CD99 com el CD45RA són indicadors de la presència de tumor mamari, encara que sense diferenciar entre neoplàsia mamària canina maligna i benigna. En segon lloc, el present estudi va tenir com a objectiu avaluar l'expressió gènica de l'ARNm al teixit mamari tant de gosses CMT sanes com diagnosticades mitjançant PCR quantitativa (RT-qPCR). Els gens diana escollits per a aquest estudi van incloure el factor de creixement endotelial vascular A (VEGFa), CD20, receptor de progesterona (PGR), hialuronidasa 1 (HYAL1), lligand de mort programada 1 (PDL1), factor de creixement epidèrmic (EGF), relaxina 2 (RLN2). ), i la metalopeptidasa matricial 3 (MMP3). Amb aquesta finalitat es van analitzar cinquanta-vuit mostres de teixit mamari de gosses, tant sanes (n=3) com que presentaven tumors mamaris (n-58). Els nivells de transcripció dels gens HYAL1, VEGFa, CD20 i PGR van mostrar expressions similars més altes en tumors mamaris benignes i malignes en comparació amb individus sans, mentre que els gens MMP3, EGF, PDL-1 i RLN2 es van trobar a nivells d'expressió més alts en tumors malignes que en els tumors benignes i el grup control. Per tant, es va concloure que els gens HYAL1, VEGF[Alfa], CD20 i PGR són marcadors de la tumorigènesi, mentre que els gens MMP3, EGF, PDL-1 i RLN2 són marcadors de malignitat. Les expressions gèniques de CD20, PGR, EGF, RLN2 i MMP3 estan significativament correlacionades, cosa que suggereix que la combinació d'aquestes molècules pot tenir potencial com a biomarcadors de malignitat en CMT. En conclusió, aquest estudi va demostrar la implicació de proteïnes CD sèriques específiques així com de gens específics expressats al teixit mamari en la detecció d'anomalies tumorals.

[en] Canine mammary tumours (CMTs) are naturally occurring cancer that it is frequent in intact female dogs, and rare in male dogs. The annual reported incidence is approximately 198 cases of every 100,000 female dogs, with this incidence tending to be higher in regions of the world where early spaying is seldom practised. The exact cause of CMTs is still unknown, even though myriads of risk factors have been attributed. The milestone for prognosis in CMTs is an early diagnosis, with late diagnosis being usually associated with low survival rates after the surgical treatment. Unfortunately, CMTs may be associated with non-specific clinical signs, which makes early detection by the owner, or during routine physical examinations difficult. Like in human oncology, recent advances made in the diagnosis of CMTs include the discovery of biomarkers in both mammary gland tissues by immunohistochemistry techniques and blood/plasma/serum by other molecular methods. So far in veterinary oncology, only a few biomarkers have been discovered and standardized for use. Therefore, we hypothesized that biomarkers in the serum and mammary tissue can be used in the diagnosis of CMTs. The objectives of the present study were two-fold. Firstly, the serum of female dogs was assessed in the determination of suitable biomarkers for CMTs. To this end, blood was sampled from 30 female dogs and subsequently centrifuged. The collected serum was analysed through CD antibody microarrays targeting 90 CD surface markers and 56 cytokines/chemokines. A total of five CD proteins, namely CD20, CD45RA, CD53, CD59, and CD99, were selected due to their differential protein abundance in relation to either log FC values or p-values. These were further analysed utilizing immunoblotting techniques to validate the microarray results. CD45RA showed a significantly lower (P<0.05) abundance in the serum obtained from the individuals presenting mammary neoplasia in comparison to the control group. In contrast, CD99 resulted significantly more abundant in neoplastic female dogs than in healthy patients. Finally, CD20 showed a significantly higher abundance in individuals carrying a malignant mammary tumour in comparison to healthy patients, although no differential expression between malignant and benign tumours was observed. It was concluded that both CD99 and CD45RA are indicators of mammary tumour presence, although without differentiating between malignant and benign canine mammary neoplasia. Secondly, the present study aimed to assess the gene expression mRNA in mammary tissue of both healthy and diagnosed CMT female dogs through quantitative PCR (RT-qPCR). The target genes chosen for this study included vascular endothelial growth factor A (VEGFa), CD20, progesterone receptor (PGR), hyaluronidase 1 (HYAL1), programmed death ligand 1 (PDL1), epidermal growth factor (EGF), relaxin 2 (RLN2), and matrix metallopeptidase 3 (MMP3). Fifty-eight mammary tissue samples from female dogs, both healthy (n=3) and presenting mammary tumours (n-58), were analysed for this purpose. Transcription levels of HYAL1, VEGFa, CD20 and PGR genes showed similar higher expressions in both benign and malignant mammary tumours in comparison to healthy individuals, whereas MMP3, EGF, PDL-1, and RLN2 genes were found at higher expression levels in malignant tumours than in the benign tumours and the control group. Therefore, it was concluded that HYAL1, VEGF[Alfa], CD20 and PGR genes are markers for tumourigenesis, whereas MMP3, EGF, PDL-1, and RLN2 genes are markers for malignancy. Gene expressions for CD20, PGR, EGF, RLN2 and MMP3 are significantly correlated, suggesting that the combination of these molecules may have potential as malignancy biomarkers in CMTs. In conclusion, this study demonstrated the involvement of specific serum CD proteins as well as specific genes expressed in mammary tissue in the detection of tumoural anomalies.