[es] Introducción y objetivos: Macrófagos presentes en el revestimiento sinovial de las articulaciones están involucrados en la inflamación del tejido, participando así en la progresión de la artrosis (OA). En concreto, tiene lugar un incremento en el porcentaje de macrófagos tipo M1 (pro-inflamatorios) sobre los de tipo M2 (anti-inflamatorios). El sulfuro de hidrógeno (H2S), una pequeña molécula gaseosa que se sintetiza entre otros tejidos en la articulación, está implicado en la polarización de macrófagos manteniendo el equilibrio homeostático M1/M2. Sin embargo, estudios recientes señalan una reducción en la síntesis enzimática del H2S en los pacientes artrósicos, y específicamente en su fenotipo metabólico. De esta forma, en este trabajo evaluamos si un estrés por altos niveles de glucosa podría favorecer la polarización de macrófagos hacía el tipo M1, y si la administración de una fuente exógena de H2S atenuaría estos efectos. Metodología: Se realizó un modelo in vitro de OA asociada a diabetes (DB) en macrófagos, empleando la línea celular de monocitos TPH-1. En primer lugar, las células se diferenciaron a macrófagos maduros con éster de alcohol forbol (PMA). Las células fueron luego estimuladas con lipopolisacárido (LPS) bajo condiciones normales (GN; 1g/l) o altas de glucosa (GA; 4,5 g/l) en presencia o ausencia de una fuente exógena de H2S (Gyy-4137, un liberador lento del gas). La polarización de los macrófagos se monitorizó mediante estudios de expresión génica y proteica evaluando marcadores de superficie utilizando citometría de flujo. Además, se determinó la proliferación celular y la liberación del mediador pro- inflamatorio interleucina 6 (IL-6). Finalmente, se evaluó la expresión de la enzima sintetizadora de sulfuro cistationina γ-liasa (CSE) en muestras de tejido sinovial de pacientes artrósicos con o sin diagnóstico de DB tipo II (OA vs OA-DB). Resultados: La incubación en altos niveles de glucosa de macrófagos activados con LPS incrementó la expresión de mediadores asociados al fenotipo M1, tanto a nivel génico como proteico. Estos resultados fueron confirmados mediante la detección de una mayor liberación de IL-6 y capacidad proliferativa en estas células. Además, también detectamos que la activación de los macrófagos estaba asociada a una menor expresión génica de la maquinaría de síntesis de H2S. A destacar, el co-tratamiento de las células con Gyy-4137 atenuó los efectos del estrés por altos niveles de glucosa, posiblemente al activar la respuesta anti-oxidante mediada por la vía de señalización Nrf-2/HO-1. En relación, los pacientes OA-DB mostraban menores niveles de expresión de CSE en el tejido sinovial que los pacientes OA no DB. Conclusiones: Nuestro estudio parece reforzar el papel clave del H2S en la OA y concretamente en su fenotipo metabólico, así como señalar sus efectos en la polaridad de macrófagos sinoviales, abriendo nuevas perspectivas terapéuticas en el manejo de esta patología.

[gl] Introducción y objetivos: Macrófagos presentes no revestimento sinovial das articulacións están involucrados na inflamación do tecido, participando así na progresión da artrose (OA). En concreto, ten lugar un incremento na porcentaxe de macrófagos tipo M1 (pro-inflamatorios) sobre os de tipo M2 (anti- inflamatorios). O sulfuro de hidróxeno (H2S), unha pequena molécula gasosa que se sintetiza entre outros tecidos na articulación, está implicado na polarización de macrófagos mantendo o equilibrio homeostático M1/M2. Porén, estudos recentes sinalan unha redución na síntese encimática do H2S nos pacientes artrósicos, e especificamente no seu fenotipo metabólico. Deste xeito, neste traballo avaliamos se un estrés por altos niveis de glucosa podería favorecer a polarización de macrófagos facía o tipo M1, e se a administración dunha fonte exóxena de H2S podería atenuar estes efectos. Metodoloxía: Realizouse un modelo in vitro de OA asociada a diabete (DB) en macrófagos, empregando a liña celular de monocitos TPH-1. En primeiro lugar, as células diferenciaronse a macrófagos maduros con ester de alcohol forbol (PMA). As células foron logo estimuladas con lipopolisacárido (LPS) baixo condicións normais (GN; 1g/l) ou altas de glucosa (GA; 4,5 g/l) na presenza ou ausencia dunha fonte exóxena de H2S (Gyy-4137, un liberador lento do gas). A polarización dos macrófagos monitorizouse mediante estudos de expresión xénica e proteica avaliando marcadores de superficie utilizando citometría de fluxo. Ademais, determinouse a proliferación celular e a liberación do mediador pro-inflamatorio interleucina 6 (IL-6). Finalmente, avaliouse a expresión da encima sintetizadora de sulfuro cistationina γ-liasa (CSE) en mostras de tecido sinovial de pacientes artrósicos con ou sen diagnóstico de DB tipo II (OA vs OA-DB). Resultados: A incubación en altos niveis de glucosa de macrófagos activados con LPS incrementou a expresión de mediadores asociados ao fenotipo M1, tanto a nivel xénico como proteico. Estes resultados foron confirmados mediante a detección dunha maior liberación de IL-6 e capacidade proliferativa nestas células. Ademais, tamén detectamos que a activación dos macrófagos estaba asociada a unha menor expresión xénica da maquinaría de síntese de H2S. A destacar, o co-tratamento das células con Gyy-4137 atenuou os efectos do estrés por altos niveis de glucosa, posiblemente ao activar a resposta anti-oxidante mediada pola vía de sinalización Nrf-2/HO-1. En relación, os pacientes OA-DB mostraban menores niveis de expresión de CSE no tecido senónvial que os pacientes OA non DB. Conclusións: O noso estudo parece reforzar o papel clave do H2S na OA e concretamente no seu fenotipo metabólico, así como sinalar os seus efectos na polaridade de macrófagos senónviais, abrindo novas perspectivas terapéuticas no manexo desta patoloxía.