[en] In this thesis we have studied the role of the autophagy-lysosomal system during the development of Lewy body diseases, especially of dementia with Lewy bodies (DLB). Although this dementia represents the second most important cause of dementia after Alzheimer's disease (AD), its clinical diagnosis is very complex and up to 80% of all cases continue to be misdiagnosed. The cause for this diagnostic difficulty is the important neuropathological overlap between DLB and AD, since DLB shares characteristic changes with AD, on one hand, and as a synucleinopathy, with Parkinson's disease (PD), on the other. Most of DLB patients are diagnosed as AD and, consequently, receive the corresponding treatments which may cause severe adverse reactions. Therefore, the molecular characterization of DLB identifying disease specific mechanisms is of primary importance, because only unveiling these mechanisms will permit the development of the necessary therapies. To date, limited data are available on the role of the autophagy-lysosomal system in the pathogenesis of DLB. In this context, the most studied gene is GBA, mutations in which have been recently described as risk factors for DLB and PD. Therefore, in the first study we analyzed the expression of three GBA transcripts in the brains and blood of patients with DLB and PD. We found a decrease in GBA levels in the brain, in DLB cortices and in the caudate nucleus of PD with dementia. Decreased GBA expression was also detected in blood. The correlation between clinical parameters and GBA expression levels revealed that the lowest GBA levels corresponded to the most aggressive forms of DLB and EP. To identify the possible causes of GBA diminution in brain, we analyzed the expression of different transcripts of two of its regulatory genes, LIMP2 and TFEB, in the same brain areas as for GBA. As the main finding, we identified a marked overexpression of TFEB, especially in the temporal cortex with pure Lewy pathology. This TFEB increase was accompanied by a significant overexpression of one of the SCARB2 transcripts in the same brain area. In the temporal cortex we also found a correlation between the expression levels of TFEB and GBA as well as SCRAB2tv2 and GBA, the highest levels of TFEB or SCARB2 corresponding to the most pronounced decrease in GBA. As the lysosomal system is closely related to the autophagy system, we analyzed the expression of six genes involved in specific points of autophagy. Although BECN1, ATG3, and ATG5 showed a slight differential expression between groups, the most important finding from this third study was that transcriptional changes in autophagy genes are not primarily involved in the development of Lewy body diseases. In conclusion, the studies composing this thesis revealed that the lysosomal system plays an important role in the pathogenesis of DLB, but the autophagy system does not show major changes undergoing only case-specific changes. Especially the temporal cortex, an area of early involvement in the disease, is characterized by a decrease in GBA accompanied by an increase in its receptor SCARB2 and the transcriptional regulator TFEB. Thus, decreased GBA can activate the expression of TFEB as a cellular response to restore lysosomal proteostasis, but the activation of TFEB would at the same time result in the overexpression of other lysosomal genes, including SCARB2.

[es] En esta tesis hemos estudiado el papel del sistema autofágico-lisosomal durante el desarrollo de las enfermedades con cuerpos de Lewy, especialmente la demencia con cuerpos de Lewy (DCL). Aunque esta demencia representa, después de la enfermedad de Alzheimer (EA), la segunda causa más importante de la demencia, su diagnóstico clínico es muy complejo y hasta el 80% de todos los casos siguen siendo diagnosticados erróneamente. La causa para esta dificultad diagnóstica se encuentra a nivel neuropatológico, ya que la DCL comparte cambios característicos con la EA, por una parte, y al ser una sinucleinopatía, con la enfermedad de Parkinson (EP), por otra. La mayoría de los pacientes con DCL se diagnostican como EA y, consecuentemente, reciben los tratamientos correspondientes, los cuales causan reacciones adversas severas en un 50% de ellos. Por eso, la caracterización molecular de la DCL identificando mecanismos específicos para ésta es de primordial importancia, porque solamente conociendo dichos mecanismos será posible desarrollar las terapias necesarias. Hasta el momento se dispone de datos limitados sobre el papel del sistema autofágico-lisosomal en la patogénesis de la DCL. En este contexto, el gen más estudiado es GBA, mutaciones en el cual se habían descrito recientemente como factores de riesgo para DCL y EP. Por eso, en el primer estudio analizamos la expresión de tres transcritos de GBA en cerebros y sangre de pacientes con DCL y EP. Encontramos la disminución de los niveles de GBA en cerebro, en el córtex de DCL y en el núcleo caudado de EP con demencia. También en sangre se detectó la expresión de GBA disminuida. La correlación entre parámetros clínicos y los niveles de expresión de GBA reveló que los niveles más bajos de GBA se correspondían a las formas más agresivas de DLB y EP. Para identificar las posibles causas de la disminución de GBA, analizamos la expresión de diferentes transcritos de dos de sus genes reguladores, LIMP2 y TFEB, en cerebro. Como hallazgo principal, identificamos una marcada sobreexpresión de TFEB, especialmente en la corteza temporal con patología Lewy pura. Este incremento de TFEB estaba acompañado de una sobreexpresión importante de uno de los transcritos de SCARB2 en la misma área cerebral. En la corteza temporal encontramos también una correlación entre los niveles de expresión de TFEB y GBA así como SCRAB2tv2 y GBA, correspondiendo los niveles más elevados de TFEB o SCARB2 con la disminución más pronunciada de GBA. Como el sistema lisosomal está estrechamente relacionado con el sistema autofágico, analizamos la expresión de seis genes implicados en puntos específicos de la autofagia. Aunque BECN1, ATG3 y ATG5 se expresaban de forma diferencial, el hallazgo más importante de este tercer estudio fue que cambios transcripcionales en los genes autofágicos no están primariamente involucrados en el desarrollo de enfermedades con cuerpos de Lewy. En conclusión, los estudios que componen esta tesis revelaron que el sistema lisosomal juega un papel importante en la patogénesis de la DCL. En cambio, sistema autofágico no sufre cambios importantes sino solo cambios específicos para cada caso. Especialmente la corteza temporal, área de afectación temprana en la enfermedad, se caracteriza por la disminución de GBA acompañada del incremento de su receptor SCARB2 y el regulador transcricional TFEB. Así, GBA disminuida puede activar la expresión de TFEB como respuesta celular para restaurar la proteostasis lisosomal, pero la activación de TFEB resultaría al mismo tiempo en la sobreexpresión de otros genes lisosomales, incluyendo SCARB2.