[en] Leigh syndrome (LS) is a mitochondrial disease with an estimated prevalence of 1/40.000 live births and is typically accompanied by a progressive neurodegenerative disorder. As is commonly seen in other central nervous system (CNS) neurodegenerative diseases, patients with LS present abundant neuroinflammatory hallmarks accompanying neurodegeneration. Mice lacking systemically the subunit NDUFS4 of the complex I of the electron respiratory chain, known as Ndufs4 knockout (KO) mice, develop fatal progressive encephalopathy resembling LS and die approximately at the postnatal day 55. As the disease progresses, neurodegeneration increases being the main responsible for the neurological symptoms. As in LS, prominent neuroinflammation is observed in affected brain areas. Surprisingly, despite the magnitude of this neuroinflammation, the roles of either the neuroimmune pathways or their main cellular components have barely been addressed in Ndufs4 KO mice. We hypothesized that neuroinflammation is by itself a harmful process in this mouse model of LS and not just a consequence of neurodegeneration. Firstly, we studied the contributions of microglia, the specialized immune cell of the CNS, to the Ndufs4 KO mouse pathology. We used a pharmacological approach consisting of the chronic administration of a colony stimulation factor 1 receptor (CSFR1) antagonist, PLX3397, which has the capability of depleting mouse microglia from the CNS parenchyma. We found that microglia contribute to the progression of the pathology since their partial depletion extended survival, delayed the onset of the disease, and alleviated brain pathology. Secondly, we tried to find putative mediators responsible for the microglial detrimental actions in Ndufs4 KO mice. To do so, we studied the role of an important neuroinflammatory mediator, the cytokine interleukin-6 (IL-6), which is known to have strong detrimental effects during chronic neuroinflammation. In this case, we generated a Double KO mouse line with a combined complete deficiency of IL-6 and NDUFS4 and appropriate controls. In short, knocking out Il6 had minor effects on the development of the Ndufs4 KO mice pathology. Finally, once we proved that decreasing the neuroimmune response by depleting microglial cells had beneficial effects in Ndufs4 KO mice, we wanted to assess the opposite paradigm and test whether a chronic induction of a neuroinflammatory state in the CNS of Ndufs4 KO mice would be detrimental or not. For that purpose, we took advantage of the GFAP-IL6 mouse, which overexpresses IL-6 only in astrocytes and produces chronic microglia and astrocyte reactivity, by generating a mouse line with CNS IL-6 overexpression and whole-body NDUFS4 deficiency. IL-6 overexpression in the CNS aggravated the phenotype of female mice to some extent but did not affect the phenotype of male mice. Interestingly, an abnormal neuroinflammatory response to IL-6 overexpression was observed in Ndufs4 KO mice compared to controls, which may have potential implications for understanding LS. Taken together, our results demonstrate that neuroinflammation, especially the microglial response, is a pathogenic driving mechanism of the Ndufs4 KO mice encephalopathy that should be considered as a target for future therapies in patients with LS.

[es] El síndrome de Leigh (SL) es una enfermedad mitocondrial con una prevalencia estimada de un caso por cada 40.000 nacimientos. Típicamente, el SL se acompaña de un proceso neurodegenerativo agudo y progresivo. Tal y como se observa en otras enfermedades neurodegenerativas del sistema nervioso central (SNC), pacientes con SL presentan abundantes sellos distintivos de un proceso neuroinflamatorio acompañando a la neurodegeneración. Los ratones que carecen de forma sistémica de la subunidad NDUFS4 del complejo I de la cadena transportadora de electrones, conocidos como ratones Ndufs4 knockout (KO), desarrollan una encefalopatía de características similares a la que se observa en pacientes con SL y que acaba provocando su muerte cuando apenas tienen 55 días de vida. A medida que progresa la enfermedad, la neurodegeneración aumenta, siendo ésta la principal responsable de los síntomas neurológicos. Como en pacientes con SL, se observa una prominente neuroinflamación en las regiones cerebrales afectadas. Sorprendentemente, a pesar de la magnitud de la neuroinflamación asociada a las lesiones cerebrales, el papel que juegan las vías neuroinmunitarias junto con sus componentes celulares más importantes no se ha estudiado de manera detallada en los ratones Ndufs4 KO. Hipotetizamos que la neuroinflamación es un proceso perjudicial per se en el modelo murino de SL, y no únicamente un mero subproducto de la neurodegeneración. En primer lugar, estudiamos las contribuciones de la microglía, la célula especializada del sistema inmune en el SNC, en el desarrollo de la patología del ratón Ndufs4 KO. Usamos una aproximación farmacológica que consistió en la administración de un antagonista del receptor 1 del factor estimulador de colonias (CSF1R), conocido como PLX3397, que nos permitó eliminar la microglía del parénquima del SNC. Nuestros resultados indican que la microglía contribuye a la progresión de la enfermedad, dado que su depleción parcial extendió la supervivencia, retrasó la aparición de la enfermedad y mejoró la patología cerebral. En segundo lugar, intentamos hallar posibles mediadores responsables de las acciones perjudiciales de la microglía. Para ello, estudiamos el papel de un mediador neuroinflamarorio muy importante, la interleuquina-6 (IL-6), conocida por jugar papeles perjudiciales en el contexto de una neuroinflamación crónica. En este caso, generamos una línea murina Doble KO que presentaba una deficiencia completa de IL-6 y NDUFS4 junto con sus respectivos controles. Brevemente, eliminar la producción de IL-6 tuvo un impacto menor en el desarrollo de la patología de los ratones Ndufs4 KO. Finalmente, una vez demostrado que disminuir la respuesta neuroinmunitaria a través de la depleción de las células microgliales tiene efectos beneficiosos en los ratones Ndufs4 KO, quisimos examinar el paradigma opuesto y estudiar si la inducción de un estado neuroinflamatorio crónico en el SNC de los ratones Ndufs4 KO sería perjudicial o no. Con este objetivo en mente, nos beneficiamos del modelo de ratón GFAP-IL6, que sobreexpresa la IL-6 exclusivamente en astrocitos produciendo una reactividad microglial y astrocítica crónica. Generamos una línea murina doble transgénica con sobreexpresión de IL-6 en el SNC y deficiencia completa de NDUFS4 junto con sus controles. Observamos que la sobreexpresión de esta interleuquina agravaba significativamente el fenotipo de las hembras Ndufs4 KO pero no así el de los machos. Es importante mencionar que los ratones Ndufs4 KO con sobreexpresión de IL-6 mostraron una respuesta neuroinflamatoria anómala en comparación con los ratones control, lo que podría tener implicaciones en la comprensión del SL. En conjunto, nuestros resultados demuestran que la neuroinflamación, especialmente la respuesta microglial, es un mecanismo patogénico que contribuye al desarrollo de la encefalopatía de los ratones Ndufs4 KO, y que, por tanto, debe ser considerado como diana para futuras terapias en pacientes con SL.