[es] La artrosis es una enfermedad heterogénea que afecta a las articulaciones móviles y se caracteriza por estrés celular y degradación de la matriz extracelular (MEC) y del hueso subcondral. Afecta a más de 250 millones de individuos mundialmente y es la principal causa de dolor crónico y limitaciones de movilidad, sobre todo, en personas mayores. Sin embargo, a pesar de todos los avances en investigación, hasta la fecha no existe ningún tratamiento efectivo capaz de curar la artrosis, debido a la falta de conocimiento de la patogénesis de la enfermedad. Existen diferentes tratamientos paliativos e incluso técnicas de terapia celular, pero todavía son incapaces de restaurar el cartílago dañado y devolver la función normal a la articulación. Por tanto, los retos en investigación se centran en estudiar la fisiopatología de la artrosis para encontrar, en última instancia, un tratamiento definitivo. El objetivo de este estudio consistió en optimizar las condiciones de cultivo de una línea inmortalizada de condrocitos artrósicos que se pudiese utilizar como modelo in vitro para estudiar la fisiopatología de la artrosis. Los condrocitos fueron previamente inmortalizados en el laboratorio mediante la transducción del antígeno T grande del virus simio 40 (SV40) y la transcriptasa reversa de la telomerasa humana (hTERT). Estas células se cultivaron y expandieron en monocapa para después cultivarlas en tres dimensiones (3D) formando micromasas en diversos medios de cultivo. Se realizó un análisis histológico, un análisis de la concentración de glucosaminoglicanos (GAGs) y la medición de la expresión de los marcadores de condrocitos primarios [región determinante del sexo del cromosoma Y – caja 9 (SOX9), colágeno tipo II (COL II) y agrecano (ACAN)] mediante la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa (qPCR). Estos resultados confirmaron que no se detectó expresión de COL II y ACAN en las micromasas formadas en los medios de diferenciación condrogénica, mientras que sí se detectó expresión de SOX9, un marcador temprano de condrogénesis, en todas las muestras. La conclusión principal de este trabajo es que no se han conseguido determinar correctamente las condiciones de cultivo idóneas de la línea inmortalizada de condrocitos artrósicos que puedan favorecer la expresión de los marcadores típicos de condrocitos primarios, ya que solo se detectó expresión de un marcador de condrocitos.

[gl] A artrose é unha enfermidade heteroxénea que afecta ás articulacións móbiles e caracterízase por estrés celular e degradación da matriz extracelular (MEC) e do óso subcondral. Afecta a máis de 250 millóns de individuos en todo o mundo e é a principal causa de dor crónica e limitacións de mobilidade, especialmente en persoas maiores. Non obstante, a pesar de todos os avances na investigación, ata a data non existe un tratamento eficaz capaz de curar a artrose, debido ao descoñecemento da patoxénese da enfermidade. Existen diferentes tratamentos paliativos e incluso técnicas de terapia celular, pero aínda así son incapaces de restaurar a cartilaxe danada e devolver a función normal á articulación. Polo tanto, os retos da investigación céntranse en estudar a fisiopatoloxía da artrose para atopar, en definitiva, un tratamento definitivo. O obxectivo deste estudo foi optimizar as condicións de cultivo dunha liña inmortalizada de condrócitos artrósicos que se poderían empregar como modelo in vitro para estudar a fisiopatoloxía da artrose. Os condrócitos foron inmortalizados previamente no laboratorio polo antíxeno T grande 40 do virus simiano (SV40) e a transcriptase inversa da telomerasa humana (hTERT). Estas células cultiváronse e expandíronse nunha monocapa e despois cultiváronse en tres dimensións (3D) formando micromasa en varios medios. Realizouse unha análise histolóxica, unha análise da concentración de glicosaminoglicanos (GAGs) e a medición da expresión dos marcadores condrocitarios primarios [rexión determinante do sexo do cromosoma Y - caixa 9 (SOX9), coláxeno tipo II (COL II) e aggrecano (ACAN)] por reacción en cadea cuantitativa a tempo real da polimerasa (qPCR). Estes resultados confirmaron que non se detectou ningunha expresión de COL II e ACAN nas micromasas formadas nos medios de diferenciación condroxénicos, mentres que se detectou a expresión de SOX9 , un marcador inicial da condroxénese, en todas as mostras. A principal conclusión deste traballo é que non foi posible determinar correctamente as condicións de cultivo ideais da liña inmortalizada de condrócitos artrósicos que poden favorecer a expresión dos marcadores típicos dos condrócitos primarios, xa que só se detectou unha expresión de marcador.