[en] In this project has developed important aspects of bioengineering, which is an essential part of recognized research group, design and testing of a microfluidic chip to interact (detect and / or communicate) with microorganisms using waves of microwaves, and then with human cells. In this way this study describes how to grow E. coli bacteria in an optimal way, as well as the protocol that must be followed to fluorescence labelling to bacteria E. coli with SYBR green I, and thus observe them under the microscope, afterwards the operation of microscope (the different modes) and the cube filters have been studied. This part is studied, since the multidisciplinary research project, the membrane potential probes will be carried out and the functional activity of each cell will be evaluated (in this study there has not been time). So, then this project explains the membrane potential and the different non-invasive action potential indicators based in optical response of molecular markers. Moreover, the difference of focussing between the beads and cells is sought and the SNR is compared between the beads of 10 µm (diameter) and the beads of 1 µm (diameter), that have the same size as cells and bacteria, respectively. As a summary of the conclusions of this study, it is observed that the optimal way to cultivate E. coli bacteria is at a temperature of 37 °C, 125 rev /min and the use of Lysogeny broth in a professional incubator. Regarding the fluorescence labeling of bacteria and its observation in the microscope, the selected mode is epifluorescence, and the use of SYBR green I, as a fluorochrome, makes the Blue Excitation cube filter the best option. On the other hand, it is concluded that the cells focusing on a viscoelastic fluid with less PEO concentration (less viscosity) than the beads of 1, therefore, the beads need a higher flow rate if it wants that both have the same focus length. Moreover, the SNR of the 10 µm beads has a high value without using a low pass filter (of electrical signal), instead the 1 µm beads have an SNR which depends on the use of a low pass filter or not, where the best SNR value is found using a low pass filter of 10 kHz as cutoff frequency. Finally, to say that part of this work has been served to generate a conference paper, which title is: Microwave-Microfluidic Measurement System Optimization for Bio-Particle-Sensing with Coplamar Electrodes [1].

[es] En este proyecto se han desarrollado aspectos relevantes de bioingeniería los cuales forman parte esencial de una investigación llevada a cabo por un grupo de recerca reconocido, el cual tiene como objetivo el diseño y testeo de un chip microfluídico para interactuar (detectar i/o comunicarse) con microorganismos utilizando ondas de microondas, y posterior con células humanas. De este modo, este estudio describe como cultivar las bacterias E. coli de manera óptima, como también el protocolo que se debe seguir para hacer un marcaje de fluorescencia a las bacterias con SYBR green I, y así observar-las en el microscopio, después de haber estudiado el funcionamiento del microscopio (los diferentes modos) y los filtros cube. Esta parte se estudia, ya que más adelante en el proyecto de investigación multidisciplinario se realizará un protocolo de marcaje de fluorescencia con indicadores de potencial de membrana y se evaluará la actividad funcional (en este estudio no ha dado tiempo). Así entonces este proyecto se explica el potencial de membrana y los diferentes indicadores de potencial de acción no invasivos basados en marcadores moleculares de respuesta óptica. A más, se busca las diferencias de enfoque que hay entre las beads fluorescentes y células y se compara la SNR (relación señal/ ruido) de las beads de 10 µm (diámetro) y de las beads de 1 µm (diámetro), estas últimas siendo del mismo tamaño que las células y bacterias. Como resumen de las conclusiones de este estudio, se observa que la manera óptima de cultivar bacterias E. coli es a temperatura de 37 °C, 125 rev/min i la utilización de líquido LB en una incubadora profesional. Sobre el marcaje de fluorescencia de las bacterias y su observación en el microscopio, el modo seleccionado es el de la fluorescencia, y la utilización de SYBR green I, como a fluorocromo, hace que la mejor opción sea el filtro cube de Blue Excitation. Por otra parte, se concluye que las células se enfocan en un fluido viscoelástico con menos concentración de PEO (menos viscosidad) que las beads de 1 µm. Por lo tanto, las beads necesitan un cabal más elevado si se quiere que las dos tengan la misma longitud de enfoque. A más, la SNR de las beads de 10 µm tienen un valor elevado sin utilización de filtro de señal eléctrico pasa bajo, en cambio las beads de 1 µm tienen una SNR que depende de la utilización de filtro pasa baja o no, donde el mejor valor de SNR se encuentra utilizando un filtro pasa baja de 10 kHz de frecuencia de corte. Finalmente, decir que una parte de este trabajo se ha utilizado para generar un paper de conferencia, el cual su título es: "Microwave-Microfluidic Measurement System Optimization for Bio-Particle-Sensing with Coplamar Electrodes" [1].