[ca] Encara que un alt percentatge de limfomes difusos de cèl·lules B grans (LDCBG) poden curar-se amb una combinació de rituximab, ciclofosfamida, adriamicina, vincristina i prednisona, gairebé un terç dels pacients, que corresponen principalment al subtipus de cèl·lules B activades (CBA), no aconsegueix una remissió completa o recau poc després de finalitzar el tractament. Es creu que aquests tumors depenen gairebé exclusivament de la senyalització del factor de transcripció nuclear constitutiu [Kappa]B (NF-[Kappa]B) per a la seva supervivència, un fenomen que s'ha relacionat amb una varietat d'alteracions genètiques que activen de manera aberrant la via de senyalització del receptor de cèl·lules B (BCR) i el de tipus Toll (TLR). En aquesta tesi doctoral hem avaluat la seguretat i eficàcia de diferents estratègies destinades a abordar la sobreactivació patològica de NF-[Kappa]B al limfoma difús de cèl·lules B grans, amb especial atenció al subtipus CBA, el qual és difícil de tractar. Aquests enfocaments consisteixen, d'una banda, en el bloqueig de la senyalització de TLR mitjançant la inhibició directa d'IRAK1/4 en associació amb el bloqueig de l'activitat de moduladors epigenètics mediada per la inhibició del bromodomini BET i, d'altra banda, inhibició de la senyalització del sistema ubiquitin-proteosoma mitjançant un nou inhibidor covalent de HOIP, la subunitat catalítica LUBAC. Per això, hem desenvolupat models preclínics innovadors de LDCBG, com ara esferes multicel·lulars organotípiques i un model de membrana corioalantoïdal (CAM) d'embrió de pollastre d'ABC-DLBCL. Amb aquesta tecnologia d'avantguarda, hem demostrat que els inhibidors de BET ofereixen activitats antitumorals i proapoptòtiques sinèrgiques amb l'antagonista d'IRAK en models in vitro i in vivo. Aquest efecte està directament relacionat amb la regulació negativa d'un conjunt de gens regulats per NF-[Kappa]B, amb un impacte predominant en l'expressió de CD44 i MCL-1, amb el consegüent bloqueig de la motilitat cel·lular i desencadenament de la mort de les cèl·lules tumorals. A més, hem desenvolupat un derivat de pirid[2,3-d]pirimidina, CpdA, que pot unir-se eficientment i específicament a HOIP, la qual cosa resulta en la pertorbació de la dinàmica del complex LUBAC i en una alteració de la senyalització de NF- [Kappa]B, exercint una activitat antitumoral selectiva tant en models in vitro com in vivo de LDCBG la patentabilitat dels quals s'està avaluant actualment. Aquests resultats ressalten la importància de la via de NF-kB en el LDCBG i el potencial com a diana terapèutica que presenta, confirmant que HOIP representa una diana terapèutica prometedora contra el CBA-LDCBG, especialment els casos que presenten mutació activadora de MYD88, amb el desenvolupament de noves combinacions terapèutiques com ara la inhibició conjunta d'IRAK1 i IRAK4, i LUBAC la qual podria presentar efectes sinèrgics en el control de la sobreactivació aberrant de la via NF-kB en aquests pacients de forma específica.

[en] Although a high proportion of diffuse large B cell lymphomas (DLBCL) can be cured with combination of rituximab, cyclophosphamide, adriamycin, vincristine and prednisone, almost a third of the patients, corresponding mainly to the activated B-cell (ABC) subtype of the disease, does not achieve complete remission or relapse. It is believed that these tumors rely almost exclusively on constitutive nuclear transcription factor [Kappa]B (NF-[Kappa]B) signaling for their survival, a phenomenon that has been linked to a variety of genetic alterations that aberrantly activate the B cell receptor (BCR) and the Toll-like receptor (TLR) signaling pathways. In this PhD dissertation we have evaluated the safety and efficacy of different approaches aimed at targeting the pathological overactivation of NF-[Kappa]B in diffuse large B-cell lymphoma, with a special focus on the activated B-cell, hard-to-treat subtype of the disease. These approaches consist on one hand on the blockade of TLR signalling by direct inhibition of IRAK1/4 in association with BET bromodomain inhibition-mediated impairment of epigenetic reader's activity and on the other on the inhibition of ubiquitin-proteasome system signalling by means of a novel covalent inhibitor of HOIP, the LUBAC catalytic subunit. For this purpose, we have developed innovative preclinical models of DLBCL such as Organotypic multicellular spheres and a chick embryo chorioallantoic membrane (CAM) model of ABC-DLBCL. With this cutting-edge technology, we have demonstrated that BET inhibitors offer synergistic antitumoral and pro-apoptotic activities with IRAK antagonist in vitro and in vivo. This effect is directly related to the downregulation of a set of NF-[Kappa]B-regulated genes, with a predominant impact on CD44 and MCL-1 expression, with the consequent blockade of cell motility and triggering of tumor cell death. Additionally we have developed a pyrido[2,3-d]pyrimidine derivative, CpdA, that can efficiently and specifically bind to HOIP, resulting in the perturbation of LUBAC complex dynamic and in impaired downstream NF-[Kappa]B signaling, exerting selective antitumor activity both in In vitro and In vivo models of DLBCL which is currently being evaluated for patentability. These results highlight the importance of NF-kB pathways in DLBCL and the potential as therapeutic target that it presents, confirming that HOIP represents a promising therapeutic target for ABC-DLBCL, specially with activating MYD88 mutation, as new combinatorial treatment tackling both MYD88p.L265P, as for example dual IRAK1 and IRAK4 inhibition, and LUBAC could be developed in the search of synergistic effects which result in the control of the aberrant overactivation of the NF-kB pathway in these specific patients.