[en] McArdle disease or GSD type V is a glycogen metabolism disease caused by mutation in both copies of PYGM gene, which codifies for the muscular isoform of glycogen phosphorylase (GP-M or myophosphorilase). The patients are unable to use glycogen as energy source, and as a consequence they experience exercise intolerance, that can lead to rhabdomyolysis. Nowadays there is no effective therapy for the McArdle disease. Most prevalent mutation in McArdle's patients is p.R50X, which produces a Premature Termination Codon (PTC). Read-through agents (RTAs) are small molecules with the capacity to induce a read-through effect on a PTC, producing full-length protein synthesis. For this reason, in the present work the hypothesis that the pharmacological treatment with RTAs can restore a minimum amount of protein to improve the phenotype of the patients is evaluated. In order to do this we have tested the G418, Ataluren, Amlexanox and RTC13 compounds in two cellular models of McArdle disease: cultured HeLa cells transfected with a plasmid containing the p.R50X PTC and cultured muscular cells from the McArdle mouse model. The RTAs tested were unable to produce a read-through effect in both cellular models. Furthermore, it is also evaluated the hypothesis that the incapability of using glycogen as an energy source produces adaptative metabolic changes. This hypothesis has been tested in two different systems: in the skeletal muscle from the McArdle mouse model and in skeletal muscle cultures derived from the same model. Through biochemical values and protein analysis of metabolic pathways related enzymes of both models, we have observed alterations in energetic metabolic pathways and the degradative pathway of autophagy. It is verified that these alterations may vary depending on the medium composition in energetic compounds (glucose, palmitic acid, fasting). Autophagy pathway is an alternative system of glycogen cytoplasmic degradation in lysosomal organelles, so the modulation of this pathway may be a new opportunity for the phenotype improvement of the McArdle patients.

[es] La enfermedad de McArdle o glucogenosis tipo V es una enfermedad del metabolismo del glucógeno causada por mutaciones patogénicas en ambas copias del gen PYGM, que codifica para la isoforma muscular de la enzima glucógeno fosforilasa (GP-M o miofosforilasa). Este déficit conduce a la incapacidad para degradar el glucógeno en el músculo y los pacientes presentan como rasgo fenotípico principal la intolerancia al ejercicio, pudiendo llegar a rabdomiolisis. Actualmente no existe ningún tratamiento efectivo para la enfermedad de McArdle. La mutación más común entre los pacientes es la p.R50X que conduce a un codón de terminación prematuro (PTC). Los agentes read-through (RTAs) son pequeñas moléculas que tienen la capacidad de inducir un efecto read-through sobre un PTC, produciendo la lectura completa de la proteína. Por este motivo en el presente trabajo se evalúa la hipótesis de que el tratamiento farmacológico con RTAs puede reestablecer el mínimo de proteína GP-M para la mejora del fenotipo en los pacientes de McArdle. Para ello se han estudiado los compuestos G418, Ataluren, Amlexanox y RTC13 en dos modelos celulares de la enfermedad de McArdle: cultivos de células HeLa transfectadas con plásmidos que contienen el PTC p.R50X y cultivos de células provenientes de músculos del modelo murino de la enfermedad de McArdle. Los RTAs evaluados no han conseguido producir un efecto read-through en los modelos utilizados. Por otra parte, en el presente trabajo también se plantea la hipótesis de que la incapacidad de utilizar el glucógeno como fuente de energía en los pacientes de McArdle produce cambios metabólicos adaptativos. Esta hipótesis se ha evaluado en dos sistemas, músculos de ratones del modelo de McArdle y cultivos celulares procedentes del mismo. A través de estudios de los parámetros bioquímicos en los medios de cultivo y análisis proteicos de enzimas implicadas en las vías metabólicas de ambos modelos, se han observado alteraciones en el metabolismo de las vías energéticas y en la vía degradativa de la autofagia. Se ha comprobado que estas alteraciones varían en función de los aportes energéticos del medio (glucosa, ácido palmítico y ayuno). La vía de la autofagia supone un sistema alternativo a la degradación citoplasmática de glucógeno por medio de degradación lisosomal, por lo que la modulación de esta vía podría ser una nueva vía para la mejoría del fenotipo de los pacientes McArdle.