[en] Epidemiological studies have shown that virtually all multiple myeloma are preceded by a premalignant phase. In this regard, monoclonal gammopathy of undetermined significance (MGUS) and smoldering multiple myeloma (MMQ) are considered premalignant and asymptomatic entities differ significantly in the rate of progression to symptomatic MM. Despite their radically different clinical behavior, the three entities share the same neoplastic cell apparently, which is a plasma cell (PC) and aberrant clonal. Cytogenetics and fluorescence in situ hybridization (FISH) have failed to identify abnormalities characteristic of each developmental stage. However, this could be due to either the lack of a specific genetic stamp of each developmental stage of monoclonal gammopathies, or they have not been used and the analysis tools suitable for your search. Therefore, the combination of classical cytogenetic techniques as HISF advanced genomic techniques and high resolution for exploring the status of the genome and transcriptome, could be decisive when further genetic mechanisms that trigger the transformation of premalignant entities to active MM. Furthermore, in the developmental stages of monoclonal gammopathies exists an intermediate entity between MGUS and MM is the MMQ, characterized by a risk of progression to symptomatic myeloma approximately ten times greater than the GMSI. Within the MMQ defined a group at high risk of progression to symptomatic MM (MMQ-AR). The standard treatment is abstinence MMQ to progression to symptomatic MM. Our group is leading a clinical trial (QuiReDex) to determine whether treatment with lenalidomide plus dexamethasone (LenDex) MMQ-AR in prolonging the time to progression. The opportunity to study the genome and transcriptome of a unique group of patients carefully defined from the clinical point of view, could help determine if there are genetic basis justifying a different clinical outcome in these patients. Finally, treatment of patients LenDex after randomisation in QuiReDex assay, it is for the treatment arm, allow us analyze the transcriptome of non-hematopoietic tumor cells and thus, further both the mechanisms of action of lenalidomide derived from its effects on the microenvironment and the mechanisms of toxicity profile. With this background we have set the following objectives: 1. Analyzed by fluorescence in situ hybridization frequency of recurrent genetic abnormalities and quantify the proportion of plasma cells containing abnormalities in these three developmental stages of monoclonal gammopathies. 2. Studying the gains and losses of chromosomal material, as well as losses of heterozygosity in different developmental stages of monoclonal gammopathies: MGUS, MMQ and symptomatic MM. 3. To study the gene expression profiles of MGUS, the MQM and the GM, in order to identify similarities and differences that help explain the different evolution of the three entities. 4. To investigate whether genomic changes and gene expression observed in a group of patients with high-risk MMQ included in the clinical trial QuiReDex, influence their clinical course. 5. Evaluate the impact of treatment with lenalidomide / dexamethasone on the transcriptome of hematopoietic cells in the bone marrow myeloma. The main conclusions of our work are as follows: 1. The study of monoclonal gammopathies by fluorescence in situ hybridization confirmed that IGH translocations, deletions of 13q and 17p, and gains of 1q are present from the early stages of neoplastic transformation (MGUS). However, the progression from MGUS to MM MMQ and finally leads to an increased number of plasma cells genetically abnormal. 2. Using techniques of high resolution genomic analysis, such as arrays of SNPs, show that, despite the GM has more chromosomal abnormalities and loss of heterozygosity (LOH), the transition from MGUS to MM is not associated with given a chromosomal abnormality, but rather with a clonal expansion of genetically aberrant subclones already present in the early stages. 3. The transcriptome of clonal plasma cell MGUS both, as the MQM and MM analyzed by microarray expression shows a significant deregulation of hundreds of genes in the transition from the three developmental stages. Families and more altered gene pathways include apoptosis, NFkB pathway, small nucleolar RNA family (snoRNA) and protein family "zinc finger". 4. As for MM quiescent (MMQ) at high risk of progression to symptomatic MM: a. The profile of chromosomal alterations or LOH not predict the risk of progression of high-risk MMQ. However, the increased expression of several SNORD correlates with shorter time to the development of symptoms CRAB. b. Not found a genetic signature that predicts the response to treatment with lenalidomide plus dexamethasone. c. The plasma cell of high risk MMQ often undergoes clonal evolution at the time of symptomatic MM progression. By contrast, the gene expression profile of the MMQ COP at the time of the progression is not modified. d. Lenalidomide plus dexamethasone in high risk MMQ not alter the expression profile of non-hematopoietic tumor cellularity of bone marrow.

[es] Los estudios epidemiol?gicos han demostrado que la pr?ctica totalidad de los mielomas m?ltiples est?n precedidos por una fase premaligna. En este sentido, la gammapat?a monoclonal de significado incierto (GMSI) y el mieloma m?ltiple quiescente (MMQ) se consideran entidades premalignas y asintom?ticas que difieren de forma significativa en la tasa de progresi?n a MM sintom?tico. A pesar de su comportamiento cl?nico radicalmente distinto, las tres entidades comparten aparentemente la misma c?lula neopl?sica, que es una c?lula plasm?tica (CP) clonal y aberrante. La citogen?tica y la hibridaci?n in situ fluorescente (HISF) no han conseguido identificar alteraciones caracter?sticas de cada estadio evolutivo. Sin embargo, esto podr?a ser debido bien a que no exista un sello gen?tico espec?fico de cada fase evolutiva de la las gammapat?as monoclonales; o bien a que no se hayan utilizado las herramientas y los an?lisis adecuados para su b?squeda. Por tanto, la combinaci?n de t?cnicas citogen?ticas cl?sicas como la HISF y t?cnicas gen?micas avanzadas de alta resoluci?n que permiten explorar el estatus del genoma y del transcriptoma, podr?a ser decisiva a la hora de profundizar los mecanismos gen?ticos que desencadenan la transformaci?n de las entidades premalignas al MM activo. Por otro lado, en las fases evolutivas de las gammapat?as monoclonales existe una entidad intermedia entre GMSI y MM que es el MMQ, caracterizado por un riesgo de progresi?n a mieloma sintom?tico aproximadamente diez veces mayor que la GMSI. Dentro del MMQ se ha definido un grupo de alto riesgo de progresi?n a MM sintom?tico (MMQ-AR). El est?ndar de tratamiento del MMQ es la abstenci?n hasta progresi?n a MM sintom?tico. Nuestro grupo est? liderando un ensayo cl?nico (QuiReDex) para determinar si el tratamiento con lenalidomida m?s dexametasona (LenDex) en el MMQ-AR prolonga el tiempo hasta la progresi?n. La oportunidad de estudiar el genoma y el transcriptoma de un grupo ?nico de pacientes minuciosamente definido desde el punto de vista cl?nico, podr?a ayudar a averiguar si existen bases gen?ticas que justifiquen una evoluci?n cl?nica diferente en estos pacientes. Por ?ltimo, el tratamiento con LenDex de los pacientes que, despu?s de la aleatorizaci?n en el ensayo QuiReDex, les corresponde la rama de tratamiento, nos permitir?a analizar el transcriptoma de las c?lulas hematopoy?ticas no tumorales y as?, profundizar tanto en los mecanismos de acci?n de la lenalidomida derivados de sus efectos sobre el micromedioambiente como en los mecanismos del perfil de toxicidad. Con estos antecedentes nos hemos planteado los siguientes objetivos: 1. Analizar mediante hibridaci?n in situ fluorescente la frecuencia de las anomal?as gen?ticas recurrentes y cuantificar la proporci?n de c?lulas plasm?ticas que contienen dichas anomal?as en las tres etapas evolutivas de las gammapat?as monoclonales. 2. Estudiar las ganancias y las p?rdidas de material cromos?mico, as? como las p?rdidas de heterocigosidad en las diferentes fases evolutivas de las gammapat?as monoclonales: GMSI, MMQ y MM sintom?tico. 3. Estudiar los perfiles de expresi?n g?nica de la GMSI, el MMQ y el MM, con el fin de identificar similitudes y diferencias que ayuden a explicar la evoluci?n diferente de las tres entidades. 4. Investigar si los cambios gen?micos y de expresi?n g?nica observados en un grupo de pacientes con MMQ de alto riesgo incluidos en el ensayo cl?nico QuiReDex, influyen en su evoluci?n cl?nica. 5. Evaluar el impacto del tratamiento con lenalidomida/dexametasona sobre el transcriptoma de las c?lulas hematopoy?ticas no mielomatosas de la m?dula ?sea. Las conclusiones m?s relevantes de nuestro trabajo han sido las siguientes: 1. El estudio de las gammapat?as monoclonales mediante hibridaci?n in situ fluorescente corrobora que las translocaciones de IGH, las deleciones de 13q y 17p, y las ganancias de 1q est?n presentes desde los estadios iniciales de la transformaci?n neopl?sica (GMSI). Sin embargo, la progresi?n de GMSI a MMQ y finalmente a MM conlleva un incremento del n?mero de c?lulas plasm?ticas gen?ticamente anormales. 2. La utilizaci?n de t?cnicas de an?lisis gen?mico de alta resoluci?n, como son los arrays de SNPs, demuestran que, a pesar de que el MM tiene m?s alteraciones cromos?micas y m?s p?rdidas de heterocigosidad (LOH), la transici?n de GMSI a MM no se asocia con una alteraci?n cromos?mica determinada, sino m?s bien con una expansi?n clonal de subclones gen?ticamente aberrantes ya presentes en las fases iniciales. 3. El transcriptoma de la c?lula plasm?tica clonal tanto de la GMSI, como del MMQ y del MM analizado mediante microarrays de expresi?n muestra una desregulaci?n significativa de cientos de genes en la transici?n de las tres etapas evolutivas. Las familias y rutas g?nicas m?s alteradas incluyen: apoptosis, ruta de NFkB, familia de small nucleolar RNA (snoRNA) y familia de prote?nas "zinc finger". 4. En cuanto al MM quiescente (MMQ) con alto riesgo de progresi?n a MM sintom?tico: a. El perfil de alteraciones cromos?micas o de LOH no predice el riesgo de progresi?n del MMQ de alto riesgo. Sin embargo, el aumento de la expresi?n de varios SNORD se correlaciona con menor tiempo hasta el desarrollo de la sintomatolog?a CRAB. b. No se ha encontrado una firma gen?tica que prediga la respuesta al tratamiento con lenalidomida m?s dexametasona. c. La c?lula plasm?tica del MMQ de alto riesgo experimenta con frecuencia evoluci?n clonal en el momento de la progresi?n a MM sintom?tico. Por el contrario, el perfil de expresi?n g?nica de la CP del MMQ en el momento de la progresi?n no se ve modificado. d. El tratamiento con lenalidomida m?s dexametasona en el MMQ de alto riesgo no modifica el perfil de expresi?n de la celularidad hematopoy?tica no tumoral de la m?dula ?sea.