[en] The tumor immune microenvironment (TIME) plays a critical role in the early formation of tumors and their progression. Targeting the TIME has offered new therapeutic approaches and improved current ones in several cancers, including B-cell malignancies. Nonetheless, further investigation is needed in order to more deeply understand immune evasion mechanisms that lead to tumor progression and to design therapies that modulate the immune system more precisely. Here, our main objectives are to provide new insights into immune mechanisms that favor tumor progression and a pre-clinical rationale for the design of new therapeutic strategies with immunomodulatory potential. To accomplish these goals our study will focus on chronic lymphocytic leukemia (CLL) and primary central nervous system lymphoma (PCNSL). Mechanisms driving the progression of CLL from its early stages are not fully understood. This hampers detecting progression in advance and developing therapies that could intervene in the early stages. Although the limited acquisition of molecular changes suggests that CLL progression is not mainly driven by clonal evolution, a deeper analysis of the immune microenvironment that demonstrates immune variations over time that contribute to progression has not been performed. Hence, we longitudinally studied the immune and genetic landscapes of untreated progressing and non-progressing patients. Our results show that progressed CLL patients experience an increase in effector memory and terminally exhausted T-betmid/-EomeshiPDhi CD8+ T cells over time, not observed in non-progressing patients. In addition, T cells at progression acquire a distinct transcriptional profile. This is accompanied by enhanced immunosuppressive properties in leukemic cells at progression. We prove that progressed CLL cells are intrinsically more capable of inducing CD8+ T-cell exhaustion in T cells affected by CLL and healthy T cells by a mechanism dependent on soluble factors including IL-10. In addition, the reduced genetic changes we found by whole-exome sequencing in our cohort indicate these immune variations are fundamental for progression in CLL. Patients diagnosed with PCNSL often face dismal outcomes due to the limited availability of therapeutic options. PCNSL cells frequently have deregulated B-cell receptor (BCR) signaling, but its inhibition using ibrutinib only offers a brief effective response in PCNSL patients. Nonetheless, the BCR pathway can also be blocked by inhibiting the nuclear exportin XPO1 using selinexor. Selinexor is able to cross the blood-brain barrier and has shown positive clinical activity in a patient with refractory diffuse large B-cell lymphoma in the CNS. Accordingly, we evaluated the effects of selinexor alone and also combined it with ibrutinib in pre-clinical mouse models of PCNSL. Our analysis shows that selinexor blocks tumor growth and prolongs survival in a bioluminescent mouse model and its combination with ibrutinib further increases survival. We demonstrate that CNS lymphomas in mice are infiltrated by tumor-promoting M2-like macrophages expressing PD-1 and SIRPα. Moreover, the treatment with selinexor and ibrutinib favors an anti-tumoral immune response by shifting macrophage polarization toward an inflammatory phenotype and diminishing the expression of PD-1 and SIRPα in M2 tumor-associated macrophages.

[es] El microambiente inmune tumoral juega un papel fundamental en las etapas tempranas de la formación de los tumores y en la progresión de éstos. Terapias dirigidas a este microambiente ofrecen nuevas opciones terapéuticas y también sirven para mejorar las terapias actuales frente a muchos cánceres, incluyendo los que afectan a las células B. Sin embargo, son necesarias más investigaciones para entender en mayor profundidad los mecanismos de evasión del sistema inmune que favorecen la progresión de los tumores y diseñar inmunoterapias más precisas. Nuestros principales objetivos son aportar nuevas evidencias sobre mecanismos inmunes asociados a la progresión tumoral y las bases pre-clínicas para el desarrollo de nuevas estrategias terapéuticas con potencial inmuno-modulador. Para ello, nos centramos en la leucemia linfática crónica (LLC) y en el linfoma cerebral primario (LCP). Los mecanismos de progresión en LLC desde estadios tempranos no son conocidos en su totalidad. Aunque la adquisición de alteraciones moleculares es escasa sugiriendo que la LLC no progresa exclusivamente por mecanismos de evolución clonal, todavía no se ha llevado a cabo un análisis exhaustivo del microambiente inmune que demuestre que la progresión sí pueda deberse a cambios inmunes. Por ello, hemos realizado un estudio longitudinal abarcando tanto los escenarios genéticos como inmunológicos en pacientes de LLC sin tratar que han progresado clínicamente y en pacientes asintomáticos durante un largo periodo de tiempo. Nuestros resultados muestran que los pacientes que progresan experimentan un incremento de células T CD8+ efectoras de memoria y terminalmente exhaustas T-betmid/-EomeshiPDhi a la progresión. Este incremento no se observa en los pacientes de LLC que no han progresado. Además, las células T a la progresión adquieren un perfil transcripcional diferente. Esto va acompañado de un aumento en las propiedades inmunosupresoras de las células leucémicas a la progresión. Demostramos que las células de LLC en el momento de la progresión tienen mayor capacidad de inducir exhaustión tanto en células T CD8+ de LLC como aquellas procedentes de individuos sanos, y que lo hacen mediante un mecanismo dependiente de factores solubles que incluye IL-10. Los escasos cambios genéticos que encontramos tras secuenciar el exoma de nuestros pacientes nos permiten concluir que las variaciones inmunes que hemos identificado son fundamentales para la progresión de la LLC. El desenlace de los pacientes diagnosticados con LCP es normalmente desfavorable debido a la escasez de opciones terapéuticas efectivas. Las células malignas de LCP presentan con frecuencia una desregulación de la vía del receptor de la célula B (del inglés, BCR), pero su inhibición mediante ibrutinib muestra respuestas muy breves en pacientes. Sin embargo, la vía del BCR también puede bloquearse mediante la inhibición de la exportina nuclear XPO1 con selinexor. Selinexor atraviesa la barrera hemato-encefálica y ha mostrado actividad en un paciente diagnosticado con linfoma difuso de células grandes B con recaída en el sistema nervioso central. Por consiguiente, decidimos evaluar los efectos de selinexor en monoterapia y combinado con ibrutinib en modelos pre-clínicos murinos de LCP. Nuestro análisis muestra que selinexor bloquea el crecimiento tumoral y prolonga la supervivencia en un modelo de ratón bioluminiscente y la combinación con ibrutinib prolonga aún más la supervivencia. Demostramos que los linfomas cerebrales en ratón están infiltrados con macrófagos pro-tumorales M2 que expresan PD-1 y SIRPα. Además, el tratamiento con selinexor e ibrutinib favorece la respuesta inmune anti-tumoral induciendo un cambio en la polarización de los macrófagos hacia un perfil pro-inflamatorio y reduciendo la expresión de PD-1 y SIRPα en los macrófagos M2 asociados al tumor.