[en] Conjunctival intraepithelial lymphocytes, tear soluble molecules and commensal microbiota have important roles in the ocular mucosal immune response in healthy and diseased subjects. For the purpose of this study, the cellular and microbial populations of the conjunctiva and the lacrimal soluble molecules were analyzed to find the main biomarkers in allergic conjunctivitis. A total of 35 healthy subjects, 28 subjects with seasonal allergic conjunctivitis and 32 subjects with perennial allergic conjunctivitis were recruited to obtain peripheral blood, conjunctival brush cytology, tear fluid and microbiota samples. Flow cytometry for lymphocytes, multiplex bead assays for cytokines and highthroughput DNA sequencing for microbiome analysis were used. For perennial allergic conjunctivitis, an increased proportion of Th2 and NKT lymphocytes was found, while CD3+TCRgd+ lymphocytes and double negative MAIT cells were decreased. In contrast, seasonal allergic conjunctivitis was distinguished by an increase in Th17 and Th22 cell proportions, while the Th1 cell proportion decreased. Among tear fluid, the vast majority of pro-inflammatory cytokines (especially Th2 and Th17 cytokines) in perennial allergies and MMP-9 together with IgA in seasonal allergies were increased. In contrast, TGF-b2 was decreased in both forms of conjunctivitis. Finally, fungal (Malassezia species) and bacterial (Kocuria and Propionobacterium acnes species) colonization were observed in the perennial allergic conjunctivitis group. These results provide the basis for the development of a disease profile for perennial allergic conjunctivitis and open the door to new therapeutic and diagnostic strategies.

[es] Tanto los linfocitos intraepiteliales conjuntivales, como las moléculas solubles en la lágrima y la microbiota comensal desempeñan un papel muy importante en la respuesta inmunitaria de la mucosa ocular en sujetos sanos y sanos y enfermos. En este estudio se analizaron las poblaciones celulares y microbianas de la conjuntiva y las moléculas solubles lacrimales para encontrar los principales biomarcadores de la conjuntivitis alérgica. Un total de 35 sujetos sanos, 28 sujetos con conjuntivitis alérgica estacional y 32 sujetos con conjuntivitis alérgica perenne fueron reclutados para obtener muestras de sangre periférica y plasma, citología por cepillado conjuntival, lágrima y microbiota. Se utilizó la citometría de flujo para fenotipar los linfocitos, los ensayos de multiplex para analizar las citocinas y la secuenciación de ADN de alto rendimiento para el análisis del microbioma. En el caso de la conjuntivitis alérgica perenne, se encontró una mayor proporción de linfocitos Th2 y NKT, mientras que los linfocitos CD3+TCRgammadelta+ y las células MAIT doblemente negativas estaban disminuidas. En cambio, para la conjuntivitis alérgica estacional pudimos observar un aumento de las proporciones de los subtipos Th17 y Th22, mientras que las Th1 se encontraron disminuidas. En lágrima, la gran mayoría de las citocinas proinflamatorias (especialmente las citocinas de tipo Th2 y Th17) se encontraban aumentadas mientras que en las alergias perennes eran la MMP-9 junto con la IgA las que estaban aumentadas. Por otro lado, el TGF-b2 estaba disminuido en ambas formas de conjuntivitis. Por último, se observó una colonización fúngica (especies de Malassezia) y bacteriana (especies de Kocuria y Propionobacterium acnes) en el grupo de conjuntivitis alérgica perenne. Estos resultados proporcionan la base para el desarrollo de un perfil de enfermedad para la conjuntivitis alérgica perenne y abren la puerta a nuevas estrategias terapéuticas y de diagnóstico.