[en] The analysis of the degradation and production of nitric oxide (NO) in Botrytis cinerea is essential to fully understand the cell death processes and signalling in plant and fungal cells during the establishment and progress of the plant-pathogen interaction.B. cinerea has a single flavohemoglobin coding gene (Bcfhg1). The encoded enzyme shows a very high affinity for NO and constitutes the main, if not the only one, NO detoxification system of B. cinerea. Bcfhg1 expression in vitro is enhanced by exogenously added NO but only in young mycelium. In planta expression of Bcfhg1 is maxima at the beginning of the infection, decaying afterwards. Although the enzyme confers protection against nitrosative stress to B. cinerea, removal of the coding gene do not determine any obvious alteration in the fungus, neither during saprophytic growth nor during infection. B. cinerea produces NO in vitro and in planta and this production is stimulated in mature mycelium by exogenously added NO. The NO produced by the fungus could act sinergistically with the NO produced by the plant to allow the fungus to exploit the plant hypersensitive response. During this work it has been demonstrated that the B. cinerea transformation process produces an epigenetic phenotype characterised by a faster growth, a reduced production of conidia and an increase in sclerotia formation. The observed phenotype could be useful for the fungus to adapt its physiology to changes in the environment in response to an external stress and increase the chances of biological success. It has also been evaluated the utilization of gene silencing as a tool for the analysis of Bcfhg1 function.

[es] El estudio de la degradaci?n y producci?n de ?xido n?trico (NO) en Botrytis cinerea es esencial para entender los procesos de muerte celular y la se?alizaci?n en las c?lulas vegetales y f?ngicas durante el establecimiento y progreso de la interacci?n planta-pat?geno.B. cinerea tiene un ?nico gen codificador de flavohemoglobina (Bcfhg1). La enzima codificada metaboliza NO de una forma r?pida y eficiente y presenta una gran afinidad por el NO. Bcfhg1 alcanza un m?ximo de expresi?n durante la germinaci?n de esporas, decayendo posteriormente. La expresi?n de Bcfhg1 es inducida por NO ex?geno en esporas reci?n germinadas. Sin embargo, ?sta inducci?n es muy reducida en micelio maduro. De manera paralela, el nivel de expresi?n de Bcfhg1 in planta es m?ximo al inicio de la infecci?n, reduci?ndose posteriormente. Los mutantes ?Bcfhg1 de B. cinerea son incapaces de metabolizar NO enzim?ticamente aunque, al contrario que en otros pat?genos, el establecimiento y el progreso de la infecci?n no se ven significadamente afectados.Adem?s de detoxificar NO, B. cinerea puede producir NO por s? mismo, tanto in vitro como in planta y ?sta producci?n puede ser inducida por la exposici?n a NO ex?geno. El NO producido puede actuar de manera sin?rgica con el NO producido por la planta permitiendo al hongo explotar la respuesta de hipersensibilidad de la planta.A lo largo de esta investigaci?n se ha demostrado que el proceso de transformaci?n de B. cinerea determina la aparici?n de variaciones de origen epigen?tico. El fenotipo derivado puede ayudar a superar las situaciones de estr?s ya que, entre otras alteraciones, se observa, en las cepas derivadas, la producci?n de un mayor n?mero de estructuras de resistencia (esclerocios). Tambi?n hemos evaluado la utilizaci?n del silenciamiento g?nico como herramienta para el an?lisis de la funci?n g?nica del gen Bcfhg1.