[en] Chagas disease (CD) is the most important parasitic disease in Latin America, where it is endemic. Due to the migratory movements of the last decades, CD has become a global health problem. CD presents a sharp phase characterized by high parasitaemia followed by a chronic phase in which the parasitaemia is low and intermittent. For this reason, the polymerase's chain reaction (PCR) sensitivity in the chronic phase is variable. The main objective of this thesis is to evaluate the usefulness of the real-time PCR technique (qPCR) in the diagnosis and monitoring of patients in the chronic phase of CD, followed in two centers of Tropical Medicine in Barcelona. The qPCR shows low sensitivity in our cohort and a positive result is not related to the appearance of the visceral involvement characteristic of the chronic phase. Despite this, the results of parasitemia obtained in untreated patients can provide data on the dynamics of the parasite and the different factors that may influence its presence in peripheral blood. However, a positive result of qPCR in treated patients is a good surrogate marker of therapeutic failure both in routine clinical practice and to evaluate new treatment patterns in clinical trials. In the cohort followed in our center, the failure rate to Benznidazole was very low, which reinforces its effectiveness as trypanocidal. However, the failure of two different treatment regimes with Posaconazole, evaluated in the context of the Chagasazol clinical trial, was close to 90%. According to the experience gathered in this thesis, the greatest utility of qPCR in the chronic phase of CD is monitoring the response to trypanocidal treatment. In the absence of new early healing biomarkers, this monitoring should be carried out periodically and over a long period of time. The use of external quality control of qPCR results makes them more robust and allows an early evaluation of possible protocol errors.

[es] La Enfermedad de Chagas (EC) es la enfermedad parasitaria más importante en América latina, donde es endémica. Debido a los movimientos migratorios de las últimas décadas, la EC se ha convertido en un problema de salud global. La EC presenta una fase aguda, caracterizada por una alta parasitemia, seguida de una fase crónica en la que la parasitemia es baja e intermitente. Por esta razón, la sensibilidad de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en esta segunda fase es muy variable. El objetivo de esta tesis es evaluar la utilidad de la técnica de la PCR a tiempo real (qPCR) en el diagnóstico y seguimiento de pacientes en la fase crónica de la EC seguidos en dos centros de Medicina Tropical en Barcelona. La qPCR presenta baja sensibilidad en nuestra cohorte y un resultado positivo no se relaciona con la aparición de alteraciones viscerales características de la fase crónica. A pesar de ello, los resultados de parasitemia obtenidos en pacientes no tratados, pueden aportar datos sobre la dinámica del parásito y los diferentes factores que pueden influir en su presencia en sangre periférica. Sin embargo, un resultado positivo de qPCR en pacientes tratados es un maracador útil para detectar fracasos de tratamiento, tanto en la práctica clínica habitual como en el contexto de ensayos clínicos. En la cohorte seguida en nuestro centro, la tasa de fracaso a Benznidazol es muy baja. Sin embargo, el fracaso de dos pautas diferentes de Posaconazol, evaluadas en el contexto del ensayo clínico Chagasazol, fue cercana al 90%. Según la experiencia recogida en esta tesis, en la fase crónica de la EC la mayor utilidad de la qPCR es la monitorización de la respuesta al tratamiento. Este seguimiento, a falta de nuevos biomarcadores precoces de curación, debe realizarse de forma periódica y durante un largo período de tiempo. La utilización de un control de calidad externo de los resultados de qPCR confiere una mayor robustez a los resultados y permite evaluar de forma precoz los posibles errores de protocolo.