[ca] Existeixen diferents malalties com l'Alzheimer o infarts que causen danys cerebrals prou importants com perquè el pacient mai no se'n pugui recuperar completament. Això és conseqüència que els danys neuronals majoritàriament no es regeneren ni en l'espina dorsal ni en el cervell dels mamífers adults. D'altra banda, a la natura existeixen exemples com el cuc Caenorhabditis elegans, el peix zebra o ratolins en els quals s'han observat regeneracions del sistema nerviós. L'objectiu d'aquesta tesi és dissenyar, implementar i caracteritzar mitjans amb els quals immobilitzar cucs C. elegans per tal de visualitzar-ne els axons i realitzar-hi una axotomia làser. Després, s'ha hagut d'avaluar la regeneració espontània de l'axó i els possibles efectes en ser tractats amb Citicolina (un medicament utilitzat amb pacients lleus d'isquèmia). Després dels tests d'immobilització i viabilitat, el sistema implementat ha resultat suficient per la immobilització del cuc sense alterar-ne la salut ni l'esperança de vida. S'han realitzat múltiples axotomies i posteriorment s'han adquirit imatges de la regeneració dels axons al cap de 24 hores mitjançant microscopies confocal i TPEF. La regeneració era apreciable en el 95% dels axons en cucs tractats amb Citicolina, mentre que en el grup de control el 90% dels axons presentaven indicis de creixement. A més a més, el 33% dels axons tractats amb Citicolina establien connexió amb el nervi dorsal en comparació amb el 26% del grup de control. Això mostra els primers efectes positius en la regeneració d'axons en C. elegans tractats amb Citicolina. En un futur, millores com la neteja del tampó M9 i l'ús de nematodes sense micropartícules secundàries, juntament amb mitjans per mantenir els cucs immobilitzats per períodes de temps més llargs, permetrien estudis dinàmics de la regeneració dels axons sense la necessitat d'extreure el cuc de la cambra d'immobilització durant l'experiment. Després d'implementar les millores suggerides en el muntatge, el sistema microfluídic d'immobilització impulsarà futurs experiments que permetran comparar paràmetres com l'àrea dels cons de creixement, la llargada de diferents filopodies, diferents temps després de l'axotomia, diferents tractaments amb Citicolina, etc. Tots aquests paràmetres donaran una discusió complerta sobre els efectes d'un medicament en la regeneració dels axons.

[es] Existen varios casos como en la enfermedad de Alzheimer, embolia o accidentes cerebrales, en los que debido a la degeneración del sistema nervioso las personas nunca pueden recuperar su vida normal. Esto es debido a que los daños neuronales no pueden ser reparados o regenerados en el cerebro adulto y la espina dorsal de los mamíferos. Por otro lado, hay ejemplos en la naturaleza como en los casos del gusano C. elegans, del pez cebra o incluso en ratones, en donde sus sistemas nerviosos tienen la capacidad de recuperarse. El objetivo de esta tesis es diseñar, producir y caracterizar dispositivos de inmovilización de C. elegans con el fin de visualizar y cortar con láser los axones del gusano. Posteriormente, se hizo un estudio preliminar de la regeneración axonal espontánea y del posible efecto del tratamiento con Citicolina (droga usada en pacientes con isquemia cerebral). El sistema diseñado ha probado ser suficiente para la inmovilización de gusanos sin afectar sustancialmente su salud ni su ciclo normal de vida. Se realizaron múltiples axotomías y se adquirieron imágenes de la regeneración axonal producida 24 horas después, usando técnicas de microscopía confocal y fluorescencia de dos fotones. Se observó regeneración en el 95% de los axones de los gusanos tratados con Citicolina comparado con el 90% observado en el grupo de control. Adicionalmente, el 33% de los axones tratados con Citicolina se reconectaron con la cuerda dorsal en contraste con el 26% observado para la muestra de control. En conclusión, esta es la primera demostración en la que un dispositivo de inmovilización basado en técnicas microfluidicas sirve para mostrar los posibles efectos positivos del tratamiento con Citicolina en C. elegans en términos de regeneración axonal después de realizar axotomía láser.