[en] The three-dimensional organization of chromatin plays a crucial role in regulating gene expression. Understanding long-range interactions between gene promoters and regulatory elements is essential for comprehending transcriptional control and how its disruption can lead to diseases, including hematopoietic malignancies. However, conventional methods for studying chromatin interactions require large amounts of starting material, limiting their application to clinical scenarios and rare cell populations. To address this limitation, we developed Low Input Capture Hi-C (liCHi-C), a cost-effective and flexible method that enables high-resolution mapping and comparison of promoter interactomes using as few as 50,000 cells. To facilitate the analysis of chromatin interaction data, we created HiCaptuRe, an R package that streamlines the processing, integration, and visualization of Capture Hi-C data. This tool enhances the accessibility and interpretability of complex chromatin interaction datasets. We applied liCHi-C to investigate both normal and malignant human hematopoietic hierarchy using clinical samples. Our analysis revealed the dynamic architecture of promoters during human hematopoiesis, helping identify developmental pathways and transcriptional changes during cellular fate commitment. Furthermore, we developed a comprehensive multi-omic roadmap of human B-cell differentiation, integrating liCHi-C with RNA-seq, ATAC-seq, and CUT\&RUN data across multiple B-cell developmental stages. This integrated approach provided unprecedented insights into the regulatory landscape governing B-cell development. liCHi-C proved valuable in pinpointing disease-relevant cell types, genes, and pathways potentially affected by non-coding alterations in distal regulatory elements. Additionally, we demonstrated liCHi-C's potential in uncovering genome-wide structural variants, determining their breakpoints, and inferring their potential pathogenic effects. Our optimized liCHi-C method, coupled with the HiCaptuRe analysis package and multi-omic integration, greatly expands the exploration of 3D chromatin organization in scarce cell populations. This comprehensive approach offers new opportunities to discover key factors and regulatory networks involved in normal development and disease pathogenesis, particularly in the context of hematopoiesis and B-cell biology.

[es] La organización tridimensional de la cromatina desempeña un papel crucial en la regulación de la expresión génica. Comprender las interacciones de largo alcance entre los promotores de genes y los elementos reguladores es esencial para entender el control transcripcional y cómo su alteración puede conducir a enfermedades, incluyendo las neoplasias hematológicas. Sin embargo, los métodos convencionales para estudiar las interacciones de la cromatina requieren grandes cantidades de material de partida, limitando su aplicación en escenarios clínicos y poblaciones celulares raras. Para abordar esta limitación, desarrollamos Low Input Capture Hi-C (liCHi-C), un método rentable y flexible que permite el mapeo y la comparación de alta resolución de interactomas de promotores utilizando tan solo 50.000 células. Para facilitar el análisis de datos de interacción de la cromatina, creamos HiCaptuRe, un paquete de R que simplifica el procesamiento, la integración y la visualización de datos de Capture Hi-C. Esta herramienta mejora la accesibilidad e interpretabilidad de datos complejos de interacciones de la cromatina. Aplicamos liCHi-C para investigar la hematopoyesis humana tanto normal como maligna utilizando muestras clínicas. Nuestro análisis reveló que la arquitectura de los promotores es dinámica durante la hematopoyesis, ayudando a identificar rutas de desarrollo y cambios transcripcionales durante el compromiso celular. Además, desarrollamos un atlas multi-ómico de la diferenciación de células B humanas, integrando liCHi-C con datos de RNA-seq, ATAC-seq y CUT\&RUN a través de múltiples etapas del desarrollo de células B. Este enfoque integrado proporciona conocimientos sin precedentes sobre el panorama regulatorio que gobierna el desarrollo de las células B. liCHi-C demostró ser valioso para identificar tipos celulares, genes y rutas relevantes para enfermedades potencialmente afectadas por alteraciones no codificantes en elementos reguladores distales. Además, demostramos el potencial de liCHi-C para descubrir variantes estructurales, determinar sus puntos de ruptura e inferir sus posibles efectos patogénicos. Nuestro método optimizado liCHi-C, junto con el paquete de análisis HiCaptuRe y la integración multi-ómica, expande enormemente la exploración de la organización tridimensional de la cromatina en poblaciones celulares escasas. Este enfoque integral ofrece nuevas oportunidades para descubrir factores clave y redes reguladoras involucradas en el desarrollo normal y la patogénesis de enfermedades, particularmente en el contexto de la hematopoyesis y la biología de las células B.