[en] Introduction: Fetal tracheal occlusion by the endoscopic introduction of an endotracheal balloon at 26 - 29 weeks of gestation represents the standard of care of patients suffering from severe congenital diaphragmatic hernia (CDH) diagnosed prenatally. However, some patients present prenatal indicators of extreme pulmonary hypoplasia and the survival rate, despite the standard fetoscopic treatment, approaches the 0%. Clinical reports advocate for an early tracheal occlusion, in an early pulmonary developmental stage, to allow the lungs to grow more and be adequate for a better gas exchange after birth. The aim of the present study is to evaluate the anatomical, morphological and morphometrical effects of an early tracheal occlusion of the lungs in lambs with CDH and to compare them among those with standard tracheal occlusion and those with normal lungs. Methods: 24 at term fetal lambs were analyzed after distribution in groups of 4 members each: normal lung line: A) Sham; B) Late tracheal occlusion (LTO); C) Early tracheal occlusion (ETO). Line with lungs with CDH created at 65 days of gestation (DOG): D) CDH; E) CDH + LTO; F) CDH + ETO. LTO was created at 105 DOG and ETO at 85 DOG. C-section was carried out at term (130-145 DOG) and lungs and intrapulmonary fluid, among other samples, were extracted. Lungs were preserved by tracheal infusion of formaldehyde and fixed in paraffin. Histologic sections were obtained from the peripheral areas of the left lower lobe. Anatomical, volumetric, histologic morphology and morphometric parameters were used as study variables. Results were statistically analyzed by the following tests: Kruskal-Wallis for comparison among lines and U-Mann-Whitney test for comparison between two groups. Morphometric variables were analyzed by lineal regression model. Results: Presence of CDH caused less pulmonary volume, with less parenchyma and intra-pulmonary fluid compared to normal lungs. Tracheal occlusion increased the size of the lungs, parenchyma, intrapulmonary fluid and air space in both lines, with or without CDH. These parameters were also higher in the ETO compared with LTO. Histology showed a bigger size of the alveoli and alveolar surface proportional to the time of occlusion (LTO or ETO) in both lines of the study. Interstitial tissue by field diminished proportionally with the time of tracheal occlusion. In CDH groups, tracheal occlusion improved maturation in relation with controls. Pneumocyte II population was decreased related to the time of tracheal occlusion. Conclusion: Tracheal occlusion increases the size of the air space and pulmonary parenchyma, improving the maturation state, proportionally to the time of occlusion in the animals with CDH. Human patients with extreme pulmonary hypoplasia due to CDH could beneficiate from an early fetoscopic tracheal occlusion, in early stages of pulmonary development, followed by an elective dis-occlusion to improve the pneumocyte II population and optimize the conditions for a sufficient gas exchange after birth.

[es] Introducción: La oclusión traqueal mediante la colocación fetoscópica de un balón endotraqueal a las 26-29 semanas de gestación constituye el tratamiento estándar de los casos graves de hernia diafragmática congénita (CDH) diagnosticados prenatalmente. Sin embargo, algunos pacientes presentan indicadores prenatales de hipoplasia pulmonar extrema y, a pesar del tratamiento fetoscópico, su tasa de supervivencia es cercana al 0%. Algunos estudios clínicos abogan por una oclusión traqueal en estadíos más precoces del desarrollo embrionario en este tipo de pacientes considerando que los pulmones pueden crecer más y ser aptos para un correcto intercambio gaseoso. El objetivo del presente estudio es evaluar los efectos anatómicos, morfológicos y morfométricos de la oclusión fetal precoz en los pulmones ovinos ocluídos en una fase más temprana del desarrollo pulmonar en sujetos con CDH y compararlos con la oclusión estándar y en presencia de pulmones normales. Materiales y Métodos: 24 fetos a término fueron analizados después de segregarlos por grupos de 4 sujetos cada uno: brazo de pulmón normal: A) sham; B) oclusión tardía (LTO); C) oclusión precoz (ETO); brazo de CDH creada a los 65 días de gestación: D) control CDH; E) CDH + LTO; F) CDH + ETO. La LTO se creó a los 105 días de gestación y la ETO a los 85. Se practicó la cesárea entre los 130 y 145 días de gestación y se extrajeron, entre otras muestras, los pulmones de los animales y el líquido intrapulmonar. Los pulmones eran conservados mediante infusión traqueal con formaldehido, fijados con parafina y seccionados para el estudio histológico para el que se utilizaron secciones periféricas del lóbulo inferior izquierdo. Las variables de estudio comprendían parámetros anatómicos y volumétricos, morfología histológica y datos morfométricos de esta histología. Los resultados fueron analizados estadísticamente mediante los siguientes tests: Kruskal-Wallis para comparación de los brazos, U de Mann-Whitney para comparación de 2 grupos y modelo de regresión lineal para las variables morfométricas. Resultados: La presencia de la CDH condicionó un menor volumen pulmonar, con menos parénquima y menor producción de líquido, en comparación con los pulmones sanos. La oclusión traqueal aumentó el tamaño de los pulmones, la producción de líquido intrapulmonar, el espacio aéreo y el tejido parenquimatoso tanto en animales con como sin CDH. Estos parámetros también fueron superiores en oclusiones tempranas en comparación con las oclusiones tardías. Al microscopio, el tamaño de los alveolos y su superficie alveolar aumentó proporcionalmente con las oclusiones tardías y precoces en los dos brazos del estudio. El tejido intersticial por campo disminuyó también proporcionalmente en relación con los distintos tiempos de oclusión traqueal. En los grupos con CDH el epitelio pulmonar se presentaba más maduro con la oclusión traqueal en relación con los controles. Se observó también una deplección de neumocitos tipo II en relación con el tiempo de oclusión traqueal. Conclusión: La oclusión traqueal incrementa el tamaño del espacio aéreo y del parénquima pulmonar, optimizando la maduración alveolar, en animales con CDH, proporcionalmente al tiempo de oclusión. Los pacientes humanos con CDH e hipoplasia pulmonar extrema se podrían beneficiar de una terapia prenatal más precoz, con oclusión en periodo canalicular del desarrollo pulmonar, seguida de una desoclusión programada para recuperar la población de neumocitos tipo II y optimizar las condiciones para un suficiente intercambio gaseoso.