[en] Candida albicans is the most common human fungal pathogen in humans, mainly in immunocompromised patients. Nowadays, the systemic candidiasis is the most common cause of nosocomial infections, with a 40% of mortality associated. C. albicans is a polymorphic fungus that presents the ability to grow in different cellular morphologies such as: yeast, hyphae and pseudohyphae. The ability of these cells to respond to environmental changes within the human body determines their behaviour as commensals or pathogens. The study of those transcriptional regulators that mediate the responses to these environmental changes in pathogenic fungi is very important. After screening a C. albicans genome database, seventy putative transcriptional factors, matching the Zn(II)2Cys6 motif were found. From those, Cwt1p (IPF3781, orf 19.5849) that presented a high homology with Rds2 from Saccharomyces cerevisiae was selected for further studies. To know the possible role of Cwt1p, the disruption of the coding region was performed and the phenotypes of the heterozygous (CWT1/cwt1) and homozygous (cwt1/cwt1) mutants were studied. Phenotypic analysis shows that Cwt1p is involved in the cell wall architecture and morphogenesis in solid media. Since CWT1 is mainly expressed in the stationary phase of growth, the different assays were performed in both exponential and stationary cells. Using murine models, we have established that the deletion of the two alleles of CWT1 does not attenuate the virulence; however, deletion of only one allele completely attenuates virulence. In order to elucidate the role of CWT1 in cell wall formation and pathogenesis, transcription profiling studies were carried out and data comparison between parental and mutant strains (hetero and homozygous mutants) were achieved in both exponential and stationary phases of growth.

[es] RESUMEN Candida albicans es el principal hongo patógeno en el ser humano, principalmente en pacientes en los que su sistema inmunitario está comprometido. En la actualidad la candidiasis invasiva es la causa más común de infecciones nosocomiales, asociada a una mortalidad del 40%. C. albicans es un hongo polimórfico que presenta la facultad de crecer como levadura, hifa y pseudohifa. Uno de los aspectos por los que C. albicans puede comportarse como comensal o como agente patógeno es su capacidad para responder a los cambios del medio ambiente. Para comprender los mecanismos de adaptación en hongos patógenos a los cambios ambientales continuos dentro del ser humano, es especialmente importante que factores transcripcionales y/o mediadores estén implicados. Mediante un análisis in silico del genoma de C. albicans, se han detectado 70 teóricos factores transcripcionales de la familia Zn(II)2Cys6. Uno de ellos, IPF3781 (a partir de aquí Cwt1), se eligió para su estudio dada la elevada homología que presenta con el factor de transcripción Rds2 de Saccharomyces cerevisiae. Con el objeto de analizar la posible implicación de CWT1 en la biología de C. albicans, se construyó el mutante nulo para este gen. El análisis fenotípico del mutante nulo cwt1/cwt1 indica que Cwt1 está implicado diferentes procesos celulares como son: (i) la arquitectura de la pared celular de C. albicans; (ii) la resistencia a drogas; (iii) la morfogénesis de esta especie celular, sobre todo en medios sólidos; (iv) el metabolismo de azúcares; y (v) la biogénesis de ribosomas. Adicionalmente a los estudios sobre pared celular realizados, se ha estudiado la expresión y regulación, mediante micromatrices de ADN, de diferentes genes en las fases exponencial y estacionaria de la curva de crecimiento con el fin de poder elucidar más feacientemente el papel de Cwt1. Un total de 460 genes en fase exponencial y 666 genes en fase estacionaria tenían alterada su expresión, de los que 121 genes eran comunes a ambas fases de crecimiento de la levadura. Este distinto perfil transcripcional podría explicar el pleiotropismo encontrado en el mutante nulo cwt1/cwt1 respecto al comportamiento de la cepa parental CWT1/CWT1, tanto en fase exponencial como en fase estacionaria de crecimiento. El estudio in silico de las regiones promotoras de los genes cuya expresión estaba alterada indica que las secuencia AGGGCT/AGCCCT podría ser la secuencia de reconocimiento de ADN de Cwt1 para la unión a sus genes diana . Además, estudios de patogenicidad en modelo murino han mostrado que células de las cepas parental y mutante nulo son igual de invasivas ya que penetran al mismo nivel en los órganos de los ratones infectados. Sin embargo, el mutante nulo en el gen CWT1 es totalmente avirulento, indicando que Cwt1 está de algún modo regulando la patogenicidad de C. albicans. Cabe señalar que gran parte del estudio realizado versa sobre la pared celular, dada la importancia que esta estructura tiene en los primeros pasos de una infección, así como para el diseño de nuevos fármacos antifúngicos. No obstante, se puede concluir que Cwt1 actúa como un regulador global de la transcripción, ya que modula la expresión de genes implicados en distintas funciones celulares, ya sea de manera directa o indirecta. __________________________________________________________________________________________________