[en] The pathophysiology of rosacea is currently not well understood, so its treatment is nonspecific. However, recent studies have shown that there is a neurovascular dysregulation in this entity, therefore, there is a need to understand much better the molecular pathways that control permanent vasodilation of small cutaneous vessels (around 200 μm) and inflammation. In summary, the sympathetic system is the primary modulator of the cutaneous vasculature, with a multitude of identified adrenoceptors that include α1, α2, β1 and β2. Dysregulation of the sympathetic nervous system in rosacea has received considerable attention, as has modulation of alpha adrenergic receptors or beta adrenergic blockers that are helpful in some patients. Currently, recently approved therapies for the treatment of rosacea have focused on reducing erythema through vasoconstriction of the cutaneous blood vessels, targeting alpha adrenergic receptors with oxymetazoline (alpha adrenergic receptor 1 agonist, ADRA1) and with brimonidine (alpha 2 adrenergic receptor agonist, ADRA2), although its chronic use may induce typical alpha adrenergic cardiovascular disorders. For this reason, an alternative to ADRA agonists could be covered by ADRB antagonists, since they present a better safety profile and are recommended, although outside the indication card, for the treatment of erythematotelangiectatic rosacea. Although there are some reported cases of the role of ADRB antagonists in reducing rosacea associated flushing, there is currently no formal pharmacological characterization of the role of ADRB antagonists in vasoconstriction. The main objective of this thesis is to determine whether the blockade of β-adrenergic receptors would oppose vasodilation in the skin vessels. Likewise, it is intended to assess the potency of β-adrenergic antagonists (propranolol and timolol) in the vasoconstrictor response to norepinephrine and epinephrine. It is also proposed to analyze the proportion that exists between α and β adrenergic receptors in the skin vessels, which would facilitate understanding the pharmacological responses that could be obtained. For this, perfusion studies have been carried out with microcuts of human skin tissue and in arterial rings in myograph, as well as the analysis of the proportion of the expression of alpha and beta adrenergic receptors in human skin vessels by means of confocal immunofluorescence studies, quantitative PCR real-time and Western blot. The final results obtained reveal that: - Microarteries <200 μm have a lower expression of α1 adrenergic receptors and β1 adrenergic receptors, followed by α2 adrenergic receptors and with a higher expression of β2 adrenergic receptors. - The activation of α2 adrenergic receptors induced by brimonidine in microarteries smaller than 200 μm is greater than in vessels between 500-800 μm. - Contraction of vascular microcirculation induced by norepinephrine is less in vessels smaller than 200 μm than in those with a diameter between 500-800 μm. - With the blockade of α1 adrenergic receptor agonists, vasodilation induced by norepinephrine (as a β2 adrenergic receptor agonist) is greater in vessels smaller than 200 μm. - β2 adrenergic receptor antagonists such as propranolol or timolol inhibit the vasodilator effect of norepinephrine in cutaneous vessels when α1 adrenergic receptors are blocked. Therefore, our final conclusion is that the expression of β2 adrenergic receptors is predominant in microarteries <200 μm compared to other adrenoceptors, having a fundamental role in cutaneous vasodilation. These results may have a potential translational value to provide a rational blockade of β2 adrenergic receptors in the treatment of rosacea.

[es] La rosácea es una entidad cuya fisiopatología no es bien conocida, por lo que su tratamiento es inespecífico. Sin embargo, recientes estudios han demostrado que existe una disregulación neurovascular en esta entidad, por ello, existe una necesidad de comprender mucho mejor las vías moleculares que controlan la vasodilatación permanente de los pequeños vasos cutáneos (alrededor de 200 μm) y la inflamación. A modo de resumen, el sistema simpático es el modulador primario de la vasculatura cutánea, con multitud de adrenorreceptores identificados que incluyen los α1, α2, β1y β2. La disregulación del sistema nervioso simpático en la rosácea ha tenido una considerable atención, como la modulación de los receptores alfa adrenérgicos o los bloqueantes beta adrenérgicos que son de utilidad en algunos pacientes. En la actualidad, terapias recientemente aprobadas para el tratamiento de la rosácea se han centrado en reducir el eritema a través de la vasoconstricción de los vasos cutáneos sanguíneos siendo la diana los receptores alfa adrenérgicos con oximetazolina (receptor adrenérgico alfa 1 agonista, ADRA1) y con brimonidina (receptor adrenérgico alfa 2 agonista, ADRA2), aunque su uso crónico puede inducir alteraciones cardiovasculares típicas alfa adrenérgicas. Por eso, una alternativa a los agonistas ADRA podría ser cubierta por los antagonistas ADRB, ya que presentan un mejor perfil en seguridad y recomendados, aunque fuera de ficha de indicación, para el tratamiento de la rosácea eritematotelangiectásica. Si bien existen algunos casos descritos del papel de los antagonistas ADRB disminuyendo el rubor asociado la rosácea, actualmente no hay una caracterización farmacológica formal del papel de los antagonistas ADRB en la vasoconstricción. El objetivo principal de esta tesis es determinar si el bloqueo de los receptores β-adrenérgicos se opondría a la vasodilatación en los vasos de la piel. Así mismo, se pretende valorar la potencia de antagonistas β-adrenérgicos (propranolol y timolol) en la respuesta vasoconstrictora a la norepinefrina y adrenalina. También se propone analizar la proporción que existe entre los receptores adrenérgicos α y β en los vasos de la piel, lo que facilitaría comprender las respuestas farmacológicas que se pudieran obtener. Para ello, se han realizado estudios de perfusión con microcortes de tejido cutáneo humano y en anillos arteriales en miógrafo así como el análisis de la proporción de la expresión de los receptores alfa y beta adrenérgicos en vasos cutáneos humanos mediante estudios de inmunofluorescencia confocal, PCR cuantitativa a tiempo real y Western blot. Los resultados finales obtenidos revelan que: - Las microarterias <200 μm tienen una menor expresión de receptores adrenérgicos α1 y receptores adrenérgicos β1, seguido por receptores adrenérgicos α2 y con una mayor expresión de receptores adrenérgicos β2. - La activación de receptores adrenérgicos α2 inducida por la brimonidina en las microarterias menores de 200 μm es mayor que en los vasos entre 500-800 μm. - La contracción de la microcirculación vascular inducida por norepinefrina es menor en los vasos menores de 200 μm que en los de diámetro comprendido entre 500-800 μm. - Con el bloqueo de los agonistas de los receptores adrenérgicos α1, la vasodilatación inducida por norepinefrina (como agonista de los receptores adrenérgicos β2) es mayor en los vasos menores de 200 μm. - Los antagonistas de los receptores adrenérgicos β2 como propranolol o timolol inhiben el efecto vasodilatador de la norepinefrina en los vasos cutáneos cuando se bloquean los receptores adrenérgicos α1. Por tanto, nuestra conclusión final es que la expresión de los receptores adrenérgicos β2 es predominante en las microarterias <200 μm comparado con otros adrenorreceptores, teniendo un papel fundamental en la vasodilatación cutánea. Estos resultados pueden tener un valor potencial traslacional para proveer un bloqueo racional de los receptores adrenérgicos β2 en el tratamiento de la rosácea