[ca] L'apoptosi pot ser induïda a través de nombrosos estímuls, entre els quals hi ha els receptors de mort. Per induir apoptosi TNF&#945; necessita la participació d'inhibidors de la transcripció d'ARN o de la síntesi proteica, com són ActD i CHX. En aquest estudi demostrem com la citotoxicitat de TNF&#945; en cèl·lules PC12 i en neurones corticals sensibilitzades amb ActD es dóna a través de l'activació de la caspasa iniciadora 8, de la generació de tBid i de la conseqüent activació de les pro-caspases-9 i -3. A més, el tractament amb TNF&#945;/ActD no indueix diferències detectables en l'expressió de proteïnes involucrades en el complex de senyalització de TNF&#945;. L'anàlisi de les principals proteïnes antiapoptòtiques, com són FLIP, IAPs i els membres de la família de Bcl-2, demostra que Bcl-xL endogen és capaç de regular l'apoptosi induïda per TNF&#945;, sense afectar l'activació de la via del factor de transcripció NF-&#954;B. La sobreexpressió de Bcl-xL dóna resistència a la mort promoguda per TNF&#945; i ActD, i la reducció dels seus nivells indueix mort cel·lular per mitjà de TNF&#945;, a través de l'activació de JNK. Per confirmar la rellevància de Bcl-xL en el senyal promogut per TNF&#945;, es va avaluar l'efecte de la reducció dels nivells basals de proteïnes antiapoptòtiques com Bcl-2, Bcl-xL, Bcl-w i Mcl-1, en el model cel·lular HeLa, on aquestes s'hi troben expressades de forma fisiològica, contràriament al que passa en les cèl·lules PC12, demostrant que Bcl-xL és la proteïna antiapoptòtica més rellevant en la protecció de la mort induïda per TNF&#945;. Per altra banda, l'apoptosi induïda per TNF&#945; pot ser deguda a l'acumulació d'elevats nivells de hemo lliure. El grup hemo sensibilitza les cèl·lules Hepa a l'acció citotòxica de TNF&#945; a través de la inducció d'estrès oxidatiu, que provoca un dany cel·lular que porta a l'activació de la via de JNK y de pro-caspasa-3. La producció de ROS i el dany induït per estrès oxidatiu, així com la mort induïda per TNF&#945;, conjuntament amb elevats nivells del grup hemo lliure, poden inhibir-se amb l'expressió de proteïnes protectores com HO-1 y H-Ferritina.

[en] Apoptotic cell death is triggered by several different stimuli, among which death receptors. To induce apoptosis, TNF&#945; needs the cooperation of RNA transcription or protein synthesis inhibitor, i.e. ActD and CHX. In this study we demonstrate that ActD renders rat PC12 cells and primary mouse cortical neurons susceptible to the cytotoxic effect of TNF&#945; by the activation of the initiator caspase 8, generation of tBid and activation of pro-caspase-9 and -3. Proteins involved in TNF&#945; receptor signaling complex are not affected by TNF&#945;/ActD stimulation. However, the analysis of antiapoptotic proteins, e.g. FLIP, IAPs and Bcl-2 family members, demonstrates that Bcl-xL is the endogenous regulator of neuronal sensitivity to TNF&#945;-induced apoptosis and that it operates in a NF-&#954;B-independent manner. Bcl-xL overexpression completely protects against TNF&#945;/ActD-induced apoptosis, whereas its endogenous decrease sensitizes to TNF&#945; cytotoxic effect promoting JNK-dependent cell death. To point out the relevance of Bcl-xL in TNF&#945; signaling pathway, endogenous decrease of the main anti-apoptotic Bcl-2 family members, e.g. Bcl-2, Bcl-xL, Bcl-w and Mcl-1, was performed in HeLa cell line in which, contrarily to PC12, these proteins are expressed. The results obtained demonstrate that Bcl-xL is the most important Bcl-2-cytoprotective protein in regulating TNF&#945; cytotoxicity. Moreover, TNF&#945;-induced cell death is promoted by high levels of free heme accumulation. Heme sensitizes Hepa cell line to TNF&#945;-triggered apoptosis enhancing ROS production and ROS-mediated damage. This results in JNK and pro-caspase-3 activation. Oxidative stress-promoted apoptosis induced by heme/TNF&#945; treatment is inhibited by the overexpression of HO-1 and H-Ferritin cytoprotective proteins.