[en] Nutrition plays an important role in modulating livestock species immunity. This thesis aimed at evaluating the effects of different dietary molecules on mammalian and avian immunity. In vitro functional analyses, and proteomics and miRNAomics were implemented for an integral characterization of the molecules' impact on the animals' immune response. In this thesis the in vitro impact of the n-6 conjugated linoleic acid (CLA), citrus pectin (CP), and porcine milk exosomes and n-3 polyunsaturated fatty acids (PUFA) on bovine, chicken and porcine mononuclear cells immune response was evaluated, respectively. In the first study, the in vitro activity of CLA on bovine monocytes apoptosis and immune activities, including chemotaxis, phagocytosis, killing capability, and extracellular reactive oxygen species (ROS) production was assessed. Anti-apoptotic effects and an increase in extracellular ROS production during experimental pro-inflammatory conditions were observed, only when using the mixture of the two main isomers of CLA in equal proportions (50:50). The results demonstrated for the first time that CLA does have immunomodulatory effects on some functions of bovine monocytes in vitro and that the CLA (50:50) mixture is more effective than the CLA isomers individually. The proteomics analysis performed on bovine peripheral blood mononuclear cells (PBMC) revealed that CLA (50:50) mixture does modulate bovine PBMC proteome, supporting the antiapoptotic and immunomodulatory effects observed in the previous in vitro study on bovine monocytes, and propose a potential cytoprotective role of CLA (50:50) mixture against oxidative stress. In the second study, the in vitro activity of CP on chicken monocytes viability, apoptosis, chemotaxis and phagocytosis was assessed. The study demonstrated for the first time that CP inhibits monocytes' chemotaxis and phagocytosis in vitro, suggesting a potential anti-inflammatory activity. The proteomics analysis on chicken PBMC provided a proteomics background to the anti-inflammatory activity of CP, demonstrating that the in vitro reduction of phagocytosis and chemotaxis is associated with changes in proteins related to the actin cytoskeleton. In the third study, the in vitro activity of porcine milk exosomes on porcine monocytes viability, apoptosis, chemotaxis, phagocytosis, killing capability and extracellular ROS production was assessed. Milk exosomes were purified from sows' milk and characterized using their size, concentration, morphology, and exosome protein markers. This study reported for the first time that porcine milk exosomes can be internalized by porcine monocytes in vitro and that they can modulate the cell's immune response, by decreasing their chemotaxis and phagocytosis; and increasing their ROS production under resting and pro-inflammatory conditions. The proteomics analysis on porcine PBMC demonstrated for the first time that porcine milk exosomes can modulate porcine PBMC proteome in vitro. Moreover, the gene ontology functional analyses revealed that porcine milk exosomes enrich biological processes related to innate immune-related processes and exosome uptake processes, supporting the immunomodulatory effects and the exosome internalization observed in the previous in vitro study. Lastly, the in vitro activity of the n-3 PUFA, docosahexaenoic acid (DHA) and eicosapentaenoic acid (EPA), on porcine monocytes viability, apoptosis, chemotaxis, phagocytosis, and ROS production was assessed. The results of the study showed that DHA and EPA at the highest concentration decreased porcine monocytes' viability. It was also reported for the first time that DHA and EPA can exert differential in vitro immunomodulatory effects in pigs, by dampening monocytes' chemotaxis and potentiating their intracellular oxidative burst, respectively. The proteomics and miRNAomics analyses were not performed for this study. Instead, a first glance on the results from the bioinformatic analyses of the miRNAomics data of all the rest of the studies is presented. In conclusion, a phenotypical and molecular characterization of the in vitro impact of these dietary molecules on bovine, porcine and chicken immune responses was provided.

[es] La nutrición desempeña un papel importante en la modulación de la inmunidad de las especies ganaderas. El objetivo de esta tesis es evaluar los efectos de diferentes moléculas dietéticas sobre la inmunidad de mamíferos y aves. Se implementaron análisis funcionales in vitro, y proteómica y miRNAómica para una caracterización integral del impacto de las moléculas en la respuesta inmune de los animales. Específicamente se evaluó el impacto in vitro del ácido linoleico conjugado (CLA) n-6, la pectina cítrica (CP) y los exosomas de leche porcina y los ácidos grasos poliinsaturados (PUFA) n-3 sobre la respuesta inmune de las células mononucleares bovinas, de pollo y porcinas, respectivamente. Primero, se evaluó la actividad in vitro del CLA sobre la apoptosis, quimiotaxis, fagocitosis, capacidad de matar y producción de especies reactivas de oxígeno (ROS) extracelulares de los monocitos bovinos. Se observaron efectos anti-apoptóticos y un aumento de la producción extracelular de ROS durante condiciones pro-inflamatorias experimentales, sólo cuando se utilizó la mezcla de los dos isómeros principales de CLA en proporciones iguales (50:50). Los resultados demostraron que el CLA tiene efectos inmunomoduladores sobre algunas funciones de los monocitos bovinos in vitro y que la mezcla de CLA (50:50) es más eficaz que los isómeros de CLA por separado. El análisis proteómico realizado en células mononucleares de sangre periférica bovina (PBMC) reveló que la mezcla de CLA (50:50) modula el proteoma de las PBMC bovinas, respaldando los efectos anti-apoptóticos e inmunomoduladores observados en el estudio in vitro anterior en monocitos bovinos, y proponiendo un potencial papel cito protector de la mezcla de CLA (50:50) contra el estrés oxidativo. Segundo, se evaluó la actividad in vitro de CP sobre la viabilidad, apoptosis, quimiotaxis y fagocitosis de los monocitos de pollo. El estudio demostró que CP inhibe la quimiotaxis y fagocitosis de los monocitos in vitro, sugiriendo una potencial actividad anti-inflamatoria. El análisis proteómico en PBMC de pollo proporcionó un trasfondo proteómico a la actividad anti-inflamatoria de CP, demostrando que la reducción in vitro de la fagocitosis y quimiotaxis está asociada a cambios en las proteínas relacionadas con el citoesqueleto de actina. Tercero, se evaluó la actividad in vitro de los exosomas de leche porcina sobre la viabilidad, apoptosis, quimiotaxis, fagocitosis, capacidad de matar y producción extracelular de ROS de los monocitos porcinos. Este estudio demostró que los exosomas de leche porcina pueden ser internalizados por monocitos porcinos in vitro y que pueden modular la respuesta inmune de la célula, disminuyendo su quimiotaxis y fagocitosis; y aumentando su producción de ROS en condiciones de reposo y pro-inflamatorias. El análisis proteómico de las PBMC porcinas demostró que los exosomas de leche porcina pueden modular el proteoma de las PBMC porcinas in vitro, enriqueciendo los procesos biológicos relacionados con la inmunidad innata y los procesos de captación de exosomas, respaldando los efectos inmunomoduladores y la internalización de exosomas observados en el estudio in vitro anterior. Cuarto, se evaluó la actividad in vitro de los PUFA n-3, el ácido docosahexaenoico (DHA) y ácido eicosapentaenoico (EPA), sobre la viabilidad, apoptosis, quimiotaxis, fagocitosis y producción de ROS de los monocitos porcinos. Los resultados del estudio mostraron que DHA y EPA pueden ejercer efectos inmunomoduladores diferenciales in vitro en cerdos, al disminuir la quimiotaxis de los monocitos y potenciar su explosión oxidativa intracelular, respectivamente. Por último, se presenta un primer vistazo a los resultados de los análisis bioinformáticos de los datos de la miRNAómica del resto de los estudios. En conclusión, en esta tesis se proporcionó una caracterización fenotípica y molecular del impacto in vitro de estas moléculas dietéticas en las respuestas inmunitarias de bovinos, porcinos y pollos.