[en] Chapter One Inflammatory bowel disease (IBD) is characterized by chronic inflammation in the gastrointestinal tract and represents an important risk factor for the onset of colorectal cancer (CRC). Hakai is an E3 ubiquitin-ligase involved in tumour progression and metastasis of carcinomas through the degradation of E-cadherin. The loss of E-cadherin is the hallmark of EMT, a key process at early stages of carcinoma progression. In this work we investigated the expression of Hakai in all the different stages of CRC as well as its potential role in IBD. Our results show that Hakai is a potential biomarker for CRC progression and its expression is increased even at early TNM-stages of tumorigenesis. Interactome analysis of Hakai in CRC cells allowed us to identify a novel Hakai-interacting protein named FASN, a protein reported to be associated to IBD. We described that Hakai increases FASN ubiquitination and degradation, resulting in the regulation of FASN-mediated lipid accumulation. Moreover, we showed that Hakai is downregulated in inflammatory tissues by using different IBD mice models and that IFN-γ downregulates Hakai expression in CRC cells. Our findings open a new research field to better understand the mechanisms involved in intestinal inflammation and cancer bowel disease. Chapter Two CRC is one of leading causes of mortality in western countries and new strategies are required for its treatment. Natural products comprise a vast diversity of biologically active substances with high therapeutic potential including compounds widely used in anticancer chemotherapy. Polysaccharide-rich extracts from fungal origin, for example, have proven their antitumoral effects in different previous studies. In the present study, we aim to evaluate the possible antitumor effect on CRC cells of a series of fungal polysaccharide-rich extracts, obtained from autochthonous fungi of Galicia. We identified two extracts from Trametes versicolor (TV) and Grifola frondosa (GF) which exhibited inhibition of human colon cancer cell proliferation and induced cytotoxicity. Furthermore, both fungal extracts significantly inhibited oncogenic potential, cell migration and invasion in CRC cells as well as increased E-Cadherin expression and reduced metalloproteinase activity. Finally, our results also showed that the combination of the extracts with one the most clinical used agents for colorectal cancer, 5-fluorouracil, increases cell cytotoxicity, opening the door to further research for the use of fungal extracts as adjuvant treatment in cancer.

[es] Capítulo uno La enfermedad inflamatoria intestinal (EII) se caracteriza por una inflamación crónica del tracto gastrointestinal y representa un factor de riesgo importante para el desarrollo del cáncer colorrectal (CCR). Hakai es una E3 ubiquitina-ligasa involucrada en la progresión tumoral y metástasis de carcinomas a través de la degradación de E-cadherina. La pérdida de E-cadherina es el sello distintivo de la EMT, un proceso clave en las etapas más tempranas de la progresión de los carcinomas. En este trabajo se investiga la expresión de Hakai en todos los diferentes estadios del CCR, así como su potencial papel en la EII. Los resultados muestran que Hakai es un potencial biomarcador de la progresión del CCR con una expresión aumentada incluso en las primeras etapas de la carcinogénesis. El análisis del interactoma de Hakai en células de CCR permitió identificar una nueva proteína que interactúa con Hakai, FASN, una proteína asociada con el desarrollo de la EII. En este trabajo se describe que Hakai aumenta la ubiquitinación y degradación de FASN, ocasionado la regulación de la acumulación de lípidos mediada por FASN. Además, se demuestra que Hakai está regulado negativamente en los tejidos inflamatorios de diferentes modelos animales de EII y que IFN-γ regula negativamente la expresión de Hakai en células CCR. Nuestros hallazgos abren un nuevo campo de investigación para comprender mejor los mecanismos involucrados en la inflamación y el cáncer intestinales. Capitulo dos El CCR es una de las principales causas de mortalidad en los países occidentales y se requieren nuevas estrategias para su tratamiento. Los productos naturales comprenden una gran diversidad de sustancias biológicamente activas con un alto potencial terapéutico, incluidos compuestos ampliamente utilizados en la quimioterapia contra el cáncer. Los extractos ricos en polisacáridos de origen fúngico, por ejemplo, han demostrado sus efectos antitumorales en diferentes estudios previos. En el presente trabajo pretendemos evaluar el posible efecto antitumoral sobre las células de CCR de una serie de extractos fúngicos ricos en polisacáridos, obtenidos de hongos autóctonos de Galicia. Se identificaron dos extractos de Trametes versicolor (TV) y Grifola frondosa (GF) con capacidad citotóxica y de inhibición de la proliferación de células de CCR. Además, ambos extractos fueron capaces de inhibir significativamente el potencial oncogénico, la migración celular y la invasión en las células CRC, así como elevar los niveles de expresión de E-Cadherina y reducir la actividad de las metaloproteinasas. Finalmente, nuestros resultados también muestran que la combinación de los extractos con uno de los agentes más utilizados en la clínica para el cáncer colorrectal, el 5-fluorouracilo, aumenta la citotoxicidad celular, abriendo la puerta a nuevas investigaciones para el uso de extractos de hongos como tratamiento adyuvante en el cáncer.