[en] Carcinoma is the most common type of cancer, and arises from the malignant transformation of epithelial cells. At the early stages of carcinoma progression, a process known as epithelialmesenchymal transition (EMT) takes place. EMT is characterized by the downregulation of Ecadherin, a tumour suppressor responsible for cell adhesion in the epithelium. The E3 ubiquitinligase Hakai was the first reported posttranslational regulator of the E-cadherin stability, and its importance during tumour progression and disease has been widely demonstrated. E3 ubiquitinligase enzymes have recently emerged as promising therapeutic targets, as their specific inhibition would avoid wider side effects compared to other members of the ubiquitin pathway. EMT has also been associated with other aspects of tumour progression, such as the acquisition of therapeutic resistance or the development of cancer stem cells (CSCs). The aims of this project were the identification and validation of a small-molecule inhibitor for the E3 ubiquitin-ligase Hakai, and the study of the involvement of Hakai in the acquisition CSC properties and other aspects of tumour progression. Results showed that Hakai inhibitor (Hakin-1) reduced Hakaidependent ubiquitination of E-cadherin, showing an important antitumor effect both in vitro and in vivo, therefore being a promising therapeutic agent for cancer treatment through the inhibition of EMT. On the other hand, Hakai may play a role in the development of CSCs, opening a new research field to overcome therapeutic resistance.

[es] El carcinoma es el tipo más frecuente de cáncer, y surge de la transformación maligna de las células epiteliales. Durante las etapas tempranas de la progresión tumoral, tiene lugar un proceso conocido como transición epitelio-mesénquima (TEM). La TEM se caracteriza por una expresión disminuida de la E-cadherina, un supresor tumoral responsable de los contactos célula-célula en el epitelio. La E3 ubiquitina-ligasa Hakai fue el primer regulador postraduccional descrito de la E-cadherina, y su importancia durante la progresión tumoral ha sido ampliamente descrita. En los últimos años, las enzimas E3 ubiquitina-ligasas han cobrado importancia como dianas terapéuticas, ya que su inhibición específica evitaría efectos secundarios más amplios en comparación con otros miembros de la vía ubiquitina-proteasoma. Además, la TEM se ha asociado con otros aspectos de la progresión tumoral, tales como el desarrollo de resistencia a fármacos o la adquisición de propiedades de célula madre tumoral (CSC). Los objetivos del presente proyecto fueron la identificación y validación de un inhibidor de pequeña molécula de la E3 ubiquitina-ligasa Hakai, y el estudio del papel de Hakai en la adquisición de propiedades de CSC y otros aspectos de la progresión tumoral. Los resultados obtenidos mostraron que el inhibidor de Hakai (Hakin-1) no solo reduce la ubiquitinización de E-cadherina mediada por Hakai, sino que además muestra un importante efecto antitumoral tanto in vitro como in vivo, siendo por tanto un prometedor agente terapéutico para el tratamiento del cáncer mediante la inhibición de la TEM. Por otro lado, Hakai podría estar implicado en el desarrollo de CSCs, lo que abre una nueva vía de estudio para superar la resistencia a fármacos.