[en] This PhD thesis has concentrated on the investigation of the function of the Schizosaccharomyces pombe phosphatase Flp1p (also known as Clp1p), member of the Cdc14 family, in checkpoint response to replication stress and DNA damage. The behaviour of flp1 mutants in response to DNA stress was compared to that of wt strains by means of different biochemical and genetical analyses including a high-throughput analysis of their specific transcriptional response to replication stress. In addition, a mathematical model of the replication checkpoint in S. pombe has been developed in the framework of this thesis in collaboration with the Computational Systems Biology Group of the Max Planck Institute for Molecular Genetics of Berlin, Germany.This study has revealed the close interplay of Flp1p and Cds1p (main effector of the replication checkpoint) under replication stress and has described for the first time the implication of Flp1p in the replication checkpoint signalling cascade. Cellular response to replication stress triggers localization of Flp1p to the nucleus, most probably by direct phosphorylation of the phosphatase by Cds1p. On the other hand, Cds1p activity in response to replication stress is reduced in cells deleted for flp1. Altered protein levels of Flp1p or mislocalization results in deregulation of checkpoint response to replication stress, such as loss of efficiency in cell cycle block or accumulation of recombination foci. All these evidences point to an implication of Flp1p in an (auto-) regulatory mechanism to achieve the adequate degree of checkpoint activation necessary for a proficient cellular response to replication stress.

[es] El estudio presentado en esta Tesis Doctoral se centra en la investigaci?n de la funci?n de la fosfatasa Flp1p de Schizosaccharomyces pombe (tambi?n conocida como Clp1p), perteneciente a la familia Cdc14, en los mecanismos de vigilancia celular, especialmente en la cascada de se?alizaci?n en respuesta al estr?s replicativo y al da?o en el DNA. Para ello se llevaron a cabo an?lisis gen?ticos y bioqu?micos comparados de las mencionadas respuestas en cepas silvestres y mutadas para flp1, as? como estudios de la expresi?n g?nica en respuesta a estr?s. En el marco de esta tesis se est? desarrollando as? mismo un modelo matem?tico del checkpoint de replicaci?n en colaboraci?n con el grupo de Biolog?a Computacional de Sistemas del Instituto Max Planck de Gen?tica Molecular de Berl?n, Alemania.En esta Tesis Doctoral se ha demostrado la estrecha relaci?n de Flp1p de S. pombe, con la quinasa Cds1p (principal efector del checkpoint de replicaci?n) en situaciones de estr?s replicativo y se describe por primera vez la implicaci?n de Flp1p en el checkpoint de replicaci?n. La respuesta celular a estr?s replicativo produce la salida de Flp1p al n?cleo, muy probablemente por medio de fosforilaci?n directa de la fosfatasa por Cds1p. Por otra parte la actividad de Cds1p en respuesta al checkpoint se ve reducida en c?lulas delecionadas para Flp1p. La alteraci?n de los niveles proteicos de Flp1p o de su localizaci?n resulta en la desregulaci?n de la respuesta a estr?s, produci?ndose efectos como p?rdida de eficiencia en el bloqueo de la progresi?n celular o la aparici?n de focos de recombinaci?n. Todas estas evidencias apuntan a que Flp1p participa en la (auto-) regulaci?n del grado de activaci?n del checkpoint de replicaci?n necesario para una respuesta celular adecuada en situaciones de estr?s replicativo.