[ca] La forma, qualitat i maduració del fruit són característiques importants en meló (Cucumis melo L.). Com que el meló posseeix una gran diversitat fenotípica, incloent tant varietats climatèriques i com no climatèriques, és un subjecte adequat per a l'estudi d'aquests trets. Amb l'objectiu d'identificar gens candidats de trets agronòmics importants en el meló, s'han iniciat diversos projectes per a localitzar quantitative trait loci (QTL) utilitzant poblacions de mapeig. Entre ells, s'han identificat dos QTL importants, FSQS8.1 i ETHQV8.1, per la forma i la maduració del fruit, respectivament. El gen candidat per FSQS8.1 és l'OVATE FACTOR PROTEIN (OFP1) i per a ETHQV8.1, l'ETHYLENE RESPONSIVE TRANSCRIPTION FACTOR (ERF024). CRISPR/Cas9 és un mètode punter d'edició genètica que podria ser una eina potent per ajudar a validar la funció de gens identificats. Amb aquesta finalitat en el laboratori s'havien generat DNAs recombinants que contenien gen Cas9 juntament amb un ARN guia específic per a cada gen. Aquests DNAs recombinants es van introduir en Agrobacterium tumefaciens i amb aquest es van transformar cotiledons de llavors de meló, dels quals es van regenerar plantes mitjançant cultiu in vitro. L'objectiu era obtenir plantes amb una mutació knock-out en aquests gens. Els fruits d'aquestes plantes s'autofecundaran per a obtenir mutacions en homozigosi i després es fenotiparan per a comprendre la funció dels gens candidats. Durant aquest treball, es van obtenir amb èxit plantes editades amb CRISPR/Cas9. Algunes eren edicions bial·lèliques que estalviarien els esforços necessaris per obtenir un individu amb dos al·lels eliminats. No obstant això, el cultiu de teixits i la transformació amb Agrobacterium van presentar complicacions. Sis de les vuit transformacions no van tenir èxit. La principal problemàtica va ser la infecció d'una bacteri endogen. Les dues transformacions que van donar lloc a plantes editades només ho van fer després de d'entre 6 a 10 mesos de cultiu de calls. A més, totes les plantes obtingudes fins ara han sigut tetraploides, un problema comú en el cultiu de teixits de meló. Encara que CRISPR/Cas9 segueix sent una eina prometedora per a la investigació en meló, els mètodes de cultiu de teixits i transformació amb Agrobacterium s'han d'optimitzar i les dificultats del protocol d'edició CRISPR/cas s'han d'estudiar per resoldre-les.

[en] Fruit shape, quality and ripening are important traits in melon (Cucumis melo L.). As melon displays a vast diversity and even climacteric and non-climacteric varieties coexist, it is a suitable model for the study of these traits. To identify candidate genes for important agronomic traits in melon, several projects to locate quantitative trait loci (QTL) using mapping populations have been performed. Among them, two majors QTLs, FSQS8.1 and ETHQV8.1, have been identified for fruit shape and ripening respectively. The candidate gene for FSQS8.1 is an ovate protein factor (OFP1) and for ETHQV8.1 is an ethylene responsive transcription factor (ERF024). CRISPR/Cas9, a novel genetic edition tool, will help to validate the function of identified genes. Therefore, we transferred the Cas9 gene along with a guide RNA specific for each gene via Agrobacterium and regenerated plants through tissue culture. The objective was to produce plants with a knock out mutation in the target genes. The fruits of these plants will be selfed to obtain mutations in homozygosis, then phenotyped to understand the function of the candidate genes. During this work we successfully produced transgenics and CRISPR/Cas9 edited plants. Some were biallelic editions that would save the efforts needed to obtain an individual with both alleles knocked out. However, tissue culture and the Agrobacterium transformation proved to be challenging. Six out of eight transformations were unsuccessful. Failure causes were mostly due to infection from an endogenous bacteria. The two transformations that produced plants only did so after 6 to 10 months of calli culture. Further, all plants obtained so far were tetraploid, a common issue in melon tissue culture. Though CRISPR/Cas9 remains a promising tool for research in melon, tissue culture and Agrobacterium transformation methods need to be improved and the difficulties of the protocol need to be studied.