[en] In agriculture, one of the main responsible of many plant disease and crop losses are plant viruses. The cucumber mosaic virus (CMV) is one of the most important plant pathogens in nature being able to infect a wide range of plant species. Melon is not an exception, it is susceptible to CMV infection, but a gene called cmv1 can confer resistance to at least CMV LS strain avoiding the plant systemic infection. Recently, the investigations of the Centre for Research in Agricultural Genomics (CRAG) have discovered a protein that interacts with the movement proteins (MP) of the CMV. This protein called Niemann Pick C1 (NPC1) could be the key to avoid or control the movement of the CMV from cell to cell in melon. NPC1 also presents an isoform called NPC1-2, which is expressed in less quantities during an infection but it may also play a role in the cell-to-cell movement. The main objective of this project is to verify if there is an interaction between the NPC1-2 and the MP of the CMV LS and FNY strains. In order to do it, first of all NPC1-2 interactor domain was amplified and then it was cloned using the Gateway cloning method. Plasmids were extracted from the generated clones and they were used to transform Agrobacterium tumefaciens, with them a transient expression in Nicotiana benthamiana was performed in order to test the interaction using the Bimolecular Fluorescence complementation (BiFC) technique. In the end, the BiFC showed that there is a positive interaction between the NPC1-2 and the MP of CMV (LS and FNY), most of them takes place near the plasmodesmata.

[es] En la agricultura, uno de los principales responsables de muchas enfermedades de los vegetales y de pérdidas de cosechas son los virus de las plantas. El virus del mosaico del pepino (CMV) es uno de los patógenos vegetales más importantes de la naturaleza, capaz de infectar a una amplia gama de especias vegetales. El melón no es una excepción, este es susceptible a la infección por CMV, pero un gen llamado cmv1 puede conferir resistencia por lo menos a la cepa CMV LS evitando la infección sistémica de la planta. Recientemente, las investigaciones del Centro de Investigación en Agrigenómica (CRAG) han descubierto una proteína que interacciona con las proteínas de movimiento (MP) del CMV. Esta proteína denominada Niemann Pick C1 (NPC1) podría ser la clave para evitar o controlar el movimiento del CMV de célula a célula en el caso del melón. La NPC1 también presenta una isoforma denominada NPC1-2, cuya expresión es menor durante una infección, pero que también podría desempeñar un papel en el movimiento célula a célula. El objetivo principal de este proyecto es verificar si hay interacción entre la NPC1-2 y las MP de CMV de las cepas LS y FNY. Para ello, en primer lugar, se amplificó el dominio de interacción de la NPC1- 2 y después se clonó utilizando el método Gateway cloning. Los plásmidos que fueron extraídos de los clones generados i fueron usados para transformar Agrobacterium tumefaciens, con estos se llevó a cabo la expresión transitoria en Nicotiana benthamiana para comprobar la interacción mediante la técnica de la Complementación Bimolecular Fluorescente (BiFC). Finalmente, el BiFC demostró que existe una interacción positiva entre la NPC1-2 y las MP de CMV (LS y FNY), que en su mayoría tienen lugar cerca de los plasmodesmos.