[en] This PhD was focused in provide advances in the diagnosis and monitoring of canine leishmaniasis from a laboratory point of view. Therefore, it has the following objectives: - To advance in the use of acute phase proteins (APPs) for the classification and monitoring of the disease. For this purpose, we developed a guideline about the use of APPs for the characterization and management of canine leishmaniasis. Then we compared this guideline with the Leishvet and Canine Leishmaniosis Working Group (CLWG) classifications. Finally, we described how other diseases such as pyometra, pancreatitis or obesity have a totally different pattern of change in APPs compared to canine leishmaniosis. - To apply new biomarkers of kidney damage in canine leishmaniosis (CanL) that help monitor kidney during the treatment of canine leishmaniasis and that could provide information on the response to treatment. For this, various markers of glomerular and tubular damage such as urinary IgG/creatinine have been measured and compared. - To advance in the use of saliva, as a non-invasive sample in this disease. For this purpose we validated and used saliva, for the determination of urea and creatinine in dogs with canine leishmaniosis. - To detect new biomarkers of this disease by the use of proteomic techniques that are very sensitive to detect proteins and could provide a detailed global analysis of expressed proteins in serum of dog before and after treatment. For this, use the Tandem Mass Tag (TMT) isobaric label-based proteomic approach. The conclusions that have been obtained in this doctoral thesis are: 1. APPs concentration can be a useful clinical tool to characterize and manage CanL. The classification system based on the APP created in this PhD correlated with previous classifications systems based in clinical signs and other laboratory analysis. 2. Ferritin and CRP show a particular profile in canine leishmaniosis with a moderate increase in CRP and a higher increase in fold in ferritin that in CRP, which is different than other diseases such as pancreatitis, pyometra or obesity. In addition, ferritin and CRP were useful to monitor the treatment of leishmaniosis. 3. Urinary IgG/creatinine showed a higher accuracy to monitor the kidney disease during the treatment of canine leishmaniosis in dogs with proteinuria than sSDMA or sCre. 4. Urea and creatinine can be measured in saliva of dogs and are increased in chronic renal failure produced by leishmaniosis. 5. TMT isobaric labels could be used to identify new biomolecules that allow a better understanding of the physiopatological mechanism involved in canine leishmaniasis and also that could be potentially used as a biomarker of this disease.

[es] Esta tesis doctoral estuvo enfocada a aportar avances en el diagnóstico y seguimiento de la leishmaniasis canina desde un punto de vista de laboratorio. Por tanto, tiene los siguientes objetivos: - Avanzar en el uso de proteínas de fase aguda (PFA) para la clasificación y seguimiento de la enfermedad. Para ello, desarrollamos una guía sobre el uso de PFA para la caracterización y manejo de la leishmaniasis canina. Luego comparamos esta guía con las clasificaciones de Leishvet y Canine Leishmaniosis Working Group (CLWG). Finalmente, describimos cómo otras enfermedades como la piómetra, la pancreatitis o la obesidad tienen un patrón de cambio en las PFA totalmente diferente al de la leishmaniosis - Aplicar nuevos biomarcadores de daño renal en leishmaniosis canina (CanL) que ayuden a monitorizar el riñón durante el tratamiento de la leishmaniosis canina y que puedan aportar información sobre la respuesta al tratamiento. Para ello se han medido y comparado diversos marcadores de daño glomerular y tubular como el ratio IgG/creatinina en orina. - Avanzar en el uso de la saliva, como muestra no invasiva en esta enfermedad. Para ello validamos y utilizamos saliva, para la determinación de urea y creatinina en perros con leishmaniosis canina. - Detectar nuevos biomarcadores de esta enfermedad mediante el uso de técnicas proteómicas que sean muy sensibles para detectar proteínas y puedan proporcionar un análisis global detallado de las proteínas expresadas en suero de perro antes y después del tratamiento. Para ello, utilice el enfoque proteómico basado en marcaje isobárico de masas en grupo. Las conclusiones que se han obtenido en esta tesis doctoral son: 1. La concentración de PFA puede ser una herramienta clínica útil para caracterizar y gestionar CanL. El sistema de clasificación basado en la PFA creada en este doctorado se correlacionaba con sistemas de clasificación anteriores basados en signos clínicos y otros análisis de laboratorio. 2. La ferritina y la CRP muestran un perfil particular en la leishmaniosis canina con un aumento moderado de la CRP y un aumento mayor de la ferritina que de la CRP, a diferencia de otras enfermedades como la pancreatitis, la piómetra o la obesidad. Además, la ferritina y la CRP fueron útiles para controlar el tratamiento de la leishmaniosis. 3. El ratio IgG/creatinina urinario mostró una mayor precisión para monitorear la enfermedad renal durante el tratamiento de la leishmaniosis canina en perros con proteinuria que sSDMA o sCre. 4. La urea y la creatinina se pueden medir en la saliva de los perros y están aumentadas en la insuficiencia renal crónica producida por la leishmaniosis. 5. Los marcajes isobáricos de masas en grupo podrían usarse para identificar nuevas biomoléculas que permitan una mejor comprensión del mecanismo fisiopatológico involucrado en la leishmaniasis canina y que también podrían usarse potencialmente como biomarcador de esta enfermedad.