[ca] La forma, qualitat i maduració del fruit són característiques importants en meló (Cucumis melo L.). Com que el meló posseeix una gran diversitat fenotípica, incloent tant varietats climatèriques i com no climatèriques, és un subjecte adequat per a l'estudi d'aquests trets. Amb l'objectiu d'identificar gens candidats de trets agronòmics importants en el meló, s'han iniciat diversos projectes per a localitzar quantitative trait loci (QTL) utilitzant poblacions de mapeig. Entre ells, s'han identificat dos QTL importants, FSQS8.1 i ETHQV8.1, per la forma i la maduració del fruit, respectivament. El gen candidat per FSQS8.1 és l'OVATE FACTOR PROTEIN (OFP1) i per a ETHQV8.1, l'ETHYLENE RESPONSIVE TRANSCRIPTION FACTOR (ERF024). CRISPR/Cas9 és un mètode punter d'edició genètica que podria ser una eina potent per ajudar a validar la funció de gens identificats. Amb aquesta finalitat en el laboratori s'havien generat DNAs recombinants que contenien gen Cas9 juntament amb un ARN guia específic per a cada gen. Aquests DNAs recombinants es van introduir en Agrobacterium tumefaciens i amb aquest es van transformar cotiledons de llavors de meló, dels quals es van regenerar plantes mitjançant cultiu in vitro. L'objectiu era obtenir plantes amb una mutació knock-out en aquests gens. Els fruits d'aquestes plantes s'autofecundaran per a obtenir mutacions en homozigosi i després es fenotiparan per a comprendre la funció dels gens candidats. Durant aquest treball, es van obtenir amb èxit plantes editades amb CRISPR/Cas9. Algunes eren edicions bial·lèliques que estalviarien els esforços necessaris per obtenir un individu amb dos al·lels eliminats. No obstant això, el cultiu de teixits i la transformació amb Agrobacterium van presentar complicacions. Sis de les vuit transformacions no van tenir èxit. La principal problemàtica va ser la infecció d'una bacteri endogen. Les dues transformacions que van donar lloc a plantes editades només ho van fer després de d'entre 6 a 10 mesos de cultiu de calls. A més, totes les plantes obtingudes fins ara han sigut tetraploides, un problema comú en el cultiu de teixits de meló. Encara que CRISPR/Cas9 segueix sent una eina prometedora per a la investigació en meló, els mètodes de cultiu de teixits i transformació amb Agrobacterium s'han d'optimitzar i les dificultats del protocol d'edició CRISPR/cas s'han d'estudiar per resoldre-les.

[es] La forma, calidad y maduración del fruto son características importantes en melón (Cucumis melo L.). Ya que melón posee una gran diversidad fenotípica, incluyendo tanto variedades climatéricas como no climatéricas, es un sujeto adecuado para el estudio de estos rasgos. Para identificar genes candidatos para rasgos agronómicos importantes en el melón, se han iniciado varios proyectos para localizar quantitative trait loci (QTL) utilizando poblaciones de mapeo. Entre ellos, se han identificado dos QTL importantes, FSQS8.1 y ETHQV8.1, para la forma y la maduración del fruto, respectivamente. El gen candidato para FSQS8.1 es un OVATE FACTOR PROTEIN (OFP1) y para ETHQV8.1, un ETHYLENE RESPONSIVE TRANSCRIPTION FACTOR (ERF024). CRISPR/Cas9 es un método puntero de edición genética que podría ser una herramienta potente para ayudar a validar la función de genes identificados. Por lo tanto, para validar la función de los genes candidato, transferimos el gen Cas9 junto con un ARN guía específico para cada gen a través de Agrobacterium y regeneramos plantas mediante cultivo de tejidos. El objetivo era producir plantas con una mutación knock-out en dichos genes. Los frutos de estas plantas se autofecundarán para obtener mutaciones en homocigosis y luego se fenotiparán para comprender la función de los genes candidatos. Durante este trabajo, se produjeron con éxito transgénicos y plantas editadas con CRISPR/Cas9. Algunas eran ediciones bialélicas que ahorrarían los esfuerzos necesarios para obtener un individuo con ambos alelos eliminados. Sin embargo, el cultivo de tejidos y la transformación de Agrobacterium presentaron complicaciones. Seis de las ocho transformaciones no tuvieron éxito. Las causas de fallo fueron principalmente infecciones de una bacteria endógena. Las dos transformaciones que produjeron plantas solo lo hicieron después de 6 a 10 meses de cultivo de callos. Además, todas las plantas obtenidas hasta ahora eran tetraploides, un problema común en el cultivo de tejidos de melón. Aunque CRISPR/Cas9 sigue siendo una herramienta prometedora para la investigación en melón, los métodos de cultivo de tejidos y transformación con Agrobacterium deben mejorarse y las dificultades del protocolo deben estudiarse.