[en] Friedreich ataxia (FA) is a rare cardio-neurodegenerative disease mainly caused by homozygous GAA-triplet expansion in the first intron of the frataxin (FXN) gene, causing low levels of the mitochondrial protein frataxin (between 4% and 29%). Some FA patients have a point mutation in one FXN allele alongside the expansion. The initial symptoms affect the nervous system, with the neurons of the dorsal root ganglia (DRGs) being particularly vulnerable. This doctoral thesis aims to determine the molecular consequences of frataxin deficiency, especially in DRGs, and to identify new therapeutic targets for FA. To achieve this objective, two models were used: primary cultures of frataxin-deficient DRG neurons by RNA interference and DRGs from the FXNI151F mouse model. Overall, the results demonstrate that frataxin deficiency triggers a series of molecular alterations that result in mitochondrial dysfunction characterized by decreased mitochondrial respiration (CI and CII), reduced NAD+/NADH ratio and consequently sirtuin activity (SirT3), dysregulation of Ca2+ homeostasis and mitochondrial iron accumulation, leading to increased oxidative stress. As a result of these alterations, cell death occurs mainly by ferroptosis as an increase in lipid peroxidation is observed, caused by iron-mediated oxidative stress due to Xc-/GSH/GPX4 deficiency, which weakens the antioxidant defence system. These effects are derived, in part, from the inactivation and reduction of NRF2, due to an increase in its negative regulators (KEAP1 and GSK3β) and reduction of the SirT1/LKB1/AMPK signalling pathway, which is its activator. In addition, the AMPc/PKA signalling pathway involved in mitochondrial biogenesis and Ca2+ metabolism is altered. This cascade of molecular damage affects DRGs more severely, both in neurons and non-neuronal cells of FXNI151F mice. In contrast, in the brain, frataxin deficiency has an exclusive impact on astrocytes, which possibly perform a protective function for neurons. This would explain the greater effect on DRGs, due to this lack of astrocytic protection. Finally, this thesis identifies potential therapeutic targets for FA treatment, such as honokiol (a SirT3 activator), forskolin (a PKA activator) and P1-FXN shuttle peptides.

[es] La Ataxia de Friedreich (AF) es una enfermedad cardio-neurodegenerativa rara causada principalmente por una expansión de tripletes GAA en homocigosis en el primer intrón del gen de la frataxina (FXN). Esto conduce a niveles bajos de la proteína mitocondrial frataxina (entre el 4% y el 29%). En algunos pacientes, la AF se debe a una mutación puntual en un alelo del gen FXN junto con la expansión GAA. Los síntomas iniciales afectan el sistema nervioso, siendo las neuronas de los ganglios de la raíz dorsal (dorsal root ganglia, DRGs) particularmente vulnerables. Esta tesis doctoral tiene como objetivo principal determinar las consecuencias moleculares de la deficiencia de frataxina, especialmente en los DRGs, e identificar nuevas dianas terapéuticas para la AF. Se han empleado dos modelos para alcanzar este objetivo: cultivos primarios de neuronas DRG deficientes en frataxina por interferencia de ARN y DRGs del modelo de ratón FXNI151F. En conjunto, los resultados demuestran que la deficiencia de frataxina desencadena una serie de alteraciones moleculares que se traducen en una disfunción mitocondrial caracterizada por una disminución de la respiración mitocondrial (CI y CII), reducción de la relación NAD+/NADH y de la actividad de sirtuína (SirT3), desregulación de la homeostasis del Ca2+ y acumulación de hierro mitocondrial, lo que conduce a un aumento del estrés oxidativo. Como resultado de estas alteraciones, la muerte celular se produce principalmente por ferroptosis, ya que se observa un incremento de la peroxidación lipídica, causada por el estrés oxidativo inducido por el hierro y un déficit del sistema antioxidante Xc-/GSH/GPX4. Estos efectos se derivan, en parte, de la inactivación y reducción de NRF2, a causa de un aumento de las vías reguladoras negativas (KEAP1 y GSK3β) y reducción de la vía de señalización SirT1/LKB1/AMPK, la cual es activadora. Además, se altera la vía de señalización AMPc/PKA implicada en la biogénesis mitocondrial y el metabolismo del Ca2+. Esta cascada de daños moleculares afecta de manera más severa a los DRGs, tanto en las neuronas como en las células no neuronales de los ratones FXNI151F. En cambio, en el cerebro, la deficiencia de frataxina tiene un impacto exclusivo sobre los astrocitos, que posiblemente realizan una función protectora para las neuronas. Esto explicaría la mayor afectación de los DRGs, ya que carecen de esta protección. Finalmente, esta tesis identifica posibles dianas terapéuticas para el tratamiento de la AF, como el honokiol (un activador de SirT3), la forskolina (un activador de PKA) y los péptidos lanzadera P1-FXN.