[en] Mammary tumours are the most common neoplasms in female dogs and the participation of the myoepithelial (ME) cells in its constitution is very high. Some immunohistochemical and in vitro studies of human breast cancer suggest that these cells have tumour suppressor functions. In these studies, the role of ME cells in the stromal invasion of canine mammary carcinoma and the isolation, purification and culture methods of canine ME cells have been analyzed and standardized, respectively. The integrity of the ME cell layer around groups of atypical epithelial cells was evaluated in tissue samples of benign and malignant tumours and its correlation with the histological grade of malignancy and proliferation index of the lesions were analyzed. Results showed that the level of expression of calponin, the marker used to identify this layer, was similar in benign and malignant tumours of histological grades 1 and 2. These findings indicated that ME cells were not good marker of invasion to diagnose in situ carcinoma of the canine mammary gland. On the contrary, they suggest a potential protective on the progression of the disease. Isolation and purification of ME cells requires the use of non-available specific surface markers of ME cells of the canine mammary gland. The expression of CD10 antigen and Thy1 (thymocyte differentiation antigen), both considered to be sensitive and specific surface markers of human breast ME cells, were analyzed by immunohistochemistry in ME cell and epithelial cell immunophenotypes of the normal and neoplastic canine mammary gland. CD10, as the majority of canine ME cell marker, proved to be sensitive but not specific, whereas Thy1 marked ME cells exclusively. Finally, ME cells from normal and neoplastic canine mammary gland were isolated and purified using an immunomagnetic method (MACS) and Thy1 marker. The results of this study showed the possibility of isolation and culture of canine ME cells for first time in literature opening this way the possibility of studying in vitro their role in the development of canine mammary tumours with novel and powerful techniques.

[es] Los tumores de mama son las neoplasias más frecuentes en las hembras de la especie canina y la participación de las células mioepiteliales (ME) en su constitución es muy alta. Algunas de las investigaciones realizadas en el carcinoma de mama humano mediante métodos inmunohistoquímicos y cultivos de células ME purificadas indican que estas células podrían tener funciones supresoras de tumor. En este trabajo hemos analizado el papel de las células ME en la invasión estromal del carcinoma de mama y hemos estandarizado los métodos de aislamiento, purificación y cultivo de células ME caninas. La integridad de la capa de células ME alrededor de grupos de células epiteliales atípicas se valoró en cortes de tejido de tumores benignos y malignos y se correlacionó con el grado de malignidad y el índice de proliferación de las lesiones, observándose que el nivel de expresión de calponina, el marcador utilizado para identificar dicha capa, era similar en los tumores benignos y los malignos de grados histológicos 1 y 2. Estos hallazgos indican que las células ME no son buenos marcadores de invasión para el diagnóstico del carcinoma in situ de la mama canina, pero sí sugieren la existencia de un efecto protector sobre la progresión de la enfermedad. El aislamiento y purificación de las células ME requiere el uso de marcadores de superficie específicos de las células ME de la mama canina no identificados previamente. La expresión de CD10 y del antígeno de timocitos Thy1, identificados recientemente como marcadores sensibles y específicos de la membrana de las células ME en la mama humana, se analizó mediante técnicas inmunohistoquímicas en células de inmunofenotipo ME y epitelial de la glándula mamaria normal y neoplásica canina. El CD10, al igual que la mayoría de los marcadores conocidos de las células ME de la mama canina, demostró ser sensible pero no específico, mientras que el Thy1 marcó células ME exclusivamente. Finalmente, se aislaron y purificaron las células ME de mamas normales y neoplásicas caninas utilizando un método inmunomagnético (MACS) y el marcador Thy1. Los resultados de este estudio demostraron la posibilidad de aislamiento y cultivo de células ME caninas por primera vez en la literatura para así poder estudiar in vitro su papel en el desarrollo de los tumores de la mama canina