[en] Carcinoma is the most common type of cancer, and arises from the malignant transformation of epithelial cells. At the early stages of carcinoma progression, a process known as epithelialmesenchymal transition (EMT) takes place. EMT is characterized by the downregulation of Ecadherin, a tumour suppressor responsible for cell adhesion in the epithelium. The E3 ubiquitinligase Hakai was the first reported posttranslational regulator of the E-cadherin stability, and its importance during tumour progression and disease has been widely demonstrated. E3 ubiquitinligase enzymes have recently emerged as promising therapeutic targets, as their specific inhibition would avoid wider side effects compared to other members of the ubiquitin pathway. EMT has also been associated with other aspects of tumour progression, such as the acquisition of therapeutic resistance or the development of cancer stem cells (CSCs). The aims of this project were the identification and validation of a small-molecule inhibitor for the E3 ubiquitin-ligase Hakai, and the study of the involvement of Hakai in the acquisition CSC properties and other aspects of tumour progression. Results showed that Hakai inhibitor (Hakin-1) reduced Hakaidependent ubiquitination of E-cadherin, showing an important antitumor effect both in vitro and in vivo, therefore being a promising therapeutic agent for cancer treatment through the inhibition of EMT. On the other hand, Hakai may play a role in the development of CSCs, opening a new research field to overcome therapeutic resistance.

[gl] O carcinoma é o tipo máis frecuente de cancro, e xorde da transformación maligna das células epiteliais. Durante as primeiras etapas da progresión tumoral, ocorre un proceso coñecido como transición epitelio-mesénquima (TEM). A TEM caracterízase por unha expresión diminuída da E-cadherina, un supresor tumoral responsable das unións célula-célula no epitelio. A E3 ubiquitina-ligasa Hakai foi o primeiro regulador postraducional descrito da E-cadherina, e a súa importancia durante a progresión tumoral está amplamente descrita. Nos últimos anos, as enzimas E3 ubiquitina-ligasas gañaron importancia como dianas terapéuticas, xa que a súa inhibición específica podería evitar efectos secundarios máis amplos en comparación con outros membros da vía ubiquitina-proteasoma. Ademais, a TEM está asociada con outros aspectos da progresión tumoral, como por exemplo o desenvolvemento de resistencia a fármacos ou a adquisición de propiedades de célula nai tumoral (CSC). Os obxectivos do presente traballo foron a identificación e validación dun inhibidor de pequena molécula da E3 ubiquitina-ligasa Hakai, e o estudo do papel de Hakai na adquisición de características de CSC e outros aspectos da progresión tumoral. Os resultados obtidos amosaron que o inhibidor de Hakai (Hakin-1) non só reduce a ubiquitinización de E-cadherina mediada por Hakai, senón que ademais amosa un importante efecto antitumoral tanto in vitro como in vivo, sendo polo tanto un prometedor axente terapéutico para o tratamento do cancro mediante a inhibición da TEM. Por outra banda, Hakai podería estar implicado no desenvolvemento de CSCs, o que abre unha nova vía de estudo para superar a resistencia a fármacos.