[ca] La ruta de reparació de l'anèmia de Fanconi (FA)/BRCA és un mecanisme emprat en la reparació de danys en el DNA davant la presència d'enllaços creuats entre cadenes, causats ocasionalment o per agents quimioterapèutics. La reparació del DNA és un objectiu important en la teràpia dirigida contra el càncer, i suposa una alternativa a les teràpies convencionals. Després del descobriment de la letalitat sintètica, mot utilitzat per a referir-se a la relació genètica establerta entre dos gens la pèrdua de funció dels quals desemboca en la mort cel·lular, mentre que la pèrdua de funció de tan sols un d'ells no, s'han desenvolupat diversos enfocaments terapèutics en base a aquesta relació. Un exemple en són els inhibidors de la PARP (PARPi), aprovats per al tractament de càncer de mama, ovari, pròstata o pàncrees en tumors amb mutacions en BRCA1/2. Aquesta tesi és la continuació d'un projecte de descobriment de fàrmacs (drug discovery) amb l'objectiu de trobar un inhibidor de la via FA/BRCA (Fanconinib), que pugui ser utilitzat per tractar tumors amb mutacions letals sintètiques amb la via esmentada, com PARP, ATM, ATR o ALDH2. Després d'aquesta caracterització, es va dur a terme un primer cribratge de compostos a partir d'una biblioteca amb 136 milions de molècules (base de dades 3D ZINC15). seguit de la validació cel·lular/in vitro i de la seva interacció amb l'objectiu (validació bioquímica). Alguns dels candidats dissenyats i provats van mostrar bons resultats sense toxicitat en les cèl·lules tractades. Tot i que queden molts passos per fer, les perspectives a la vista dels nostres últims resultats són prometedores per al futur del nostre projecte de descobriment de fàrmacs. D'altra banda, la manca d'una via FA/BRCA funcional és l'origen d'un rar trastorn genètic caracteritzat, principalment, per insuficiència medul·lar, anomalies físiques i major risc de càncer. De fet, el desenvolupament de carcinomes escamosos de cap i coll (HNSCC) en pacients amb anèmia de Fanconi és entre 500 i 800 vegades major que en la població general, al qual s'afegeix l'inconvenient addicional que aquests pacients no poden sotmetre's a quimio- o radioteràpia a causa de la pèrdua del mecanisme de reparació d'enllaços creuats entre cadenes. A causa d'aquesta intolerància a la radio/quimioteràpia, la resecció quirúrgica és l'única teràpia aprovada per a aquest tipus de tumors en pacients Fanconi. No obstant això, el 2020 es va publicar un estudi fet pel nostre grup, en el qual a partir d'un cribratge d'alt contingut es va identificar a afatinib, inhibidor panERBB, com un prometedor agent antitumoral i no genotòxic per a pacients Fanconi (Montanuy, et al., 2020a and 2020b). A més, l'amplificació d'EGFR ha estat recentment observada en FA HNSCC (Webster et al., 2022). Mentre el nostre grup intenta demostrar l'eficàcia i seguretat d'afatinib en pacients Fanconi amb HNSCC a través d'un assaig clínic de reposicionament, multicèntric i internacional; i tenint en compte que els tumors solen desenvolupar resistència a aquests tipus de teràpia, limitant la seva eficàcia a llarg termini, el nostre objectiu es va centrar a identificar noves dianes terapèutiques per als tumors FA HNSCC resistents a afatinib. Considerant que les línies FA HNSCC exhibien 20-50 vegades menys resistència a afatinib que les línies esporàdiques (afatinib 20-45-80 nM vs. 800-1.000 nM), vam intentar establir els principals mecanismes diferencials entre línies esporàdiques i Fanconi, resistents i no resistents a afatinib. Tot i que la baixa adquisició de resistència a afatinib en línies FA HNSCC recolza l'ús d'aquest inhibidor en assajos clínics, la identificació de potencials dianes terapèutiques amb expressió diferencial en les dades de transcriptòmica obtingudes obre la porta a noves estratègies contra tumors HNSCC en pacients.

[es] La ruta de reparación de anemia de Fanconi (FA)/BRCA es un mecanismo de reparación de daño en el DNA ante la presencia de enlaces cruzados entre cadenas (interstrand crosslinks), causados espontáneamente o por agentes quimioterapéuticos. La reparación del DNA es un objetivo importante en la terapia dirigida contra el cáncer, y supone una alternativa a las terapias convencionales. En este ámbito, la letalidad sintética, término usado para referirse a la relación genética que se establece entre dos genes cuya pérdida de función desemboca en la muerte celular, mientras que la pérdida de función de solo uno de ellos no, está siendo considerada en diferentes enfoques terapéuticos contra el cáncer. Un ejemplo de ello son los inhibidores de la PARP (PARPi), aprobados para el tratamiento de cáncer de mama, ovario, próstata o páncreas en tumores con mutaciones en BRCA1/2.&nbsp; Esta tesis es continuación de un proyecto de descubrimiento de fármacos (drug discovery) cuyo objetivo es encontrar un inhibidor de la ruta de FA/BRCA (Fanconinib), que pueda ser usado para tratar tumores con mutaciones letales sintéticas con la ruta mencionada, como PARP, ATM, ATR o ALDH2. Después de esta caracterización, se llevó a cabo un primer cribado de compuestos a partir de una librería con 136 millones de moléculas (base de datos 3D ZINC15). seguidas de la validación celular/in vitro y de su interacción con el objetivo (validación bioquímica). Algunos de los candidatos diseñados y probados mostraron buenos resultados sin toxicidad en las células tratadas. Aunque quedan muchos pasos por hacer, las perspectivas a la vista de nuestros últimos resultados son prometedores para el futuro de nuestro proyecto de descubrimiento de fármacos. Por otra parte, la falta de una ruta FA/BRCA funcional es el origen de un raro desorden genético caracterizado, principalmente por fallo de médula ósea, anomalías físicas y mayor riesgo de cáncer. De hecho, el desarrollo de carcinomas escamosos de cabeza y cuello (HNSCC) en pacientes con anemia de Fanconi es entre 500 y 800 veces mayor que en población general, a lo que se suma el inconveniente adicional de que estos pacientes no pueden someterse a quimio- o radioterapia debido a la pérdida del mecanismo de reparación de enlaces cruzados entre cadenas. A causa de esta intolerancia a la radio/quimioterapia, la resección quirúrgica es la única terapia aprobada para este tipo de tumores en pacientes Fanconi. Sin embargo, en 2020 se publicó un estudio hecho por nuestro grupo, en el que a partir de un cribado high content screening se identificó a afatinib, inhibidor panERBB, como un prometedor agente antitumoral y no genotóxico para pacientes Fanconi (Montanuy, et al., 2020a and 2020b). Además, la amplificación de EGFR ha sido recientemente observada en FA HNSCC (Webster et al., 2022). Mientras nuestro grupo intenta demostrar la eficacia y seguridad de afatinib en pacientes Fanconi con HNSCC a través de un ensayo clínico de reposicionamiento, multicéntrico e internacional; y teniendo en cuenta que los tumores suelen desarrollar resistencia a estos tipos de terapia, limitando su eficacia a largo plazo, nuestro objetivo se centró en identificar nuevas dianas terapéuticas para los tumores FA HNSCC resistentes a afatinib. Considerando que las líneas FA HNSCC exhibían 20-50 veces menos resistencia a afatinib que las líneas esporádicas (afatinib 20-45-80 nM vs. 800-1.000 nM), intentamos establecer los principales mecanismos diferenciales entre líneas esporádicas y Fanconi, resistentes y no resistentes a afatinib. Aunque la baja adquisición de resistencia a afatinib en líneas FA HNSCC apoya el uso de este inhibidor en ensayos clínicos, la identificación de potenciales dianas terapéuticas con expresión diferencial en los datos de transcriptómica obtenidos abre la puerta a nuevas estrategias contra tumores HNSCC en pacientes.