[ca] TrkA es va descobrir com a un oncogén producte de la fusió del seu domini tirosina kinasa (TK) amb la tropomiosina. Posteriorment, va augmentar el seu interès en descobrir-se que la proteïna nativa constituïa el receptor del factor de creixement nerviós (NGF). Es coneixen bé els esdeveniments que tenen lloc a partir de la unió del lligand al receptor i que donen lloc a l'activació de les vies de senyalització de les MAPK y PI 3-K/Akt. Se sap que, in vivo, la internalització del receptor i el seu transport retrògrad també juguen un paper important per a l'efecte a llarg termini del NGF i que és un tret distintiu en relació a d'altres receptors de factors de creixement. L'activació del receptor també comporta un augment transitori de Ca2+ intracel· lular. Per això ens vam plantejar l'estudi de la relació entre l'activació de TrkA i calmodulina (CaM), com a sensor dels nivells de Ca2+ intracel· lulars. En primer lloc vam observar una interacció directa i dependent de Ca2+ entre CaM i la meitat c-terminal del domini intracel· lular de TrkA. La primera part del treball se centra en caracteritzar aquesta interacció. Per veure l'efecte de la unió sobre Trk, vam utilitzar inhibidors de CaM. Aquests no impedeixen la fosforilació de TrkA induïda per NGF, però sí comporten la proteòlisi del receptor donant lloc a un fragment amb activitat tirosina kinasa constitutiva. Donada la ubiqüitat de CaM, i la seva importància en processos vitals per a la cél· lula, el segon objectiu ha consistit en buscar el lloc d'unió a CaM de TrkA per així poder obtenir una construcció de Trk on es perdés la unió a CaM. Basant-nos en diverses evidències, ens vam centrar en la caracterització d'una regió que conté una Tyr fosforilable (Y701) i que forma part d'un motiu d'internalització. L'última part del treball se centra en descriure les característiques d'aquesta Tyr i la seva funció, que més enllà de la relació amb CaM, pot constituir una fosforilació inhibitòria per l'activitat de Trk i un lloc de regulació negativa de la internalització.

[es] TrkA se descubrió como un oncogén producto de la fusión de su dominio tirosina kinasa (TK) con la tropomiosina. Posteriormente, aumentó su interés tras descubrirse que la proteína nativa constituía el receptor del factor de crecimiento nervioso (NGF). Se conocen bien los acontecimientos que ocurren tras la unión del ligando al receptor y que dan lugar a la activación de las vías de señalización de las MAPK y PI 3-K/Akt. Se sabe que, in vivo, la internalización del receptor y su transporte retrógrado también juegan un papel importante para el efecto a largo plazo del NGF y que es una característica distintiva de otros receptores de factores de crecimiento. La activación del receptor también conlleva un aumento transitorio de Ca2+ intracelular. Por ello nos planteamos estudiar la relación entre la activación de TrkA y calmodulina (CaM), como sensor de los niveles de Ca2+ intracelulares. En primer lugar observamos una interacción directa y Ca2+ dependiente entre CaM y la mitad c-terminal del dominio intracelular de TrkA. La primera parte del trabajo se centra en caracterizar esta interacción. Para ver el efecto de la unión sobre Trk, utilizamos inhibidores de CaM. Éstos no impiden la fosforilación de TrkA inducida por NGF, pero sí conllevan la proteolisis del receptor dando lugar a un fragmento con actividad tirosina kinasa constitutiva. Dada la ubicuidad de CaM y su importancia en procesos vitales para la célula, el segundo objetivo consistió en buscar el sitio de unión a CaM de TrkA, para así poder obtener una construcción de Trk en que se perdiera la unión a CaM. Basándonos en diversas evidencias, nos centramos en la caracterización de una región que contenía una Tyr fosforilable (Y701) y que además forma parte de un motivo de internalización. La última parte del trabajo se centra en describir las características de dicha Tyr y su función,que más allá de la relación con CaM, puede constituir una fosforilación inhibitoria para la actividad de Trk y un lugar de regulación negativa de su internalización.