[ca] Aquesta tesi industrial tenia com a objectiu transferir la vacuna Acinetovax duna companyia biotecnològica a una companyia farmacèutica on pogués ser industrialitzada. Aquesta vacuna va ser desenvolupada per prevenir les infeccions provocades per un cep d'A. baumannii en entorns nosocomials. A. baumannii és un bacteri oportunista que ha aconseguit desenvolupar resistències a antibiòtics i ha esdevingut un problema hospitalari internacional. És per aquesta raó que per millorar la protecció contra les infeccions provocades per A. baumannii en ambients nosocomials, una vacuna innovadora anomenada Acinetovax està sent desenvolupada. La vacuna Acinetovax ha estat desenvolupada per Vaxdyn i va ser transferida a Reg Jofre. Les vacunes profilàctiques tenen incomptables problemes durant el seu desenvolupament i per a la venda al mercat ja que s'inoculen en individus sans per evitar infeccions, la qual cosa pot provocar, en alguns casos, esdeveniments adversos. Aquest escenari força els productes per ser més segurs i més efectius que altres productes ja que moltes vegades la ràtio reg benefici és molt baix. Les eines per estudiar l'efectivitat de les vacunes són limitades, i la majoria se centren a caracteritzar la resposta immune produïda. Els assaigs preclínics realitzats amb vacunes per prevenir infeccions basades en models animals permeten al científic estudiar la supervivència després de la infecció, analitzar la resposta immune cel·lular induïda a la melsa i els ganglis limfàtics, o estudiar la resposta humoral a través de la determinació d'immunoglobulines . Tot i que, a l'etapa clínica, l'única forma d'avaluar la resposta immune és a partir de mostres de sèrum, per la qual cosa és essencial desenvolupar mètodes ELISA sèrics robustos. El primer pas en la transferència va consistir a desenvolupar una bateria de tècniques analítiques basades en lanàlisi de la resposta humoral a la vacuna i validar el mètode seguint pautes internacionals. El principal mètode analític desenvolupat com un ELISA sandvitx per quantificar al producte farmacèutic, la proteïna immunodominant Omp22. Un segon objectiu va ser desenvolupar i estudiar la forma farmacèutica de la vacuna. Es van dissenyar diversos lots per optimitzar la fórmula i es van estudiar amb les tècniques desenvolupades. L'objectiu principal de la nova formulació va ser assolir un producte farmacèutic estable que pogués mantenir la seva capacitat protectora. Es va demostrar que la fórmula era estable amb l'evidència obtinguda a través de les tècniques analítiques validades. El tercer objectiu va consistir a estudiar la resposta immune induïda per la vacuna. La resposta humoral es va estudiar en un model murí de sepsi que va mesurar la supervivència i la producció d'anticossos específics en sèrum. La determinació dels diferents isotips d'IgG i IgM mitjançant una prova ELISA, a banda de mostrar resultats robusts, és essencial per a l'inici de la fase clínica de la vacuna. La resposta immune cel·lular es va analitzar mitjançant citometria de flux, on es van estudiar les citocines produïdes pels esplenocits de ratolins immunitzats. No obstant això, els resultats dels assaigs de secreció de citocines no van ser tan robusts. En resum, es van assolir la majoria dels objectius de la tesi i es va aconseguir una fórmula farmacèutica òptima per al començament dels estudis fase clínics, el següent pas del procediment de desenvolupament.

[es] Esta tesis industrial tenía como objetivo transferir la vacuna Acinetovax de una compañía biotecnológica a una compañía farmacéutica donde pudiese ser industrializada. Esta vacuna fue desarrollada para prevenir las infecciones provocadas por una cepa de A. baumannii en entornos nosocomiales. A. baumannii es una bacteria oportunista que ha conseguido desarrollar resistencias a antibióticos y se ha convertido en un problema hospitalario internacional. Es por esta razón que para mejorar la protección contra las infecciones provocadas por A. baumannii en ambientes nosocomiales, una vacuna innovadora llamada Acinetovax esta siendo desarrollada. La vacuna Acinetovax ha sido desarrollada por Vaxdyn y fue transferida a Reg Jofre. Las vacunas profilácticas tienen incontables problemas durante su desarrollo y para su venta en el mercado ya que se inoculan en individuos sanos para evitar infecciones, lo cual puede provocar, en algunos casos, eventos adversos. Este escenario fuerza a los productos para ser mas seguros y mas efectivos que otros productos ya que muchas veces la ratio riego beneficio es muy bajo. Las herramientas para estudiar la efectividad de las vacunas son limitadas, y la mayoría de ellas se centran en caracterizar la respuesta inmune producida. Los ensayos preclínicos realizados con vacunas para prevenir infecciones basadas en modelos animales permiten al científico estudiar la supervivencia después de la infección, analizar la respuesta inmune celular inducida en el bazo y los ganglios linfáticos, o estudiar la respuesta humoral a través de la determinación de inmunoglobulinas. Aunque, en la etapa clínica, la única forma de evaluar la respuesta inmune es a partir de muestras de suero, por lo que es esencial desarrollar métodos ELISA séricos robustos. El primer paso en la transferencia consistió en desarrollar una batería de técnicas analíticas basadas en el análisis de la respuesta humoral a la vacuna y validar el método siguiendo pautas internacionales. El principal método analítico desarrollado como un ELISA sándwich para cuantificar en el producto farmacéutico, la proteína inmunodominante Omp22. Un segundo objetivo fue desarrollar y estudiar la forma farmacéutica de la vacuna. Se diseñaron varios lotes para optimizar la fórmula y se estudiaron con las técnicas desarrolladas. El objetivo principal de la nueva formulación fue lograr un producto farmacéutico estable que pudiera mantener su capacidad protectora. Se demostró que la fórmula era estable con la evidencia obtenida a través de las técnicas analíticas validadas. El tercer objetivo consistió en estudiar la respuesta inmune inducida por la vacuna. La respuesta humoral se estudió en un modelo murino de sepsis que midió la supervivencia y la producción de anticuerpos específicos en suero. La determinación de los diferentes isotipos de IgG e IgM a través de una prueba ELISA, a parte de mostrar resultados robustos, es esencial para el inicio de la fase clínica de la vacuna. La respuesta inmune celular se analizó mediante citometría de flujo, donde se estudiaron las citoquinas producidas por los esplenocitos de ratones inmunizados. Sin embargo, los resultados de los ensayos de secreción de citoquinas no fueron tan robustos. En resumen, se lograron la mayoría de los objetivos de la tesis y se consiguió una formula farmacéutica óptima para el comienzo de los estudios fase clínicos, el siguiente paso del procedimiento de desarrollo.