[es] El cáncer engloba un conjunto de enfermedades que se originan a partir de alteraciones genéticas que dan lugar a la transformación progresiva de células normales en células cancerosas malignas. Entre ellas, los carcinomas son el tipo de cáncer más frecuente de todos. Estos afectan a las células epiteliales, que pierden sus características epiteliales y adquieren un fenotipo mesenquimal e invasivo, dando lugar a la formación de metástasis. En las primeras etapas de la metástasis tiene lugar la activación del programa de transición epitelio a mesénquima (TEM), un conjunto de procesos biológicos que conducen a la transición de células epiteliales inmóviles hacia células mesenquimales con capacidad de migración e invasión de nuevos tejidos. Durante la TEM, la E3 ubiquitina-ligasa Hakai actúa como regulador posttraduccional de la estabilidad de la E-cadherina presente en las uniones adherentes célula-célula, siendo responsable de su endocitosis y degradación vía lisosomas y promoviendo así el desensamblaje de estas uniones intercelulares y la consiguiente diseminación de las células cancerosas hacia nuevos tejidos a través del torrente circulatorio. El objetivo del presente trabajo consiste en estudiar el efecto de diferentes factores de crecimiento, como son EGF, HGF y TGFβ, sobre la activación de la TEM y determinar si dicha regulación puede ser mediada a través de la regulación posttraduccional de E-cadherina por Hakai. Para ello, se trataron dos líneas tumorales de colon, LoVo y HT29, con los tres estímulos a diferentes tiempos y se analizó el efecto de dichos factores sobre el fenotipo celular mediante microscopía de contraste de fases y sobre la expresión de los marcadores E-cadherina y Hakai, mediante western-blotting, qRTPCR e imunofluorescencia. Los resultados obtenidos indican que los factores de crecimiento EGF, HGF y TGFβ no regulan de forma clara la expresión y localización celular tanto de E-cadherina como de Hakai, en las líneas celulares LoVo y HT-29.

[gl] O cancro engloba a un conxunto de enfermidades que se orixinan a partir de alteracións xenéticas que dan lugar á transformación progresiva de células normais en células cancerosas malignas. Entre elas, os carcinomas son o tipo de cancro máis frecuente de todos. Estos afectan ás células epiteliais, que perden as súas características epiteliais e adquiren un fenotipo mesenquimal e invasivo, dando lugar á formación de metástase. Nas primeiras etapas da metástase, ten lugar a activación do programa de transición epitelio a mesénquima (TEM), un conxunto de procesos biolóxicos que conducen á transición de células epiteliais inmóviles cara células mesenquimais con capacidades de migración e invasión de novos texidos. Durante a TEM, a E3 ubiquitina-ligasa Hakai actúa como reguladora posttraduccional da estabilidade de E-cadherina presente nas unións adherentes célula-célula, sendo responsable da súa endocitose e degradación vía lisosomas e promovendo así a desensamblaxe destas 8 unións intercelulares e a conseguinte diseminación das células cancerosas cara novos texidos a través do torrente circulatorio. O obxectivo do presente traballo consiste en estudar o efecto de diferentes factores de crecemento, como son EGF, HGF e TGFβ, sobre a activación da TEM e determinar se dita regulación pode ser mediada a través da regulación posttraduccional de E-cadherina por Hakai. Para elo, tratáronse dúas líneas tumorais de cancro de colon, LoVo e HT-29, cos tres estímulos a diferentes tempos e analizouse o efecto de ditos factores sobre o fenotipo celular mediante microscopía de contraste de fases e sobre a expresión dos marcadores E-cadherina e Hakai, mediante western-blotting, RT-qPCR e inmunofluorescencia. Os resultados obtidos indican que os factores de crecemento EGF. HGF e TGFβ non regulan de forma clara a expresión e localización celular tanto de E-cadherina como de Hakai nas líneas celulares LoVo e HT-29.