[en] The retina is a light-sensitive tissue located at the back of the eye that belongs to the central nervous system. When damage or disease happens, such as glaucoma, where progressive degeneration of the retinal ganglion cells (RGCs) occurs, it leads to vision loss or even blindness. Müller cells are responsible for maintaining the structural and functional integrity of the retina, participate in neuroprotection, survival of RGCs and in vitro studies have shown that they can contribute to the neuritic regeneration of RGCs. Previous work from the research group demonstrated that Müller cells from the northern whale significantly increased the elongation of neurites of RGCs; in order to study this neuroregenerative capacity, they were immortalized by creating the W21M cell line. To test whether both immortalized and primary Müller cells in different passages maintain the neuroregenerative capacity of primary whale Müller cells, the effect of immortalized and primary 4 whale Müller cells of passages 4 and 7 in co-culture with rat RGCs has been studied in the present work. We have also analyzed the effect of conditioned medium (CM) collected from immortalized and primary passage 4 and 7 whale Müller cell cultures on RGC cultures. In the results obtained, we found that co-cultures with primary Müller cells at pass 4 had the highest survival of RGCs. However, in cultures with MC obtained from Müller cells at passage 7, we observed that they lose this capacity, with a decrease in the survival of RGCs. In other words, these data demonstrate that aging of Müller cells affects their neuroprotective capacity. When analyzing the effect of Müller cells on the neuroregeneration of RGCs we have seen that the elongation of neurites of RGCs increases in coculture with primary Müller cells at passage 4 and 7 more than when RGCs are co-cultured with immortalized cells, suggesting that immortalized cells do not have as much neuroregenerating effect as primary cells. This result is confirmed in experiments with CM, where the most neuroregenerating effect occurs with CM from passage 4 primary cells. In conclusion, cellular aging negatively affects the survival of RGCs and immortalization of whale Müller cells causes them to lose the high neuroregenerative capacity of RGCs that primary Müller cells do maintain

[es] La retina es un tejido sensible a la luz situado en la parte posterior del ojo perteneciente al sistema nervioso central. Cuando se produce un daño o una enfermedad como por ejemplo el glaucoma, en el que se produce una degeneración progresiva de las células ganglionares de la retina (RGCs), conlleva a una pérdida de visión o incluso ceguera. Las células de Müller se encargan de mantener la integridad estructural y funcional de la retina, participan en la neuroprotección, supervivencia de las RGCs y además en estudios in vitro se ha demostrado que pueden contribuir a la regeneración neurítica de las RGCs. Trabajos previos del grupo de investigación demostraron que las células de Müller de la ballena boreal, aumentaban notablemente la elongación de las neuritas de las RGCs, para estudiar esta capacidad neuroregenerativa, se inmortalizaron creando la línea celular W21M. Para comprobar si, tanto las células de Müller inmortalizadas como las primarias en diferentes pases mantienen la capacidad neuroregenerativa de las células primarias de Müller de ballena, en el presente trabajo, se ha estudiado el efecto que tienen las células de Müller de ballena inmortalizadas y primarias de pase 4 y 7 en co-cultivo con RGCs de rata. También se ha analizado el efecto del medio condicionado (MC) recogido de los cultivos de células de Müller de ballena inmortalizadas y primarias de pase 4 y 7 en cultivos de RGCs. En los resultados obtenidos, hemos comprobado que los co-cultivos con células de Müller primarias de pase 4 son las que tienen mayor supervivencia de RGCs. Sin embargo, en los cultivos con MC obtenido de células de Müller de pase 7, observamos que pierden esta capacidad, con una disminución en la supervivencia de RGCs. Estos datos demuestran que el envejecimiento de las células de Müller afecta a su capacidad neuroprotectora. Al analizar el efecto de las células de Müller en la neuroregeneración de las RGCs hemos visto que la elongación de las neuritas de las RGCs aumenta en co-cultivo con las células de Müller primarias de pase 4 y 7 más que cuando las RGCs se co-cultivan con las células inmortalizadas, lo que sugiere que las células inmortalizadas no tienen tanto efecto neuroregenerador como las células primarias. Este resultado se confirma en los experimentos con MC, en donde el efecto más neuroregenerador se produce con el MC de primarias de pase 4. En conclusión, el envejecimiento celular afecta negativamente a la supervivencia de las RGCs y la inmortalización de las células de Müller de ballena hace que pierda la alta capacidad neuroregenerativa de las RGCs que si mantienen las células de Müller primarias.