[en] The development of metabolic diseases such as obesity and type 2 diabetes (T2D) is firmly correlated with the loss-of-function of white adipose tissue (WAT), in agreement with its mregulatory role on energy balance and glucose homeostasis. By contrast, brown adipose tissue (BAT) mass and function inversely correlate with WAT accretion and insulin resistance. Recently, BAT has emerged as an endocrine organ secreting a myriad of molecules that are involved in health and disease. To gain insight into the contribution of BAT to glucose homeostasis, in a previous study from our lab we generated an adipocyte-specific mouse model devoid of PGC-1[Alfa]/PGC-1[Beta], the master regulators of mitochondriogenesis and brown adipocyte differentiation (PGC-1[Alfa]/[Beta]-FAT-DKO mice). Adipose tissues from these mice displayed an impaired mitochondrial biogenesis and oxidative capacity. Despite being cold intolerant, they did not develop obesity or insulin resistance. When fed a high-fat diet (HFD) with a 45% of Kcal from fat, PGC-1[Alfa]/[Beta]-FAT-DKO mice were prone to glucose intolerance despite preserving insulin sensitivity. To further explore glucose intolerance in PGC-1[Alfa]/[Beta]-FAT-DKO mice, we subjected them to a diet with a higher content of fat (HFD60 or 60% Kcal from fat). PGC-1[Alfa]/[Beta]-FAT-DKO mice gained more weight over time, which correlated with an accumulation of fat in BAT. Moreover, fat deposition in BAT was accompanied by the up-regulation of classical WAT markers, thereby indicating a process of "whitening" of the tissue. These mice preserved insulin sensitivity but developed severe glucose intolerance independently of body weight gain. However, basal and glucose-stimulated serum c-peptide levels were decreased in PGC1[Alfa]/[Beta]-FAT-DKO mice. Altogether, these data pointed towards a pancreatic defect involving insulin secretion. Morphometric analysis of pancreatic islets by immunofluorescence and transmission electron microscopy did not reveal differences in [Beta]-cell mass, islet size or the maturation of [Beta]-cell insulin granules between PGC-1[Alfa]/[Beta]-FAT-DKO and Wt control mice. Similarly, gene expression analysis of pancreatic islets did not unmask a dysregulation in the expression of genes encoding for proteins involved in the secretion of insulin in pancreatic [Beta]-cells. The assessment of insulin secretion directly on isolated pancreatic islets indicated that responsiveness to glucose was preserved in PGC-1[Alfa]/[Beta]-FAT-DKO mice despite having lower serum insulin levels. Impaired glucose homeostasis in PGC-1[Alfa]/[Beta]-FAT-DKO mice suggested the establishment of an adipose-pancreatic crosstalk. To study this relation, we performed a proteomic study of adipose tissues secretome. Untargeted proteomics revealed notable differences between Wt and PGC-1[Alfa]/[Beta]-FAT-DKO mice in BAT but not in WAT. Targeted proteomics allowed us to discern the proteins differently secreted by BAT from PGC-1[Alfa]/[Beta]-FAT-DKO mice that could exert an endocrine role on pancreas. In vitro analysis of resistin, however, did not clarify its contribution to the regulation of insulin secretion. Taking together, our data indicate that the lack of PGC-1s alters BAT endocrine function, ultimately leading to altered glucose homeostasis as a result of a, yet unmasked, pancreatic defect.

[es] El desarrollo de enfermedades metabólicas como la obesidad y la diabetes tipo 2 está firmemente correlacionado con la pérdida de función del tejido adiposo blanco (WAT), de acuerdo con su papel regulador del balance energético y la homeostasis de la glucosa. Por el contrario, la masa y la función del tejido adiposo marrón (BAT) estan inversamente correlacionadas con la acreción del WAT y la resistencia a la insulina. Recientemente, el BAT ha surgido como un órgano endocrino que secreta una gran cantidad de moléculas implicadas tanto en la salud como en la enfermedad. Para indagar sobre la contribución del BAT a la glucosa homeostasis de la glucosa, en un estudio previo de nuestro laboratorio generamos un ratón knockout para los PGC-1[Alfa]/PGC-1[Beta] an adipocitos, los reguladores maestros de la mitocondriogénesis y la diferenciación de los adipocitos marrones (ratones PGC-1[Alfa]/[Beta]-FAT-DKO). Los tejidos adiposos de estos ratones mostraron una biogénesis mitocondrial y una capacidad oxidativa deterioradas y, a pesar de ser intolerantes al frio, no desarrollaron obesidad ni resistencia a la insulina. Cuando los alimentamos con una dieta rica en grasas (45% Kcal procedentes de la grasa) los ratones PGC-1[Alfa]/[Beta]-FAT-DKO eran propensos a paceder intolerancia a la glucosa, a pesar de preservar la sensibilidad a la insulina. Para explorar más a fondo la intolerancia a la glucosa en los ratones PGC-1[Alfa]/[Beta]-FAT-DKO, los sometimos a una dieta con mayor contenido en grasas (HFD60 o 60% Kcal de grasa). Con esta dieta, los ratones PGC-1[Alfa]/[Beta]-FAT-DKO ganaron más peso con el tiempo, lo que se correlacionó con una acumulación de grasa en el BAT. Además, la deposición de grasa en el BAT se acompaño de la sobreexpresión de marcadores clásicos de tejido adiposo blanco, indicando así un proceso de "blanqueamiento" del tejido. Estos ratones conservaron la sensibilidad a la insulina pero desarrollaron una intolerancia grave a la glucosa, independientemente del peso corporal. Sin embargo, los niveles séricos de péptido C basales y estimulados por glucosa eran inferiores en estos ratones que en los controles. En conjunto, estos datos apuntaban hacia un defecto pancreático que involucraba la secreción de insulina. El análisis morfométrico de islotes pancreáticos mediante inmunofluorescencia y microscopía electrónica de transmisión no reveló diferencias en la masa de células [Beta], el tamaño de los islotes o la maduración de las granulos de insulina dentro de las células [Beta] entre ratones PGC-1[Alfa]/[Beta]-FAT-DKO y control Wt. De manera similar, la expresión genética de los islotes pancreáticos en relación a genes que regulaban la secreción de insulina era parecida entre genotipos. La evaluacion de la secreción de insulina directamente en islotes pancreáticos aislados indicó que la capacidad de respuesta a la glucosa se conservaba en ratones PGC-1[Alfa]/[Beta]-FAT-DKO a pesar de tener niveles más bajos de insulina sérica. Por ello, los datos sugerían el establecimiento de una comunicación adiposo-pancreática en ratones PGC-1[Alfa]/[Beta]-FAT-DKO. Para estudiar esta relación, realizamos un estudio proteómico del secretoma de los tejido adiposos. La proteómica no dirigida reveló diferencias notables entre ratones Wt y PGC-1[Alfa]/[Beta]-FAT-DKO en BAT pero no en WAT. La proteómica dirigida nos permitió discernir las proteínas secretadas de manera diferente por el BAT de los ratones PGC-1[Alfa]/[Beta]-FAT-DKO que podrían ejercen un papel endocrino sobre el páncreas. Sin embargo, el análisis in vitro de uno de los candidatos, la resistina, no aclaró su contribución a la regulación de la secreción de insulina. En conjunto, nuestros datos indican que la falta de PGC-1s altera la función endocrina del BAT, lo cual en última instancia, conduce a una alteración de la homeostasis de la glucosa como resultado de una alteración pancreática que aún no se ha desvelado.