[en] Characteristic primary translocations in non-Hodgkin lymphomas (NHL-B), trigger deregulation of a proto-oncogene (most of them mediated by rearrangement with IGH gene) and thus, generating changes in the expression of cells with neoplastic potential. Another frequent genetic lesions are the chromosomic deletions inactivating tumour supressor genes as p53 ó p16. These rearrangements together with primary translocations are asumed to be related to tumoral progression and transformation. Genetic amplification is another frequent mechanism of rearrangement in NHL-B (oncogenes like REL, c-MYC, or BCL2). Fluorescent in situ hybridisation (FISH) is related to cytogenetics and molecular biology and represents the link between an specific rearrangement at the chromosome level and the genomic candidate region, allowing detection of the genes affected. This thesis includes three papers with the follow objective: the detection and characterisation of specific molecular rearrangements of NHL-B subtypes. Flanking probes detecting all possible translocations of BCL6 are developed in the first paper. The gene is rearranged in about 40% of diffuse large B cell lymphoma but prognosis value is still controversial. In the second paper, specific rearrangements detected in splenic marginal zone lymphoma are possible specific regions related to progression or agressive disease: trisomy +3 and rearrangements in chromosomal locations 19p13 and 7p22-q22. Two cases of MALT lymphoma showing t(14;18) have been characterised in the third paper, allowing us the molecular cloning of a novel translocation affecting MALT1 gene, a paracaspase involved in the immune response and proliferation mediated by NF-kB. We also demonstrate that the gene is amplified in several cell lines derived from NHL-B. Both amplification and translocation induce increase of MALT1 expression.

[es] RESUMEN En los linfomas no Hodgkin (LNH), las traslocaciones primarias características dan lugar a la desregulación de un protooncogén (debido en un gran número de casos al reordenamiento con el gen de las inmunoglobulinas) y cuya consecuencia funcional es la alteración de la expresión génica con potencial neoplásico. Otro tipo de lesión genética frecuente es la delección cromosómica que inactiva genes supresores tumorales, por ejemplo p53 ó p16. Estas anomalías se identifican junto a las traslocaciones primarias y se consideran alteraciones secundarias relacionadas con la progresión y transformación tumoral. También la amplificación génica es otro mecanismo de reordenamiento molecular frecuente en los LNH (oncogenes REL, c-MYC, y BCL2). La hibridación in situ con fluorescencia (FISH) es el vínculo entre citogenética y biología molecular. Ha permitido establecer la relación entre una determinada alteración a nivel del cromosoma y su correspondiente región genómica, con la identificación final de los genes implicados. Esta Tesis engloba tres trabajos cuyo objetivo ha sido detectar y caracterizar reordenamientos moleculares específicos de varios tipos de LNH. En el primer artículo se desarrollan sondas flanquantes del locus correspondiente al gen BCL6 que permiten detectar todas sus posibles traslocaciones. Este gen se encuentra alterado en un 40% de los casos de linfoma difuso de célula grande, sin que este aún claro su valor pronóstico. En el segundo artículo se detectan reordenamientos específicos que podrían implicarse en la progresión del linfoma esplénico de la zona marginal: trisomía 3 y reordenamientos en 19p13 y 7p22-q22. En el tercer artículo el estudio molecular de dos casos de linfoma MALT con t(14;18) ha permitido el clonaje de un nueva traslocación citogenética que afecta al gen MALT1, una paracaspasa implicada en la respuesta inmune y en la señalización a través de NF-kB. También se demuestra la amplificación de este gen en líneas celulares de LNH y el aumento en la expresión como consecuencia de estos reordenamientos. __________________________________________________________________________________________________