[en] Background. The search of immunotherapy biomarkers in Microsatellite Instability High / Deficient Mismatch Repair system (MSI-H/dMMR) metastatic colorectal cancer (mCRC) is an unmet need. The low prevalence of this phenotype (around 5% of advanced CRC) partly justifies the challenge. Patients and methods. Patients with MSI-H/dMMR mCRC treated with PD-1/PD-L1 inhibitors at Vall d'Hebron University Hospital comprised study cohort. According to whether the progression free survival with PD-1/PD-L1 inhibitors was longer to 6 months or equal/shorter, patients were clustered into IT- respond group (n: 9 patients) or IT- resist group (n: 7 patients), respectively. In order to evaluate determinants of benefit with PD-1/PD-L1 inhibitors, an exploratory multimodal analysis including genomics (through NGS panel tumor-only with 431 genes to determine TMB, frameshift mutations and mutational profile), immune microenvironment (using CD3, CD8, FOXP3 and PD-L1 antibodies), and microbiome focused on Fusobacterium nucleatum (RNA-ISH) were performed. Analysis of MSI-H/dMMR phenotype was centrally determined either by immunohistochemistry and polymerase chain reaction. Results. TMB and frameshift mutations did not correlate with PD-1/PD-L1 inhibitors benefit. Higher densities of T cell populations and PD-L1 expression were observed among IT-respond. Biallelic PTEN mutations were more frequent in IT-resist, compared to IT-respond, but biallelic ARID1A mutations were exclusively found in IT-respond. Biallelic ARID1A mutated tumours had the highest immune infiltration and PD-L1 scores, contrary to tumours with CTNNB1 mutation or biallelic PTEN mutations. Levels of Fusobacterium nucleatum did not correlate with benefit to PD-1/PD-L1 inhibitors. Misdiagnosis of MSI-H/dMMR phenotype consisting of MSS by polymerase chain reaction and dMMR by immunohistochemistry were only found in IT-resist group, although the whole cohort presented a genomic signature of MSI-H/dMMR. Conclusion. In advanced colorrectal cancer MSI-H/dMMR: 1. TMB is not a predictive factor of response to PD-1/PD-L1 inhibitors, contrary to T cell infiltration and PD-L1 expression, although further studies are required; 2. Biallelic ARID1A mutations, contrary to biallelic PTEN mutations and Wnt signalling activation through CTNNB1 mutation, associate with high and low T cell immune infiltrates, respectively, and deserve special interest because potential association with PD-1/PD-L1 inhibitors benefit; 3. Levels of Fusobacterium nucleatum do not correlate with benefit to PD-1/PD-L1 inhibitors, but further studies are warranted becasuse the biological background; 4. Discordances between techniques regarding the diagnosis of MSI-H/dMMR phenotype associate poor benefit to PD-1/PD-L1 inhibitors; 5. The development of biomarkers in immunotherapy field must rely on multimodal analysis encompassing the different hallmarks of MSI-H/dMMR colorrectal cancer.

[ca] Antecedents del tema. La recerca i validació de biomarcadors de resposta a la immunoteràpia en el càncer colorectal avançat amb fenotip Microsatellite Instability High / Deficient Mismatch Repair system (MSI-H / dMMR) constitueix un dels principals reptes en el panorama de el càncer colorectal, en part justificat per la baixa freqüència d'aquest fenotip (al voltant de el 5% dels tumors avançats). Pacients i mètodes. Pacients amb càncer colorectal avançat MSI-H / dMMR tractats amb immunoteràpia basada en inhibidors de PD-1 / PD-L1 a l'Hospital Vall d'Hebron van formar la cohort d'estudi. Segons si la supervivència lliure de progressió a inhibidors de PD-1 / PD-L1 va ser major a 6 mesos o igual / menor, els pacients van ser dividits en dos grups, el grup IT-respon (n: 9 pacients), i el grup IT-resist (n: 7 pacients), respectivament. Amb l'objectiu de dilucidar factors predictius de benefici a inhibidors de PD-1 / PD-L1, es va dur a terme una anàlisi exploratòria multimodal que va incloure genòmica (seqüenciació de nova generació amb un panell de 431 gens per determinar càrrega mutacional tumoral, mutacions Frameshift i patró de gens mutats), microambient tumoral (anticossos dirigits a CD3, CD8, FOXP3 i PD-L1) i microbioma en tumor focalitzat en Fusobacterium nucleatum (tècnica RNA In Situ Hybridization). En relació a la determinació del fenotip MSI-H / dMMR, es va realitzar una revisió central mitjançant immunohistoquímica i reacció en cadena de la polimerasa. Resultats. La càrrega mutacional tumoral i les mutacions Frameshift no es van correlacionar amb el benefici als inhibidors de PD-1 / PD-L1. En l'anàlisi de microambient tumoral es va constatar una major densitat de les diferents subpoblacions de cèl·lules T i d'expressió de PD-L1 en el grup IT-respon. Les mutacions bial. lèliques a PTEN van ser més freqüents en el grup IT-resist en comparació amb el grup IT-respon. Les mutacions bial. lèliques a ARID1A van ser objectivades exclusivament en el grup IT-respon. Els tumors amb mutacions bial. lèliques a ARID1A van presentar la major densitat limfocitària de la cohort i de PD-L1, al contrari que els tumors amb mutacions a CTNNB1, i a PTEN bial. lèliques. Els nivells de Fusobacterium nucleatum no es van correlacionar amb el benefici a inhibidors de PD-1 / PD-L1. Les discordàncies entre tècniques consistents en un fenotip MSS segons la reacció en cadena de la polimerasa i un fenotip dMMR segons la immunohistoquímica, es van trobar només en el grup IT-resist, tot que tota la cohort tenia una signatura genòmica compatible amb fenotip MSI- H / dMMR. Conclusions. En el context de el càncer colorectal avançat amb fenotip MSI-H / dMMR: 1. La càrrega mutacional tumoral no és un factor predictiu de benefici a inhibidors de PD-1 / PD-L1, a diferència de la infiltració limfocitària, encara que són necessaris més estudis; 2. Les mutacions bial. lèliques a ARID1A s'associen a una marcada infiltració tumoral per cèl·lules T, al contrari que les mutacions bial. lèliques a PTEN i l'activació de la via de Wnt a través de mutacions a CTNNB1. Aquestes troballes, que correlacionen amb patrons de resposta a inhibidors de PD-L1 / PD-L1, requereixen de major investigació pel seu potencial interès; 3. Els nivells de Fusobacterium nucleatum tumoral no correlacionen amb el benefici a inhibidors de PD-1 / PD-L1, però calen més estudis en aquesta direcció per la base biològica existent; 4. Els resultats discordants entre tècniques diagnòstiques de fenotip MSI-H / dMMR s'associen a un benefici limitat als inhibidors de PD-L1 / PD-L1; 5. El desenvolupament de biomarcadors sòlids en el camp de la immunoteràpia s'ha de basar en anàlisi multimodals representatius dels diferents hallmarks de el càncer colorectal MSI-H / dMMR.