*含有2-巯基乙醇，水硫酸钠和醋酸
将含有游离唾液酸(5 pmol-5 nmol)的样品放入螺旋盖1.5 ml试管中。
注意:样品体积必须保持在50μl以下。由于以下反应需要酸性条件，因此pH必须是中性的或酸性的。
用试剂1：试剂2：H的比例制备混合溶液21:5:4 O。在样品中加入200µl的混合溶液。混合试管，使反应在50°C下进行2.5小时，避光。
注意:混合溶液在4℃下至少为一周稳定。
在冰上冷却管以终止反应。
每一反应混合物注入10µl到HPLC柱中。样品中唾液酸的量可以根据唾液酸标准品的峰高从校准曲线中计算出来。
存放在-20°C。保护DMB溶液免受光线。
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